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ATCC 19115 單核細胞增生李斯特氏菌技術要點詳解
ATCC 質控菌株技術專欄 · 微生物檢測與標準化參考
一產品概述
單核細胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）是冷鏈食品中最危險的食源性致病菌之一，能在4°C冰箱溫度下持續增殖，被稱為"冰箱殺手"。作為食品微生物檢測實驗室的必檢項目，GB 4789.30、ISO 11290-1和FDA BAM均將其列為重點監控對象。ATCC 19115作為國際通行的標準質控菌株，在方法驗證、培養基質控和人員能力比對中發揮著不可替代的作用。本文從實驗室實際操作角度出發，系統梳理該菌株的特性、培養要點及在各檢測標準中的應用，希望能為同行提供實用參考。
二技術參數
下表匯總 單核細胞增生李斯特氏菌 的核心技術參數，便于在方法確認與注冊資料中直接引用。
| 項目 | 內容 | ||
|---|---|---|---|
| 菌株名稱 | 單核細胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes） | ||
| ATCC編號 | 19115 | ||
| 生物安全等級 | BSL-2 | ||
| 形態 | 革蘭陽性短桿菌，無芽孢 | ||
| 最適培養溫度 | 37°C | ||
| 生長溫度范圍 | 2°C ~ 45°C | ||
| 推薦培養基 | TSA-YE（胰酪胨大豆瓊脂+0.6%酵母膏）、BHI肉湯 | ||
| 選擇性培養基 | PALCAM瓊脂、Oxford瓊脂、Half-Fraser/Fraser肉湯 | ||
| 參考用途 | 食品微生物檢驗陽性對照、培養基質控、方法驗證 | ||
| 保存方式 | 凍干粉保存或-80°C甘油管保存 | ||
| 生化試驗 | 結果 | ||
| 觸酶（Catalase） | 陽性（+） | ||
| 氧化酶（Oxidase） | 陰性（-） | ||
| β-溶血 | 陽性（窄溶血環） | ||
| CAMP試驗（金黃色葡萄球菌） | 陽性（協同溶血） | ||
| 七葉苷水解 | 陽性（+） | ||
| 甘露醇發酵 | 陰性（-） | ||
| 木糖發酵 | 陰性（-） | ||
| 鼠李糖發酵 | 陽性（+） | ||
| MR試驗 | 陽性（+） | ||
| VP試驗 | 陰性（-） | ||
| 硝酸鹽還原 | 陰性（-） | ||
| 三糖鐵（TSI） | 堿性/堿性，不產H?S | ||
| 步驟 | 溫度 | 時間 | 培養基 |
| 活化培養 | 37°C | 18~24h | TSA-YE或BHI瓊脂 |
| 重要步增菌 | 30°C | 24h | Half-Fraser肉湯 |
| 第二步增菌 | 37°C | 24~48h | Fraser肉湯 |
| 分離培養 | 37°C | 24~48h | PALCAM/Oxford瓊脂 |
| 確認培養 | 37°C | 18~24h | TSA-YE |
三生物學特性
### 革蘭染色與形態學
單增李斯特氏菌為革蘭陽性短桿菌，菌體大小約0.4~0.5 μm × 0.5~2.0 μm。在顯微鏡下常呈單個或短鏈狀排列，偶爾可見V形或Y形的柵欄狀排列——這個特征跟棒狀桿菌有點像，初學者容易混淆。需要注意的是，培養時間過長（超過48h）或培養基偏堿性時，菌體可能出現革蘭染色不穩定的情況，部分細胞會呈現革蘭陰性著色。這一點我在實際染色中反復遇到過，建議對數生長期（18~24h培養物）做染色效果良好。
該菌不產芽孢、不產莢膜，在25°C培養時具有特征性的"翻滾運動"（tumbling motility），而在37°C時運動性明顯減弱。傘狀運動試驗（umbrella mo
四培養條件與操作要點
### 培養基選擇
基礎培養基：
實驗室日常活化培養，我推薦使用TSA-YE（胰酪胨大豆瓊脂+0.6%酵母膏粉）或BHI（腦心浸液）瓊脂。TSA-YE是多數國際標準推薦的基礎培養基，配制時需注意酵母膏粉的添加量——太少菌落長不好，太多會導致背景渾濁影響觀察。
選擇性增菌培養基：
- Half-Fraser肉湯（半量Fraser肉湯）：用于重要步增菌。Fraser肉湯基礎中添加較低濃度的選擇性抑制劑（氯化鋰1.5 g/L、吖啶黃12.5 mg/L），允許受損細胞恢復。
- Fraser肉湯（全量Fraser肉湯）：用于第二步增菌。選擇性抑制劑濃度加倍（氯化鋰3.0 g/L、吖啶黃25 mg/L、
五采購指引
相關菌株與采購指引：本商鋪提供 單核細胞增生李斯特氏菌（ATCC 19115）標準菌株，點擊訪問 kystrains(站內搜索) 查看更多產品詳情。如需技術咨詢或批量采購，歡迎致電 (請通過平臺客服咨詢)（杭州康氧醫療器械有限公司）。
六免責聲明
免責聲明本文所述 ATCC 標準菌株信息整理自 ATCC 正式目錄、美國藥典（USP）、中國藥典（ChP）、歐洲藥典（EP）、ISO 及 GB 等相關標準文獻，僅供技術交流參考。產品具體技術參數、培養條件及合規要求請以正式新發布文件及產品說明書為準。使用者須遵守所在機構生物安全規范與相關法規，因使用不當造成的任何后果由使用者自行承擔。本文不構成任何形式的商業承諾或醫療/法規建議。
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