貨號：A7631

規格：1mL(100T)/5mL(500T)

保存：2-8℃,避光保存，有效期1年。

產品介紹：

阿爾瑪藍試劑為細胞增殖和細胞毒性檢測提供了一種簡便、快速、可靠、安全的方法，適用于高通量檢測實驗。該檢測試劑的主要成分是一種氧化還原指示劑。其在氧化狀態下呈現紫藍色無熒光性，而在還原狀態下，轉變為呈粉紅或紅色熒光的還原產物，吸收峰為530-560nm,而散射峰為590nm。在細胞增殖過程中，細胞內NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，處于還原環境。攝入細胞內的染料被這些代謝中間體及細胞色素類還原后釋放到細胞外并溶于培養基中，使培養基從無熒光的靛青藍變成有熒光的粉紅色。最后用普通分光光度計或熒光光度計進行檢測，吸光度和熒光強度與活性細胞數成正比。

操作步驟：(僅供參考)

1.在100微升細胞懸液中加入10微升的檢測試劑，在細胞培養箱內孵育2-6小時，培養基的顏色由靛青藍開始變成粉紅色就可以進入下一步。

2.推薦使用熒光酶標儀進行檢測，激發光波長在530-560nm之間，發射光波長為590nm,記錄相對熒光單位(RFU)。

3.繪制標準曲線或細胞生長曲線：縱座標(Y軸)為相對熒光單位(RFU);橫坐標(X軸)為細胞數或時間點或藥物濃度。

注意事項：

1.合適密度的細胞可以增加檢測靈敏度。對于96孔板，我們建議每孔接種100微升細胞，細胞濃度范圍為：貼壁細胞在100-10,000/孔，懸浮細胞在2,000-50,000/孔，并以培養基為空白對照。對于384孔板，細胞濃度和接種量均減半。

2.整個過程均應為無菌操作，因為微生物污染物同樣可以還原檢測試劑而影響實驗結果。

3.注意接種細胞濃度和加入檢測試劑后孵育時間。細胞濃度過高或孵育時間過長，會導致繼發性氧化反應，熒光消失。孵育時，須避光。

4.本產品可以使用熒光或分光光度檢測，但熒光的靈敏度高，實驗誤差小，推薦使用熒光檢測。