賽默飛高效液相色譜儀(HPLC)作為分析化學領域的核心工具,憑借其高精度分離與檢測能力,廣泛應用于藥物研發、環境監測及食品安全等領域。其核心原理基于溶質在固定相與流動相間的分配系數差異,通過高壓驅動流動相攜帶樣品流經色譜柱,實現物理分離。這一過程依賴固定相填料與樣品分子間的相互作用力差異——相互作用力強的組分移動緩慢,反之則快速通過,最終形成保留時間差異的分離效果。

一、操作流程:標準化步驟確保數據可靠性
1.流動相準備
選用色譜純溶劑,按比例混合后經0.45μm微孔濾膜過濾,超聲脫氣10—20分鐘以消除氣泡。含緩沖鹽的流動相需延長脫氣時間至5分鐘,避免泵送過程中產生氣泡干擾。例如,某實驗室分析藥物雜質時,采用甲醇-水(70:30)流動相,脫氣后基線穩定性顯著提升。
2.儀器初始化與排氣
依次啟動泵、進樣器、柱溫箱及檢測器電源,通過Chromeleon CDS軟件設置流動相比例、流速(1.0mL/min)及檢測波長(230nm)。擰松泵單元快速清洗閥,以3.0mL/min流速沖洗管路2分鐘,重復操作確保流動相連續無氣泡。
3.樣品分析與數據采集
將標準品與樣品置于自動進樣器,啟動序列分析。系統自動完成進樣、分離及檢測,生成色譜圖后,利用軟件積分功能處理峰面積與保留時間數據。若出現拖尾峰,可調整流動相pH或更換色譜柱。例如,某食品檢測實驗室通過優化流動相pH,成功改善了維生素C的峰形。
4.關機維護
分析結束后,先用甲醇-水(5:95)沖洗色譜柱30分鐘,再用100%甲醇沖洗30分鐘以去除殘留物。關閉軟件后,依次關閉各模塊電源,并填寫使用記錄。
二、核心優勢:技術迭代驅動應用拓展
賽默飛液相色譜儀通過集成四元高壓溶劑混合技術、智能流速控制及生物兼容性設計,實現從常規分析到高通量篩查的全場景覆蓋。例如,Vanquish Horizon UHPLC系統配備1.5μm實心核粒子色譜柱,結合雙模式恒溫控制,可在1200bar壓力下實現亞2分鐘級分離,顯著提升實驗室產出效率。其與Orbitrap質譜儀的聯用,更將檢測靈敏度提升至200fg級別,滿足復雜基質中痕量組分的精準定量需求。
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