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DiI

MCE 國際站：DiI

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-D0083

CAS：41085-99-8

Synonyms：DiIC18(3

純度：99.92%

存儲條件：4°C，密封保存，避光防潮 *溶劑中：-80°C，6個月；-20°C，1個月（密封保存，避光防潮）

運輸條件：美國大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產品活性：DiI 是一種長鏈碳菁染料。碳菁染料廣泛用作親脂性示蹤劑，用于標記細胞、細胞器、脂質體、病毒和脂蛋白。

生物活性：DiI (DiIC18(3)) 是一種用于膜標記的親脂性羰花青熒光染料。 DiI 在 549 nm 處具有大的吸收，在 565 nm 處具有最的發射。 DiI 在水懸浮液中會發出輕微的熒光，但在與細胞膜結合時會變亮。

體外：羰花青染料廣泛用作 Di 來標記細胞、細胞器、脂質體、病毒和脂蛋白。長鏈羰花青包括 DiO (DiOC18 (3))、DiI (DiIC18 (3))、DiD (DiIC18 (5)) 和 DiR，以及二烷基氨基苯乙烯基染料 DiA (4-Di-16-ASP) 用于標記膜和其他疏水結構。DiIC16 (3) 具有比 DiI (C18) 更短的烷基取代基 (C16)。它們在脂質環境中具有較高的消光系數、環境依賴性熒光和短的激發態壽命。它們在室溫下是油狀物，在水中發出微弱熒光，但當摻入膜中或與親脂性生物分子結合時，它們發出高熒光且相當耐光。這些光學特性使它們成為細胞質膜染色的理想選擇。一旦應用于細胞，這些染料就會在質膜內橫向擴散，導致整個細胞染色[1]。DiO、DiI、DiD 和 DiR 呈現出不同的綠色、橙色、紅色和紅外熒光，從而促進活細胞的多色成像和流式細胞術分析。DiO 和 DiI 可分別與標準 FITC 和 TRITC 過濾器一起使用。其中 DiI 及其類似物是常用的，因為它們通常表現出非常低的細胞毒性。此外，DiI 廣泛用于測定 LDL 和 HDL 等脂蛋白。親脂性氨基苯乙烯基染料 DiA 也常用于神經元示蹤[2]。 一般方案 1. 制備 Di 染色液 一個。制備 DMF、DMSO 或乙醇儲備溶液：儲備溶液應在二甲基甲酰胺 (DMF)、二甲基亞砜 (DMSO 或乙醇 DMSO 中配制，濃度為 1-5 mM。作為 Di 的溶劑，DMF 優于乙醇。儲備溶液應任何未使用的溶液需要等分并重新冷凍至少 -20℃。避免反復冷凍/解凍循環。溶液可儲存 6 個月。 b. 準備工作溶液：將儲備溶液稀釋到合適的緩沖液如無血清培養基、HBSS 或 PBS 配制成 1 至 5 μM 的工作液。我們不建議將水溶液存放超過一天。 注意：工作液的最終濃度 2. 懸浮細胞 a. 1000g 4℃離心3-5分鐘，棄上清，PBS洗2次，每次5分鐘。細胞密度為1×106/mL。 b. 加入1 mL Di工作液，室溫孵育5-30分鐘。 C. 4℃，400g離心3-4分鐘，棄上清。 d．用PBS洗滌2次，每次5分鐘。 e．用無血清細胞培養基或PBS重懸細胞，熒光顯微鏡或流式細胞術觀察。 3.貼壁細胞 a．在無菌蓋玻片上培養貼壁細胞。 b.從培養基上取下蓋玻片并吸出多余的培養基。 c.加入100 μL工作液，輕搖使之覆蓋細胞，室溫孵育5-30分鐘。 d．用培養基洗兩次，每次5分鐘。通過熒光顯微鏡或流式細胞儀觀察。 MCE尚未獨立證實這些方法的準確性。僅供參考。

體內：DiI 標記的運動神經元在培養中可存活長達 4 周，在體內可存活長達一年[1]。MCE尚未獨立證實這些方法的準確性。僅供參考。

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參考文獻：
[1]. D P Kuffler, et al. Long-term survival and sprouting in culture by motoneurons isolated from the spinal cord of adult frogs. J Comp Neurol. 1990 Dec 22;302(4):729-38.
[2]. Gan WB, et al. Multicolor "DiOlistic" labeling of the nervous system using lipophilic dye combinations. Neuron. 2000 Aug;27(2):219-25.