雙折射物體具有通過折射將單束光分成兩束不同光的特性。雙折射材料包括具有高度有序分子結構的材料,如方解石或氮化硼晶體。生物標本(如纖維素或淀粉)也具有雙折射性。雙折射與線性偏振光相結合,可用于顯微鏡觀察,實現兩束不同光線的干涉,從而產生色彩效果,如光環和結構發光。
普通光學顯微鏡至少需要兩個附加組件才能實現偏光顯微鏡觀察。要檢測雙折射性,必須使用線偏振光照明。因此,必須在顯微鏡的光束路徑中插入兩個偏振濾光片。通過起偏器產生偏振光來照射試樣,第二個偏振濾光片(稱為檢偏器)將檢測到的光限制為折射光。
偏振濾光片必須互成 90° 角,才能達到所謂的 "全黑位置"。當偏振濾光片設置在這個位置時,沒有光線會進入相機或目鏡,圖像將是暗的。設置為“全黑"是偏光顯微鏡的一個重要步驟,因為它可以確保只有因試樣而導致偏振面發生變化的光線才是可見的。
圖 1:偏光顯微鏡的原理: 光通過起偏器偏振。通過起偏器后,光被聚光器聚焦到試樣上。如果試樣具有雙折射性或含有雙折射結構,則部分光線的偏振面會旋轉 90°(草圖中的紅線表示)。試樣的圖像被物鏡放大后,打到檢偏器 上。如果檢偏器相比偏起偏器旋轉 90°(即所謂的 "全黑位置"),則只有通過雙折射材料的光才能被允許通過,觀察者才能看到。因此,只有偏振結構可見。
當光線通過偏振濾光片時,會產生線性偏振光。如果線性偏振光在正確的偏振面上通過雙折射材料,則會產生折射并分成兩束光線,其中一部分光線的偏振面會旋轉 90°。如果第二個偏振器(檢偏器)對齊正確(即相對于偏振濾光片成 90°),折射光線就會通過第二個偏振器(檢偏器)。因此,只有雙折射材料才能在偏振光顯微鏡中產生圖像。
圖 2:太陽光或燈泡產生的光是無偏振的。這意味著電磁波在所有方向上都會發生振蕩。如果光通過起偏器,就會產生具有明確偏振的光,在這種情況下就是垂直偏振光。如果這束偏振光照射到檢偏器,并且旋轉了 90°,則不會有光通過檢偏器。因此,如果兩個偏振片相對轉動 90°,它們就處于所謂的 "全黑位置",因為在檢偏器后面看不到光了。
重要的是,被檢測的雙折射材料的偏振軸偏振片產生的處于同一偏振軸上。因此,許多偏光顯微鏡都配備了旋轉平臺,以確保物體的偏振面與偏振濾光片的偏振面容易對準。偏光顯微鏡的特殊應用可使用各種附件。
貝物朗透鏡可用于對物鏡后孔聚集的晶體圖案進行圓錐觀察。此外,延緩板或補償器可用于對雙折射試樣進行定量分析。
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