手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
解鎖Leica倒置顯微鏡：關鍵操作步驟拆解，新手也能輕松上手
Leica倒置顯微鏡是一種特殊設計的顯微鏡，其物鏡位于載物臺下方，而光源和聚光器位于載物臺上方，與普通顯微鏡結構相反。這種設計使其特別適用于觀察培養皿、培養瓶中的活細胞及較厚的生物樣本，在細胞生物學、組織工程、藥物篩選等領域得到廣泛應用。
倒置顯微鏡的核心優勢在于其長工作距離物鏡，能夠直接對培養容器中的細胞進行觀察，無需將細胞轉移至載玻片，減少了樣本處理步驟，更有利于保持細胞的活性與自然狀態。同時，倒置顯微鏡支持多種觀察模式，如明場、相差、熒光、微分干涉（DIC）等，可滿足不同的實驗需求。例如，相差觀察無需染色即可清晰呈現活細胞結構，熒光觀察則可對特定蛋白或細胞器進行標記分析。
Leica倒置顯微鏡的操作方法：
一、開機與準備工作
環境檢查：確保顯微鏡放置在平穩的實驗臺上，周圍環境干燥、無強振動。
開機：連接電源，打開顯微鏡主機下方的電源開關。若配備電腦和成像軟件（如LAS X等），需同步開啟電腦并啟動相應軟件。
放置標本：將細胞培養皿、培養瓶或玻片標本平穩放置在載物臺上，確保觀察區域對準通光孔中心。
二、明場與相差觀察操作
選擇觀察模式：通過主機面板或軟件將光路切換至明場（BF）或相差（PH）模式。
低倍鏡對焦：旋轉物鏡轉盤，選擇低倍物鏡（如10×）對準標本。通過雙目鏡筒觀察，調節瞳距至雙眼視野重合。
調焦與尋像：先轉動粗調旋鈕使載物臺緩慢上升（或物鏡下降），直到看到模糊的圖像，再改用微調旋鈕使圖像清晰。移動載物臺找到感興趣的觀察區域。
切換高倍鏡：遵循“由低到高”的原則，旋轉至高倍物鏡（如20×、40×）。切換后通常只需微調焦距即可獲得清晰圖像。
相差設置（若適用）：進行相差觀察時，需確保物鏡與聚光鏡上的相差環板匹配。部分新型徠卡顯微鏡（如DMi1）配備智能傳感器，切換物鏡時可自動匹配相差環，無需手動調節。
光強調節：根據標本的透明度調節光源亮度。未染色或活細胞標本宜使用較弱光線，染色標本可適當增強光線。
三、熒光觀察操作（針對熒光型號）
光源預熱：打開熒光光源（如汞燈或LED）電源。若使用傳統汞燈，需預熱1015分鐘以達到最佳發光效果。
選擇濾光塊：根據所用熒光染料的激發和發射光譜，在熒光轉盤上選擇并推入正確的濾光塊（如DAPI藍色通道、FITC綠色通道、Rhod紅色通道等）。
切換光路：將光路切換至熒光通道，打開熒光光閘（Shutter）進行觀察。
保護樣品：熒光觀察時宜先使用較低光強，避免熒光信號過快淬滅。不觀察時應及時關閉熒光光閘或光源，以延長燈泡壽命并保護樣品。
四、圖像采集與關機保養
圖像采集：切換至相機光路（如拔出活動桿或在軟件中切換），在軟件中調整好曝光時間、增益等參數后拍攝并保存圖像。
規范關機：觀察結束后，先將光源亮度調至低，關閉熒光光源，再關閉顯微鏡主機電源。
清潔與復位：取下標本。若鏡頭表面有指紋或油污，必須使用專用的擦鏡紙輕輕擦拭，嚴禁使用干布或有機溶劑直接擦拭塑料部件。將物鏡轉至低倍鏡位置（或呈“八”字形偏開），降低載物臺，最后蓋上防塵罩。
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
采購中心