?前言:
食用菌是人們日常膳食中的常見食材,不僅味道鮮美,而且營養價值較高,具有良好的保健功能。食用菌中含有豐富的麥角甾醇,它是一種具有重要營養和生理活性的甾體化合物,對人體鈣磷代謝和骨骼健康具有重要作用。此外,研究表明麥角甾醇具有潛在的健康益處和重要的生理功能,包括降低膽固醇和減少心血管疾病發生率、降血糖、抗氧化、抗菌和抗腫瘤活性等,使其成為評價食用菌營養價值和質量的重要指標之一。食用菌中的麥角甾醇主要以游離形式存在,其含量因菌種、生長環境、栽培方式和加工工藝等因素而存在顯著差異,因此建立科學準確的檢測方法對食用菌品質評價至關重要。
由中華全國供銷合作總社昆明食用菌研究所牽頭,聯合了賽默飛等11家專業機構共同制定的行業標準GH/T 1475-2024《食用菌中游離麥角甾醇的測定 高效液相色譜法》,已于2025年6月1日起在全國范圍內正式實施。該標準建立了食用菌中游離麥角甾醇含量的統一檢測方法,標準詳細規定了試劑材料、儀器設備、樣品前處理、分析條件、結果計算和精密度要求等技術內容,為食用菌質量評價提供了科學可靠的技術依據。在GH/T 1475-2024標準發布之前,我國食用菌行業中游離麥角甾醇的檢測方法缺乏統一標準,不同實驗室和檢測機構采用的自建方法存在較大差異,導致檢測結果難以比較,影響了產品質量評價的客觀性和公平性。
賽默飛作為標準起草單位之一,參與了標準編制,在賽默飛實驗室進行了檢測方法驗證等工作。實驗中采用賽默飛Vanquish液相色譜,通過大批量樣本的檢測,得到了良好的精密度、線性關系、加標回收率等結果。
實驗結果:
驗證實驗選用賽默飛經典的Hypersil BDS C18色譜柱,該色譜柱采用堿脫活處理,使得硅膠表面殘余硅醇基活性降至最低,化合物峰形優異,能夠有效減少拖尾,并且具有出色的穩定性和重現性。標準溶液中麥角甾醇組分可以有效檢出,且峰型優異,理論塔板數高。空白溶劑對麥角甾醇組分的檢測無干擾影響。通過檢測食用菌實際樣品,樣品中其他組分與麥角甾醇實現基線分離,對麥角甾醇組分的檢測無干擾影響。說明Hypersil BDS C18色譜柱的分離效果好,方法專屬性高。
圖1:食用菌實際樣品色譜圖
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圖2:標準溶液(黑)和空白溶劑(紅)色譜圖
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圖3:色譜峰結果
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配制不同濃度的標準品溶液,考察線性情況。在濃度1-100μg/mL內呈現良好線性關系,R2>0.999,說明此方法線性關系好。
圖4 標準曲線(點擊查看大圖)
圖5 標準曲線結果
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為了驗證方法的精密度,分別選擇3種干品和3種鮮品食用菌實際樣本,每種樣本均平行處理并測定6次。得到的檢測結果中每種食用菌樣本均具有良好的精密度結果,RSD為0.34%~0.99%,說明方法精密度良好。
表1 鮮品樣本精密度
表2 干品樣本精密度
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實驗還利用3種食用菌實際樣本,分別從低中高3種濃度水平進行加標回收實驗,考察方法的準確度。實驗結果表明,3種樣本均具有良好的回收率檢測結果,平均回收率為98.2%~99.9%,說明方法的準確度高。
表3 回收率數據
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總結與展望:
綜上所述,通過賽默飛Vanquish Core液相色譜進行檢測方法驗證,取得了理想的實驗結果,方法的專屬性、線性關系、精密度、準確度均良好。
賽默飛Vanquish系列液相色譜自問世以來,廣泛服務于制藥、食品、環境及化工等不同領域。作為新一代的液相色譜平臺,其獨特的模塊化設計,多類型泵及進樣模塊,靈活的柱溫雙控溫模式,高靈敏的檢測器,全方位保證了實驗結果可靠性及準確性,同時大大提高了樣品的通量及分析速率,日漸成為綠色環保、提速增效的代表性實驗室產品,受到了來自各行各業客戶的一致好評。
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GH/T 1475-2024標準的發布實施填補了我國食用菌功能成分檢測標準的空白,為食用菌中游離麥角甾醇的檢測提供了全國統一的、科學可靠的方法規范。通過統一檢測方法,標準有效解決了此前因方法差異導致的檢測結果不可比問題,顯著提升了檢測數據的可靠性、可比性和權威性。標準的實施為食用菌產業質量升級提供了技術支撐,對產業鏈各環節也產生深遠影響,對推動產業標準化、優質化和國際化發展具有重要意義。
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