雙側臂細胞培養轉瓶的使用方法

來源：上海睿玥實驗器材有限公司 2026年05月19日 18:26

雙側臂細胞培養轉瓶‌是一種專為懸浮細胞或微載體大規模培養設計的高性能細胞培養裝置，通過優化氣體交換與攪拌效率，提升細胞生長密度與培養均一性。

應用場景：

‌生物制藥研發‌：用于重組蛋白、病毒載體的細胞培養工藝開發；

‌組織工程‌：結合微載體進行干細胞擴增；

‌教學與質檢‌：作為標準化培養容器用于實驗演示與質量控制。

接種與培養操作：

‌無菌接種‌：

在超凈臺內打開瓶蓋，將細胞懸液通過側臂或瓶口無菌注入；

接種體積建議控制在瓶總容量的‌30%~50%‌，以保證足夠氣體交換空間。

‌連接氣體系統（可選）‌：

若需長期培養或高密度擴增，可將雙側臂分別連接‌進氣濾器（含0.22μm濾膜）和出氣閥‌，通入含5% CO?的空氣，維持pH穩定。

‌設置攪拌與溫度‌：

將轉瓶置于磁力攪拌器上，放入攪拌子；

啟動攪拌，初始轉速設為‌45rpm‌，避免剪切力過大損傷細胞；

設定溫度為‌37±0.5℃‌，持續監控。

培養過程管理：

‌定期觀察‌：

每日鏡檢細胞形態與密度，確認無污染、無結團；

觀察微載體（如使用）是否均勻懸浮，無沉淀。

‌補液與傳代‌：

根據代謝情況適時補充新鮮培養基；

當細胞密度達到平臺期或活力下降時，進行傳代或收獲。

‌氣體調節‌：

若pH持續偏高，可適當增加CO?通氣量；

長時間培養建議使用HEPES緩沖體系增強pH穩定性。

收獲與清洗：

‌細胞收獲‌：

停止攪拌，靜置5分鐘使微載體沉降；

輕柔吸出上清液，離心收集細胞；

或直接過濾分離細胞與微載體。

‌清洗與保存‌：

使用后立即用清水沖洗，避免殘留物干結；

可重復使用，但需每次嚴格滅菌；

長期不用時應干燥密封保存。

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