產品概述

本品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的針對Pumilio 1（PUM1）蛋白的山羊多克隆抗體，貨號A300-201A。該抗體可識別人及小鼠來源的Pumilio 1，適用于免疫沉淀（IP）和蛋白質印跡（WB）檢測。抗體經抗原親和純化，濃度高達1000 µg/ml，為高靈敏度RNA結合蛋白研究提供了可靠工具。

核心規格參數

項目 | 詳細信息

靶點 | Pumilio 1 (PUM1)

反應性 | 小鼠、人

應用 | IP, WB

宿主 | 山羊

免疫原 | 第225-275位氨基酸區域

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

亞型 | IgG

偶聯物 | 非偶聯

純度 | 抗原親和純化

抗原物種 | 人

濃度 | 1000 µg/ml

保存條件 | 2-8 °C

有效期 | 收貨之日起1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊d化鈉

應用方法與推薦稀釋度

蛋白質印跡（WB）

所有WB實驗使用含5%脫脂牛奶的TBST作為封閉液及抗體稀釋液。一抗孵育條件為過夜孵育。

二抗系統：使用驢抗山羊IgG重鏈和輕鏈抗體（貨號A50-101P）作為二抗。

推薦稀釋度：1:2000 1:10,000

操作要點：

封閉充分可降低非特異性背景

一抗過夜孵育建議在4°C條件下進行

洗膜步驟建議使用TBST洗滌3次，每次5-10分鐘

免疫沉淀（IP）

推薦用量：6 µg 抗體 / mg 細胞裂解液

操作建議：

1. 將6 µg抗體與含1 mg蛋白的細胞裂解液混合

2. 4°C孵育1-2小時或過夜

3. 加入蛋白A/G瓊脂糖珠，繼續孵育1-2小時

4. 充分洗滌沉淀復合物（建議4-5次）

5. 使用SDS上樣緩沖液洗脫，煮沸變性后進行WB檢測

產品背景信息

蛋白功能概述

Pumilio 1（Pumilio同源物1）是一種進化上高度保守的RNA結合蛋白，主要作為翻譯調控因子，參與胚胎發生和生殖細胞發育相關基因的表達調控。該蛋白在多種組織類型中廣泛表達，與生殖細胞特異性的Pumilio 2具有同源性。

分子機制

Pumilio 1通過其C端RNA結合結構域識別靶mRNA的特定序列（通常為“UGUANAUA"基序），招募其他翻譯抑制因子（如CNOT死烯化復合物），從而抑制靶mRNA的翻譯或促進其降解。該機制在干細胞維持、神經元突觸可塑性及細胞衰老過程中發揮關鍵作用。

研究意義

Pumilio 1功能異常與多種疾病相關，包括神經系統發育缺陷、癌癥進展及生殖障礙。因此，高特異性的Pumilio 1抗體對于以下研究至關重要：

RNA-蛋白相互作用分析

翻譯調控機制解析

疾病模型中Pumilio 1表達水平的定量檢測

免疫共沉淀結合質譜鑒定新型相互作用蛋白

別名列表

HSPUM

PUMH

PUMH1

pumilio homolog 1

pumilio-1

PUML1

SCA47

保存與穩定性注意事項

1. 保存溫度：2-8°C，請勿冷凍。反復凍融會導致抗體變性及活性損失。

2. 有效期：收貨之日起1年內穩定。

3. 防腐劑：緩沖液中含有0.09%疊d化鈉作為防腐劑，使用時應遵守相關實驗室安全規范（如避免攝入、接觸皮膚）。

4. 分裝建議：若需長期使用，可將抗體分裝成單次用量的小份，分裝后仍應保存于2-8°C，避免冷凍。

功能性優勢總結

1. 高濃度配方（1000 µg/ml）：減少抗體使用體積，便于實驗設計及長期批量實驗的一致性。

2. 親和純化工藝：特異性識別Pumilio 1第225-275位氨基酸區域，與非特異性蛋白交叉反應極低。

3. 廣譜反應性：同時識別人和小鼠樣本，適用于跨種屬比較研究。

4. 雙重應用驗證：IP與WB均經過優化驗證，降低方法開發的時間成本。

5. 明確的工作濃度：WB（1:2000-1:10000）和IP（6 µg/mg裂解液）提供具體起始條件，便于快速復現實驗結果。

常見應用場景舉例

應用場景 | 推薦實驗方案

細胞系中Pumilio 1表達量檢測 | WB，1:5000稀釋，檢測30-50 µg總蛋白

小鼠組織裂解液中蛋白水平比較 | WB，1:4000稀釋，使用組織特異性內參

內源性Pumilio 1免疫共沉淀 | IP（6 µg/mg裂解液），結合WB檢測或質譜分析

RNA結合蛋白復合物純化 | IP后提取RNA進行qRT-PCR或測序