熒光顯微鏡基礎知識 ??

什么是熒光顯微鏡？

熒光顯微鏡（英文：Fluorescence Microscope）是一種利用激光光、超高壓汞燈或氙氣燈作為光源，觀察目標物體中熒光物質的熒光的裝置。 在傳統光學顯微鏡中，使用如鹵素燈等可見光作為光源，照射目標并觀察反射和透射光。

熒光顯微鏡是一種主要針對用熒光物質標記的生物組織和細胞的顯微鏡。 由于顯微鏡的分辨率取決于所用光的波長，使用短波長光的熒光顯微鏡具有更的空間和時間分辨率。

因此，可以獲得高度量化的信息。 熒光顯微鏡在功能上日益先進，如共軛聚焦激光顯微鏡和多光子顯微鏡，其重要性也在不斷提升。

熒光顯微鏡的應用

熒光顯微鏡主要用于生物成像。 具體靶點是細胞和組織，且可以觀察到它們活著的狀態。 為了用熒光標記靶點，結合并使用以下技術。

• 通過基因改造及其他方式對特定蛋白質進行熒光標記的技術

• 利用熒光標記化學物質標記核酸及其他物質的技術

• 在特定細胞中表達熒光蛋白的技術

這些技術可以觀察目標蛋白和表達基因的定位。 此外，還開發了對特定物質產生熒光的藥物和蛋白質，使神經活動和細胞內物質動態的可視化成為可能。

近年來，CRISPR技術的出現使得轉基因生物的制造變得更加容易，其應用范圍迅速擴展。

熒光顯微鏡的原理

熒光顯微鏡是一種用于觀察熒光的設備。 熒光是在熒光材料吸收特定光作為能量（激發光）然后再次釋放能量時發出的。

當激發光被照射時，會發生快速發射。 熒光的波長比激發光的波長更長，而這些波長會根據熒光材料的不同而變化。 熒光顯微鏡配備了以下濾光單元，用于觀察特定熒光。

• 允許激發光通過光源的濾光片

• 通過發射熒光的濾光片

• 鏡子防止激發光干擾熒光

通過更換或組合濾光單元，可以觀察到同一樣品中的多種熒光物質。