PCR實驗耗材怎樣選擇？

    關(guān)于PCR實驗耗材怎樣選擇，很多人可能還不是很了解，Aiscenbio技術(shù)小編為您簡單介紹如下：

    首先，我們羅列一下，對于PCR實驗操作有哪幾種影響因素？大家通常會聯(lián)想到的無非是獲得的DNA/RNA的品質(zhì)、引物的特異性，以及逆轉(zhuǎn)錄的效率、甚至包括DNA聚合酶的增長度、保真度等狀況，但較少一些人會聯(lián)想到實驗耗材的選取，有可能也會直接影響到您的實驗操作結(jié)果。

    PCR實驗耗材按實驗類型推薦耗材

    1.?常規(guī)PCR?

    ?推薦耗材?：0.2mL透明八聯(lián)管（低容設(shè)計）

    ?優(yōu)勢?：熱傳導(dǎo)快，適配大多數(shù)PCR儀，操作便捷

    ?品牌型號?：愛賽因0.2ml平蓋八排管

    2.?熒光定量PCR（qPCR）?

    ?推薦耗材?：白色低容96孔板+光學(xué)級粘性封板膜FYJ130S3780A

    ?原因?：白色壁面增強(qiáng)熒光反射，提升信噪比；光學(xué)膜保障底部讀值準(zhǔn)確性

    3.高通量/自動化實驗?

    ?推薦耗材?：ANSI/SBS標(biāo)準(zhǔn)尺寸耗材+卷式鋁箔熱封膜FA25SR80C

    ?適配設(shè)備?：Agilent、4TI、Azenta等全自動封膜儀

    ?推薦型號?：FA35SR80C/耐DMSO卷膜（寬115mm）

    PCR實驗耗材怎樣選擇呢？

    第一步，我們要確認(rèn)做的是哪種PCR實驗。按照檢測方法的不同，可以分為熒光定量PCR法和普通PCR法。熒光定量PCR法是實時檢測熒光信號的，不僅對密封性和導(dǎo)熱性有要求，還對避光性與透光性有一定的要求，而普通PCR法一般是終點PCR跑膠法測定，因而在選擇耗材時只要關(guān)注密封性和導(dǎo)熱性即可。

    第二步，即確認(rèn)好了實驗操作類型后，我們就可以選擇耗材了。如上文可知，避光性與透光性，導(dǎo)熱性、密封性等因素是我們要重點關(guān)注的，那么，我們再了解一下為什么要關(guān)注這些性能。

    1）避光性是針對熒光定量來說的，若在實驗操作過程中沒注意避光，帶有熒光的試劑被過度消耗，那就會直接影響擴(kuò)增效率，導(dǎo)致實驗結(jié)果不夠準(zhǔn)確；

    2）透光性也是針對熒光定量而言的，它具有定量實時的特點，耗材本身的透光性高低關(guān)系到檢測的熒光信號的多少，若耗材的透光性太低，應(yīng)檢測到的信號檢測不到，也會導(dǎo)致對實驗結(jié)果的誤判；

    3）導(dǎo)熱性越好越均勻，PCR的速度就越快，相應(yīng)的準(zhǔn)確度也更高；

    4）密封性方面，產(chǎn)物揮發(fā)得越少，得到的產(chǎn)物就越多，相應(yīng)的，氣溶膠產(chǎn)生得也更少，這樣對于下一輪實驗操作的污染也就越少，這意味著假陽性的產(chǎn)生率也越低。

    注：以上僅供參考，不作為實驗依據(jù)，具體請聯(lián)系品牌或技術(shù)老師!

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