寶寶的腸道舒不舒服，往往決定了一罐奶粉“好不好消化”。在眾多配方成分中，低聚半乳糖（GOS）因其益生元作用，被視為讓奶粉更接近母乳的重要一環。

但真正的營養價值，不能只寫在配方表上——低聚半乳糖的作用，必須建立在“準確定量”的科學基礎之上。

低聚半乳糖是一種以半乳糖或葡萄糖分子為基體連接1~7個半乳糖基的功能性低聚糖[1]，2007年，中華人民共和國原衛生部第12號公告首次批準GOS為食品添加劑新品種，使用范圍為嬰兒配方食品、較大嬰兒和幼兒配方食品。2008年第20號公告批準GOS為新資源食品，使用范圍擴增至乳制品、飲料、焙烤食品及糖果[2]。

奶粉中低聚半乳糖的檢測方法有離子色譜法、高效液相串聯質譜法等多種方法，GB 5009.289-2023方案作為近兩年新發布的國標方法檢測靈敏度高、結果準確，目前為乳制品行業配方奶粉中低聚半乳糖含量測定的主要方法之一。本文采用Vanquish液相色譜儀參照GB 5009.289-2023測定嬰幼兒配方奶粉中低聚半乳糖的含量。

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強大的儀器硬件與軟件，互聯互通！

Thermo Fisher Vanquish高效液相色譜儀，基座:Vanquish System Base，泵：Vanquish Core Quaternary Pump（VC-P21-A），自動進樣器：Split Sampler CT（VC-A12-A），柱溫箱：Vanquish Column Compartment C（VC-C10-A），檢測器：Vanquish Fluorescence Detector C with Dual-PMT（VC-D51-A），色譜軟件：變色龍Chromeleon 7.3。

圖 賽默飛Vanquish液相產品

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優化分析條件，使分離度更優！

色譜柱：Accucore 150 amide Hilic (150 mm×4.6 mm，2.6μm)，流動相：A：乙腈，B：50mmol/L甲酸銨溶液（pH=4.4±0.1），梯度程序見表1。流速0.7mL/min，進樣體積10µL，柱溫30 °C；熒光檢測器激發波長355nm，發射波長430nm。

表1 梯度洗脫條件

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對照品溶液和供試品分別按GB 5009.289-2023衍生處理后進樣分析，液相色譜測定結果見圖。

圖 對照品溶液測定譜圖

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圖 供試品溶液測定譜圖

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呈現結果

方法線性

將配制好的工作曲線對照品溶液，衍生后注入高效液相色譜儀進行分析，以進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標，考察方法的線性。結果顯示，在3.00到500.00µg/mL濃度范圍內一次線性良好。

表2 線性相關測定結果

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含量測定結果

精密稱取某奶粉樣品1.0g兩份，按照GB 5009.289-2023試樣處理方法，制備供試品溶液，上機測定。采用變色龍軟件峰組計算功能，將相同聚合度的低聚半乳糖歸為一組，統一用對應該聚合度的對照溶液工作曲線進行計算，低聚半乳糖含量見表3。

表3 樣品測定結果

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結語

1、試驗開始前，需采用液相色譜-質譜法對衍生后的低聚麥芽糖進行分析，監測LC-MS/MS儀器中不同聚合度糖的保留時間段，并根據LC-MS/MS與HPLC儀器間的死時間差確定HPLC測定的不同聚合度糖保留時間段；

2、試樣測試前需通過GB 5009.289-2023中附錄A方法的其他低聚還原性物質鑒別測試，如試樣中其他低聚還原性物質總含量大于定量限，則本文方法不適用該試樣的測定分析；

3、變色龍軟件峰組計算功能可以實現多組分的歸組積分、命名、結果計算和報告輸出，操作簡便，適用于該品種和《GB 5009.35-2023 食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定》等有類似需要進行色譜峰峰面積加和計算含量要求的品種。

4、賽默飛Accucore 150 Amide HILIC色譜柱分析嬰幼兒配方奶粉中低聚半乳糖，混標和樣品中待測物質均能實現有效分離，滿足標準檢測要求。

參考文獻：

[1] GB 1903.27-2022 食品安全國家標準 食品營養強化劑 低聚半乳糖.

[2]任中夏, 石羽杰, 劉彪, 等. 低聚半乳糖與嬰幼兒健康關系的研究進展[J]. 中國食物與營養, 2020, 26(6):12-16.

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