一、前置質控判定（先查基礎是否合格）

1、菌株純度核查

純培養平板無雜菌落、鏡檢革蘭氏染色形態一致（沙門/志賀均為革蘭陰性桿菌），混菌直接判定結果無效。

2、菌液濃度合規

標準 0.5 麥氏濁度，過濃易假陽性、過稀易假陰性，濃度偏差結果作廢。

3、培養條件無誤

溫度 36±1℃、時長 18~24h，超時/低溫都會導致反應異常，嚴格控時控溫。

4、試劑培養基質控

生化管在有效期內、無渾濁變色、無干裂漏液；每批次做陽性對照 + 陰性對照同步試驗。

二、反應結果邏輯自查（核心判斷）

1、初篩 TSI 結果優先核對

沙門氏菌標準模式：斜面紅、底層黃、H?S 陽性，生化結果必須貼合該基礎特征，出現 TSI 與成套生化矛盾，結果錯誤。

志賀氏菌標準模式：斜面紅、底層黃、無 H?S、不產氣，偏離即判定結果異常。

2、生化項目聯動校驗

同一菌種生化反應存在固定組合，單一項目反常、整體譜不符 = 結果不準

例：沙門氏菌極少靛基質陽性、尿素陰性；志賀氏菌不產硫化氫、多數不發酵乳糖，違背固有特征即為誤判。

糖發酵、酶類試驗結果相互印證，出現互相沖突直接復檢。

3、陰陽結果視覺統一

同一批次生化管顯色、沉淀、產氣現象一致，無模糊難辨、半陰半陽模棱兩可結果，模糊結果一律重測。

三、對照標準圖譜判定

嚴格對照GB 4789 國標生化特征表，逐項比對陰陽性

90% 以上項目符合標準生化譜，判定結果可靠；3 項及以上不符，結果無效

相近菌種區分校驗：排除變形桿菌、枸櫞酸桿菌、克雷伯菌等近似菌干擾

四、重復試驗驗證法

平行試驗：同一菌液接種兩套相同生化試劑，兩次結果一致 = 準確，結果不一致 = 操作/試劑問題

復測試驗：初次結果異常，重新純化菌落、配制菌液再次鑒定，兩次結果統一方可采信

五、輔助佐證判定

結合 HE 原始菌落形態：菌落特征 + TSI + 生化三者統一，結果最準確

血清凝集試驗復核：生化初判陽性菌株，用診斷血清做玻片凝集，凝集結果與生化結論一致，最終確定準確

排除干擾因素：無藥物殘留、無食品基質殘留、無雜菌代謝物干擾反應

六、結果不合格處理

輕微偏差：重新純化菌株、調配標準濁度菌液復測

嚴重不符：棄去該菌株，重新從 HE 平板挑取典型疑似菌落從頭鑒定

整批結果異常：核查生化試劑有效期、配制環境、培養箱溫度，排查系統誤差

速記要點

純菌 + 準濃度 + 控培養 + 譜吻合 + 平行一致 = 結果準確

形態矛盾、項目沖突、陰陽模糊、無對照 = 結果無效

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