手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
一文讀懂陰離子交換柱：官能團(tuán)解離、離子交換、梯度洗脫完整工作原理
陰離子交換柱通過(guò)固定相上的帶電官能團(tuán)與樣品中帶負(fù)電荷的目標(biāo)分子進(jìn)行可逆的離子交換，實(shí)現(xiàn)對(duì)不同分子的分離。其核心運(yùn)行原理可分為三個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)：
1.官能團(tuán)解離與電荷吸附
陰離子交換柱的固定相上共價(jià)結(jié)合了帶正電荷的官能團(tuán)。根據(jù)電荷狀態(tài)是否隨pH變化，可分為強(qiáng)陰離子交換劑（如季銨基團(tuán)）和弱陰離子交換劑（如二乙氨乙基）。強(qiáng)陰離子交換劑在寬的pH范圍內(nèi)始終保持帶正電，而弱陰離子交換劑僅在特定pH范圍內(nèi)才離子化。
當(dāng)樣品通過(guò)處于平衡狀態(tài)（與特定pH和離子強(qiáng)度的緩沖液平衡）的色譜柱時(shí)，表面帶負(fù)電荷的目標(biāo)分子會(huì)與固定相上帶正電荷的官能團(tuán)通過(guò)靜電引力結(jié)合，從而被保留在柱上。不帶電荷或帶正電荷的雜質(zhì)則不被保留，直接從柱中流出。
2.離子交換與競(jìng)爭(zhēng)置換
目標(biāo)分子被吸附后，其與固定相的結(jié)合強(qiáng)度取決于分子本身所帶的凈電荷數(shù)量。電荷越多，結(jié)合越緊密。要實(shí)現(xiàn)分離，就需要打破這種結(jié)合平衡。
3.梯度洗脫實(shí)現(xiàn)分離
要依次釋放這些結(jié)合的目標(biāo)分子，常用的方法是梯度洗脫。即逐漸增加流動(dòng)相中鹽的濃度。鹽離子會(huì)與吸附在固定相上的目標(biāo)分子競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合位點(diǎn)。隨著鹽濃度升高，越來(lái)越多的目標(biāo)分子被鹽離子置換下來(lái)，重新進(jìn)入流動(dòng)相。
由于不同分子帶電荷數(shù)不同，與固定相的親和力各異，因此在鹽濃度梯度上升的過(guò)程中，結(jié)合力較弱的分子會(huì)先被洗脫，而結(jié)合力強(qiáng)的分子則在較高鹽濃度時(shí)才會(huì)被洗脫出來(lái)，從而實(shí)現(xiàn)按電荷差異的分離。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀(guān)點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心