人血清、血漿是臨床檢測、生物實驗、抗體分析、生化指標研究的核心基礎樣本，樣本質量直接決定實驗數據準確性與重復性。取樣不規范、分離不徹底、分裝操作不當，極易造成溶血、蛋白降解、污染、反復凍融等問題，導致實驗失效、數據偏差。為統一實驗室操作標準，保障人血清血漿樣本完整性與有效性，本文制定標準化取樣與分裝實操指南。
 

　　一、實驗前期準備規范
 

　　1. 耗材準備：使用無菌無酶采血管、離心管、凍存管、移液槍頭，所有耗材需無熱源、無溶血污染、無核酸酶殘留。血清、血漿樣本耗材單獨專用，避免與普通實驗耗材混用，防止交叉污染。
 

　　2. 設備預處理：提前調試離心機、超凈臺、低溫冰箱，確認設備運行穩定。離心機提前預冷至4℃，超凈臺紫外滅菌30分鐘以上，保證操作環境無菌潔凈。
 

　　3. 人員防護：全程佩戴一次性手套、口罩、實驗服，嚴格遵循生物安全操作規范，避免手部接觸樣本、管口，防止人為污染與生物風險。
 

　　4.樣本前期靜置：全血采集后避免劇烈震蕩，豎直靜置，防止紅細胞破裂引發溶血，為后續分離操作做好準備。
 

　　二、人血清取樣分離操作步驟
 

　　血清為血液自然凝固后析出的上清液，不含抗凝劑，適用于生化、免疫、抗體檢測等實驗。
 

　　1. 自然凝固：將無抗凝全血樣本室溫豎直靜置30～60分鐘，讓血液充分自然凝固，形成血凝塊，嚴禁快速震蕩、低溫急凍凝固。
 

　　2. 低溫離心分離：靜置完成后，將采血管平穩放入預冷離心機，設置轉速3000r/min，離心10～15分鐘。離心后樣本分層明顯，上層為淡黃色澄清血清，下層為血凝塊與紅細胞。
 

　　3. 血清吸取取樣：在超凈臺內緩慢吸取上層澄清血清，吸取過程中避開中間白細胞層與下層紅細胞，嚴禁吸到血凝塊。若樣本存在輕微絮狀物，可二次低速離心過濾，保證血清澄清無雜質。
 

　　4. 溶血樣本剔除：肉眼觀察血清出現發紅、渾濁溶血現象，直接廢棄，不得用于實驗檢測，避免影響指標結果。
 

　　三、人血漿取樣分離操作步驟
 

　　血漿為全血添加抗凝劑后離心得到的上清液，含纖維蛋白原，適用于凝血功能、流變學、大分子物質檢測實驗。
 

　　1. 抗凝混勻處理：使用含EDTA、肝素或檸檬酸鈉抗凝采血管，采血后立即輕柔顛倒混勻5～8次，保證抗凝劑與全血充分融合，防止局部凝血、產生微小凝塊。禁止劇烈搖晃，避免機械溶血。
 

　　2. 低溫高速離心：混勻后即刻上機離心，4℃、3500r/min離心15分鐘，充分分離血漿、白細胞、紅細胞層，保證上層血漿清亮透明。
 

　　3. 血漿取樣提?。浩椒€取出樣本，小心吸取上層淡黃色血漿，避開中層白膜層，杜絕細胞雜質混入，保證血漿純度。若需高純度血漿，可進行二次離心提純。
 

　　四、標準化樣本分裝實操規范
 

　　血清、血漿樣本不宜大體積凍存，反復凍融會破壞蛋白、酶類、活性因子，導致樣本失效，必須規范分裝保存。
 

　　1. 分裝環境要求：全程在無菌超凈臺內低溫操作，操作過程快速高效，減少樣本室溫暴露時間，防止蛋白降解、微生物污染。
 

　　2. 分裝體積控制：根據常規實驗用量分裝，常用單管體積200μL、500μL、1mL，按需分裝，做到一次取用、一次用完，從根源杜絕反復凍融。
 

　　3. 樣本標記規范：每支凍存管清晰標注樣本類型(血清/血漿)、樣本編號、采集時間、批次、操作人員信息，字跡清晰耐磨，避免樣本混淆、追溯困難。
 

　　4. 分裝操作細節：移液槍精準控量，避免管壁殘留、體積誤差；分裝后瞬時扣緊管蓋，輕彈管底使樣本沉底，簡短離心去除管蓋氣泡，防止漏液、污染。
 

　　五、關鍵質控與禁忌要點
 

　　1. 嚴控溶血風險：劇烈震蕩、溫差過大、離心速度不當均會引發溶血，溶血樣本不可用于生化、免疫、蛋白檢測。
 

　　2. 杜絕反復凍融：血清血漿活性物質對溫度敏感，反復凍融會導致蛋白變性、指標失真，分裝為單次用量是核心質控手段。
 

　　3. 嚴控暴露時間：室溫放置時間過長會導致樣本降解、細菌滋生，取樣分裝全程快速操作，室溫暴露盡量不超過30分鐘。
 

　　4. 嚴禁樣本交叉污染：不同批次、不同組別樣本分開操作，槍頭一次性使用，設備臺面及時消毒，避免交叉污染影響實驗結果。
 

　　六、分裝后暫存與凍存要求
 

　　分裝完成的人血清血漿樣本，短期實驗可置于4℃冷藏暫存(不超過24h)；長期保存需立即轉入-20℃或-80℃低溫冰箱凍存，梯度降溫存放，避免溫度驟變破壞樣本活性。同時建立樣本臺賬，統一編號管理，做到樣本可查、數據可追溯。
 

　　七、結語
 

　　人血清血漿的取樣分離與分裝操作，是生物實驗、臨床檢測的前置核心工序。規范的靜置、離心、取樣、分裝流程，可有效規避溶血、污染、蛋白降解、反復凍融等常見問題，大程度保留樣本生物活性與理化特性，保障后續實驗數據真實、準確、可重復，為各類生物研究與臨床檢測提供合格樣本基礎。