做過細(xì)胞實驗的同學(xué),大部分都接觸過 CCK-8。既然 CCK-8 應(yīng)用如此廣泛,那還能發(fā)高分文章嗎?答案當(dāng)然是肯定的!今天小 M 就帶大家了解一下 CCK-8 如何發(fā)出高分文章~
Section.01
與兄弟姐們相比,
CCK-8 的優(yōu)勢在哪里?
CCK-8 是一種基于 WST-8 的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測試劑。其優(yōu)點是靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,操作簡單。可用于細(xì)胞增殖測定,細(xì)胞毒性的檢測,細(xì)胞活力檢測,藥物篩選,以及細(xì)胞生長抑制檢測等。那么常用的檢測方法有哪些?又分別有什么區(qū)別?
表 1. 常見用于細(xì)胞增殖的方法對比。

看完以上歸納總結(jié),大家對目前比較通用的細(xì)胞增殖的檢測方法是不是有了相對完整的認(rèn)識了呢?當(dāng)然,CCK-8 法是經(jīng)典中的經(jīng)典。別急,接下來帶大家看下 CCK-8 如何“上大分"!
Section.02
CCK-8
高分文章拿到手軟
CCK-8 的實驗結(jié)果在文獻(xiàn)中通常以折線圖的形式呈現(xiàn),也有部分呈現(xiàn)為柱狀圖,針對化合物庫藥物篩選類的 CCK-8 結(jié)果,文獻(xiàn)會以熱圖的形式展現(xiàn),下面為大家一一舉例看下。
CCK-8 之折線圖
2025 年 10 月 Zhongyuan Wang 等人在 Mol Cancer (IF=35.9)發(fā)表題為"Hsa_circ_0038737 promotes PARPi resistance in castration-resistant prostate cancer via IGF2BP3-mediated DNPH1 mRNA stabilization"的文章,為了評估 hsa_circ_0038737 敲低和過表達(dá)對前列腺癌 (22RV1 和 PC-3) 細(xì)胞增殖的影響,進(jìn)行了 CCK-8 細(xì)胞活力檢測。結(jié)果表明,沉默 hsa_circ_0038737 顯著抑制了細(xì)胞增殖。
該研究結(jié)果為 PARP 抑制劑耐藥性的分子機(jī)制提供了新的見解,并強調(diào)了靶向 circRNA-RBP 相互作用作為克服去勢抵抗性前列腺癌耐藥性的潛在治療策略。

圖一 (折線圖) 可以清晰直觀的看到細(xì)胞活力隨時間影響而產(chǎn)生的變化趨勢,以及不同處理的細(xì)胞在相同實驗條件下的對比。值得一提的是,作者為了探究 Hsa_circ_0038737 在前列腺癌細(xì)胞增殖中的功能作用。先是通過 CCK-8 細(xì)胞活力檢測和克隆形成實驗檢測細(xì)胞表型變化。為了進(jìn)一步闡明其潛在機(jī)制,通過流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了細(xì)胞周期分析。大家可以關(guān)注的是,實驗設(shè)計的思路和邏輯,以及實驗結(jié)果的展示。
CCK-8 之柱狀圖
2025 年 11 月于 Bioact Mater (IF=20.5) 見刊的發(fā)表題為"Bioprinting of liveplatelet-loaded nerve conduit using energy-dissipative hydrogel"的研究,研究表明 Pluronic F127 二丙烯酸酯 (F127DA) 水凝膠可通過其獨特的能量耗散納米結(jié)構(gòu)有效保護(hù)血小板免受活化。這項工作將有助于設(shè)計用于有效修復(fù)周圍神經(jīng)的新型導(dǎo)管。
該文中通過活/死細(xì)胞染色和 CCK8 檢測法研究了神經(jīng)導(dǎo)管的細(xì)胞相容性。結(jié)果顯示,PLT-F127DA 組和對照組的細(xì)胞存活率無顯著差異。進(jìn)一步通過劃痕實驗評估了該導(dǎo)管 HUVECs 遷移行為的影響;通過 Transwell 遷移實驗評估了該導(dǎo)管對細(xì)胞遷移的影響;進(jìn)行了 RT-qPCR 實驗,探究影響的信號通路。

圖 2. F127DA 和 PLT-F127DA 導(dǎo)管浸出液對施萬細(xì)胞 (SCs) 活力的影響[2]。
區(qū)別于上述折線圖,這類柱狀圖更有利于標(biāo)注不同處理組之間是否存在顯著性差異。因此,選擇哪一類展示方式,更取決于不同的實驗設(shè)計以及需要突出的重點信息。同時,值得我們借鑒的是采用多技術(shù)聯(lián)合驗證圖示,將 CCK-8 與其它方法 (如活死細(xì)胞熒光染色) 的結(jié)果在同一圖表中并列或疊加展示,提供細(xì)胞增殖多維度證據(jù)。
CCK-8 之熱圖
對于熱圖展示 CCK-8 實驗結(jié)果的文獻(xiàn)相對不多,這種展示方式一般適用于大規(guī)模藥物篩選或多因素實驗,用顏色深淺直觀展示不同處理組的細(xì)胞活力差異。2025 年 4 月發(fā)表在 JACS Au 上題為"Machine Learning Reveals Amine Type in Polymer Micelles Determines mRNA Binding, In Vitro, and In Vivo Performance for Lung-Selective Delivery"的文章,采用了該方式,展示 HEK293T 細(xì)胞轉(zhuǎn)染完整膠束庫后的細(xì)胞活力。

該實驗探究了陽離子膠束納米粒子 (MNP) 庫對轉(zhuǎn)染細(xì)胞活力的影響。橫坐標(biāo) A1-A10 表示這些納米粒子不同程度的烷基取代,縱坐標(biāo) Short、Medium 和 Long 分別表示短、中、長冠狀兩親分子,5 和 10 指示轉(zhuǎn)染的 N/P 比。另一篇 24 年發(fā)表在 Cell Chem Biol 上的文獻(xiàn),也通過熱圖的形式展現(xiàn)了表觀遺傳化合物庫抑制乳腺癌細(xì)胞增殖的藥物篩選實驗結(jié)果。

根據(jù)小 M 多年閱讀文獻(xiàn)的經(jīng)驗來說,CCK-8 的實驗結(jié)果主要就是這三種展現(xiàn)形式。當(dāng)然,最多的還是折線圖。如果大家有看到其他形式的展現(xiàn)方式,歡迎留言~

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產(chǎn)品推薦 |
Cell Counting Kit-8 (HY-K0301) 簡稱 CCK-8 試劑盒,是一種基于 WST-8 而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞活性和細(xì)胞毒性檢測的快速、高靈敏度試劑盒。 |
Thiazolyl Blue (HY-15924) (MTT) 具有細(xì)胞滲透性,被細(xì)胞內(nèi)的 NAD (P) H 氧化還原酶還原為甲臜,通過比色測定,以測量細(xì)胞增殖。 |
Resazurin sodium (HY-111391) (Diazoresorcinol sodium) 是一種藍(lán)色非熒光染料,在活細(xì)胞中能被還原成粉色的具有高度熒光的 Resorufin sodium (Ex=530-560 nm, Em=590 nm)。 |
CFDA-SE (HY-D0938) 與胞內(nèi)細(xì)胞骨架蛋白中的游離胺基反應(yīng),形成具有熒光的蛋白復(fù)合物。 |
5-BrdU (HY-15910)(BrdU) 是一種核苷類似物,可與胸苷競爭摻入 DNA。5-BrdU 通常用于檢測增殖細(xì)胞。 |
Cell-ATP Viability Detection Kit (HY-K0302) 通過對 ATP 進(jìn)行定量以測定培養(yǎng)物中活細(xì)胞數(shù)目及細(xì)胞活力。 |
Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Live & Dead Cells (Calcein/PI) (HY-K1094) 可以同時對活細(xì)胞和死細(xì)胞進(jìn)行雙重?zé)晒馊旧糜诩?xì)胞活性與細(xì)胞毒性的檢測。 |
VF 594 Click-iT EdU Universal Cell Proliferation Detection Kit (HY-K1085) 含有 EdU 及 VF 594 Azide 染料,以及點擊化學(xué)所需的催化劑、緩沖液,從而實現(xiàn)簡單、快速、高效、靈敏地細(xì)胞增殖檢測。 |
參考文獻(xiàn):
[1] Wang Z, et, al. Hsa_circ_0038737 promotes PARPi resistance in castration-resistant prostate cancer via IGF2BP3-mediated DNPH1 mRNA stabilization. Mol Cancer. 2025 Oct 2;24(1):238.
[2] Bioprinting of live platelet-loaded nerve conduit using energy-dissipative hydrogel. Bioact Mater. 2025 Nov 21:57:616-631. Zhang J, et, al.
[3] Panda S, et, al. Machine Learning Reveals Amine Type in Polymer Micelles Determines mRNA Binding, In Vitro, and In Vivo Performance for Lung-Selective Delivery. JACS Au. 2025 Apr 14;5(4):1845-1861.
[4] Zhang K, et, al. A chemical screen identifies PRMT5 as a therapeutic vulnerability for paclitaxel-resistant triple-negative breast cancer. Cell Chem Biol. 2024 Nov 21;31(11):1942-1957.e6.


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