比色試劑盒：選用適配土壤硝酸鹽檢測的專用試劑盒，檢查試劑盒內試劑（提取劑、顯色劑 A、顯色劑 B 等）是否在有效期內，包裝是否完好，無漏液、變色等異常情況。試劑盒需按儲存要求（如避光、常溫或冷藏）提前取出，平衡至室溫后使用，避免溫度波動影響試劑活性。

2. 輔助儀器工具：準備電子天平（精度 0.01g，提前校準）、便攜式振蕩儀（或手動振蕩工具）、25mL 比色管（潔凈無劃痕，提前烘干）、1mL/5mL 移液器（配套吸頭，滅菌備用）、恒溫水浴鍋（精度 ±1℃，提前設定至 25℃）、便攜式比色計（提前開機預熱，用標準溶液校準），以及土壤采樣器、樣品袋、研缽、100 目篩、濾紙等樣品處理工具。

1. 樣品研磨過篩：取混合土壤樣品約 100g，自然風干至含水量低于 10%（手感松散，無結塊），用研缽研磨后，通過 100 目篩，收集篩下土壤，確保樣品均勻，減少顆粒度對提取效率的影響。

2. 樣品稱量與提取：用電子天平準確稱取 5.00g 過篩土壤樣品，放入錐形瓶中；用移液器加入 25mL 提取劑，蓋緊瓶塞，置于振蕩儀上，以 180-200r/min 的速度振蕩 15min（若手動振蕩，需保持勻速，確保振蕩充分）；振蕩結束后，靜置 5min，用定性濾紙過濾上清液，收集濾液至潔凈試管中，作為待測液備用，過濾過程中避免濾紙破損導致雜質混入。

1. 試劑添加：用移液器吸取 2mL 待測液，緩慢注入 25mL 比色管中；依次加入 1mL 顯色劑 A、1mL 顯色劑 B，每加入一種試劑后，輕輕顛倒比色管 3-5 次，確保試劑與待測液充分混合，避免劇烈振蕩產生氣泡影響后續比色。

2. 恒溫反應：將比色管放入 25℃恒溫水浴鍋中，水浴保溫 10min，嚴格控制反應時間與溫度，溫度過高或反應時間不足 / 過長，均可能導致顯色過度，影響檢測結果。反應期間避免比色管傾斜、碰撞，保持水浴鍋水位穩定，沒過比色管內液面。

1. 比色計校準：打開便攜式比色計，選擇土壤硝酸鹽檢測對應的波長通道（通常為 540nm），用空白溶液（2mL 提取劑 + 1mL 顯色劑 A+1mL 顯色劑 B，按相同顯色步驟處理）進行零點校準，待儀器顯示 “校準完成” 后，方可進行樣品測定。

2. 樣品測定：將顯色后的比色管取出，冷卻至室溫，用擦鏡紙擦拭比色管外壁（去除水珠、指紋），放入比色計的比色槽中，確保比色管刻度線對齊卡槽，關閉艙門；儀器自動讀取吸光度值，并根據內置標準曲線計算出土壤硝酸鹽含量（單位：mg/kg），記錄檢測結果，每個樣品平行測定 3 次，取平均值作為最終結果，若平行樣偏差大于 5%，需重新測定。

1. 試劑使用規范：顯色劑需按順序添加，不可顛倒；移液器吸取試劑時，避免吸頭觸碰容器壁或待測液，防止交叉污染；剩余試劑需密封保存，嚴禁不同試劑盒內試劑混用。

2. 操作精度控制：樣品稱量、試劑移取需嚴格按劑量要求操作，電子天平、移液器需定期校準；比色管使用前需檢查是否有劃痕，避免影響吸光度讀取；振蕩提取時，確保所有樣品振蕩條件一致（速度、時間）。

3. 異常情況處理：若待測液顏色過深（超過比色計量程），需用提取劑稀釋（如 1:1 稀釋）后重新測定，結果乘以稀釋倍數；若顯色后溶液出現渾濁，需重新過濾待測液后再次顯色；比色計若出現讀數不穩定，需檢查光源是否正常，或重新校準后測定。