生物試劑——人白介素18(IL-18)ELISA試劑盒精準檢測
在生物學研究領域,精準檢測生物體液中特定細胞因子的濃度,是解析炎癥反應、免疫調控及疾病機制的關鍵前提。Elabscience®深耕研發11年,憑借深厚的技術積淀,打造了覆蓋人、小鼠、大鼠、兔、猴、通用等多反應性物種的1300多種高品質ELISA試劑盒,廣泛應用于癌癥&腫瘤、免疫學、心血管、干細胞、神經學等10多個熱門研究領域,為科研工作者提供可靠的實驗支撐。其中,人白介素18(IL-18)ELISA試劑盒憑借嚴格的質檢標準、優異的檢測性能,成為免疫相關研究中的核心試劑。
一、試劑盒核心用途
本試劑盒專為體外定量檢測Human血清、血漿或其他生物體液中天然及部分重組IL-18濃度而設計,可精準捕捉樣本中IL-18的含量變化,為炎癥性疾病、免疫紊亂、腫瘤等相關研究提供精準的量化數據支撐,助力科研人員深入探索IL-18在疾病發生發展中的作用機制——作為細胞因子IL-1超家族的關鍵成員,IL-18具有*的促炎和誘導干擾素-γ產生的能力,其濃度變化與自身炎癥性疾病、自身免疫病、代謝綜合征等多種疾病密切相關。
二、檢測原理解析
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法,該方法是檢測大分子抗原的經典技術,具有特異性強、靈敏度高的優勢,其核心原理基于抗原與抗體的特異性結合及生物素-親和素的高效偶聯作用,生物試劑具體流程如下:
- 包被與結合:將抗人IL-18抗體預先包被于酶標板上,實驗時加入樣品或標準品,其中的人IL-18會與包被抗體特異性結合,隨后通過洗滌去除未結合的游離成分。
- 免疫復合物形成:依次加入生物素化的抗人IL-18抗體和辣根過氧化物酶(HRP)標記的親和素,生物素化抗體與結合在包被抗體上的人IL-18結合,同時生物素與親和素發生特異性結合,形成穩定的免疫復合物,再次洗滌去除游離成分。
- 顯色與定量:加入顯色底物(TMB),TMB在HRP的催化下呈現藍色,加入終止液后反應終止,溶液變為黃色。使用酶標儀在450nm波長處測定OD值,IL-18濃度與OD450值呈正相關,通過繪制標準曲線即可精準計算出樣品中IL-18的濃度。

三、核心性能參數
試劑盒的檢測性能直接決定實驗結果的可靠性,本產品經過嚴格優化,各項參數均達到科研級標準,具體如下:
| 參數名稱 | 具體規格/性能 |
|---|---|
| 反應類型 | 夾心法 |
| 規格 | 96T |
| 反應時間 | 3.5h |
| 反應性 | Human(僅針對人源樣本檢測) |
| 檢測方法 | Colormetric(比色法) |
| 檢測范圍 | 15.63—1000 pg/mL,覆蓋多數科研樣本中IL-18的常規濃度范圍,可滿足不同實驗需求 |
| 靈敏度 | 9.38 pg/mL,具備高靈敏度,可精準檢測低濃度樣本中的IL-18,適用于微量檢測場景 |
| 樣本體積 | 100μL,樣本用量少,可減少珍貴樣本的損耗 |
| 樣本類型 | 血清、血漿或其他生物體液,適用范圍廣泛,適配多種樣本處理方式 |
| 特異性 | 可特異性檢測樣本中的人IL-18,與其他相關蛋白無明顯交叉反應,有效避免干擾,確保檢測結果精準 |
| 重復性 | 板內、板間變異系數均<10%,遠低于行業常規標準(通常要求板間變異系數<15%),實驗重復性優異,減少實驗誤差 |
四、典型數據與精密度驗證
(一)典型標準曲線數據
需注意,由于實驗操作條件的差異(如操作者技能、移液精度、洗板技術及溫育條件等),標準曲線的OD值會有所不同,以下數據僅供參考,實驗者需根據自身實驗條件建立標準曲線:
| IL-18濃度 (pg/mL) | OD值1 | OD值2 | Average(平均值) | Corrected(校正值) |
|---|---|---|---|---|
| 1000 | 2.326 | 2.386 | 2.356 | 2.282 |
| 500 | 1.625 | 1.643 | 1.634 | 1.56 |
| 250 | 0.998 | 0.968 | 0.983 | 0.909 |
| 125 | 0.48 | 0.486 | 0.483 | 0.409 |
| 62.5 | 0.242 | 0.236 | 0.239 | 0.165 |
| 31.25 | 0.187 | 0.163 | 0.175 | 0.101 |
| 15.63 | 0.126 | 0.126 | 0.126 | 0.052 |
| 0 | 0.073 | 0.075 | 0.074 | -- |

(二)精密度驗證
精密度是評估試劑盒穩定性的核心指標,本試劑盒通過板內、板間雙重驗證,確保檢測結果的一致性,具體驗證方案及結果如下:
- 板內精密度:選取低、中、高三種濃度的樣本,在同一塊酶標板上分別檢測20次,計算變異系數(CV%);
- 板間精密度:選取低、中、高三種濃度的樣本,在3塊不同的酶標板上分別檢測20次,計算變異系數(CV%)。
| Intra-assay Precision(板內精密度) | Inter-assay Precision(板間精密度) | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample(樣本) | n(檢測次數) | Mean (pg/mL)(平均值) | CV (%)(變異系數) | Sample(樣本) | n(檢測次數) | CV (%)(變異系數) |
| 1(低濃度) | 20 | 54.60 | 6.04 | 1(低濃度) | 20 | 6.88 |
| 2(中濃度) | 20 | 160.50 | 4.67 | 2(中濃度) | 20 | 4.37 |
| 3(高濃度) | 20 | 353.50 | 4.81 | 3(高濃度) | 20 | 3.59 |
驗證結果顯示,板內、板間變異系數均<10%,符合科研實驗對精密度的嚴格要求,可有效保障實驗數據的可靠性和重復性。
五、回收率驗證
回收率是評估試劑盒準確性的關鍵指標,用于判斷樣本基質對檢測結果的干擾程度,理想回收率范圍為80%-120%,越接近100%說明準確性越高。本試劑盒通過向5個不同樣本中添加已知濃度的IL-18目標蛋白,進行回收實驗,具體結果如下:
| Sample Type(樣本類型) | Range (%)(回收率范圍) | Average Recovery (%)(平均回收率) |
|---|---|---|
| Serum (n=8)(血清) | 94-109 | 100 |
| EDTA plasma (n=8)(EDTA血漿) | 89-101 | 96 |
| Cell culture media (n=8)(細胞培養液) | 85-96 | 91 |
實驗結果表明,三種常見樣本類型的回收率均在理想范圍內,平均回收率接近100%,說明樣本基質對檢測結果的干擾極小,試劑盒準確性優異,可精準反映樣本中IL-18的真實濃度,為科研結論的可靠性提供有力保障。
六、試劑盒組成及保存條件
(一)試劑盒組成
本試劑盒包含實驗所需全部核心試劑,無需額外自行配制關鍵組分,具體組成如下:
| 中文名稱 | 英文名稱 | 規格 | 保存條件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶標板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃,可存放6個月 |
| 凍干標準品 | Reference Standard | 2 支 | -20℃(避光),可存放6個月 |
| 濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6個月 |
| 濃縮HRP酶結合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6個月 |
| 標準品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃,可存放6個月 |
| 生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | 2-8℃,可存放6個月 |
| 酶結合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | 2-8℃,可存放6個月 |
| 濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | 2-8℃,可存放6個月 |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光),可存放6個月 |
| 反應終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃,可存放6個月 |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | 常溫保存 |
| 產品說明書 | Product Description | 1 份 | 常溫保存 |
| 質檢報告 | Certificate of Analysis | 1 份 | 常溫保存 |
(二)保存注意事項
- 未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周;若一周后使用,需拆開試劑盒,按照上述表格中的條件分別保存各組分。
- 所有試劑瓶蓋須旋緊,防止試劑蒸發和微生物污染,影響檢測性能。
- 試劑體積以實際發貨版說明書為準,相關試劑在分裝時會比標簽標明的體積稍多,使用時需量取,不可直接倒出,避免試劑浪費和用量不準確。
- 避光保存的試劑(如濃縮HRP酶結合物、凍干標準品、底物溶液TMB)需嚴格避光,防止試劑失效。
七、實驗所需自備物品
為確保實驗順利開展,除試劑盒自帶組分外,實驗者需自備以下物品:
- 酶標儀:需配備450nm波長濾光片,用于OD值的測定;
- 高精度移液器及配套耗材:包括0.5-10 μL、2-20 μL、20-200 μL、200-1000 μL規格的高精度移液器,以及EP管、一次性吸頭,確保移液精準;
- 恒溫設備及純水:37℃恒溫箱(用于實驗溫育),雙蒸水或去離子水(用于試劑稀釋、洗板等);
- 吸水紙:用于洗板后吸干酶標板孔內殘留液體,避免殘留液體影響檢測結果。
八、產品優勢總結
Elabscience®人白介素18(IL-18)ELISA試劑盒嚴格遵循原料-半成品-成品三步質檢流程,確保產品體系穩定、性能優異,核心優勢如下:
- 精準可靠:采用雙抗體夾心ELISA法,特異性強、靈敏度高,板內板間重復性優異,回收率達標,可精準量化樣本中IL-18濃度,契合IL-18作為疾病診斷標志物的檢測需求;
- 便捷高效:試劑盒組分齊全,無需自行配制核心試劑,反應時間僅3.5h,樣本用量少,操作流程簡潔,大幅提升實驗效率;
- 適用廣泛:可檢測血清、血漿、細胞培養液等多種生物體液,適配炎癥、免疫、腫瘤等多個研究領域,助力科研人員開展多樣化研究;
- 品質保障:經過嚴格質檢,試劑穩定性強,保存條件明確,可長期存放,有效降低實驗成本和試劑浪費。
作為科研實驗的核心支撐試劑,Elabscience®人白介素18(IL-18)ELISA試劑盒以精準的檢測性能、便捷的操作體驗,為IL-18相關研究提供可靠的數據支持,助力科研工作者在炎癥調控、疾病機制探索等領域取得更多突破,推動生物學研究的穩步發展。
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