對于NanoDrop這類超微量分光光度計，“樣品與參比液弄反”通常指在空白校正（Blank）步驟中，誤將樣品溶液當(dāng)作空白液進(jìn)行校正。這會導(dǎo)致后續(xù)所有測量數(shù)據(jù)的基準(zhǔn)錯誤，結(jié)果毫無意義。

一、錯誤的后果：數(shù)據(jù)不可用

空白校正的目的是建立一個“零”基準(zhǔn)，以扣除溶劑和儀器本身的背景信號。如果用樣品液進(jìn)行空白校正：

1、樣品信號被錯誤扣除：儀器會將樣品本身的信號當(dāng)作“背景”扣除。這意味著后續(xù)測量同種樣品時，得到的將是一個被嚴(yán)重削弱甚至為負(fù)值的錯誤讀數(shù)。

2、所有數(shù)據(jù)失效：一旦用錯了空白液，后續(xù)測量的所有數(shù)據(jù)（濃度、純度比值等）都將失去任何參考價值，必須全部作廢。

二、解決方案：重新進(jìn)行正確的空白校正并測量

發(fā)現(xiàn)錯誤后，正確的做法就是拋棄錯誤數(shù)據(jù)，重新測量。

1、清潔上下基座：使用無塵軟布（如Kimwipes），蘸取少量去離子水或70%乙醇，單向擦拭上下基座，并讓其干燥。

2、使用正確的空白液重新校正：

（1）在下基座滴加 1-2 μL 與樣品一致的空白液（如TE Buffer）。

（2）放下檢測臂，點擊軟件中的 “Blank” 按鈕。

（3）完成后，抬起檢測臂，用干凈的無塵布擦凈基座。

3、重新測量所有樣品：完成正確的空白校正后，再點樣測量你的所有樣品。

三、如何避免再次發(fā)生

1、養(yǎng)成良好習(xí)慣：操作前，務(wù)必在心理或?qū)嶒炗涗浬厦鞔_區(qū)分“空白液”和“樣品液”。可以用不同顏色的離心管或標(biāo)記來區(qū)分。

2、善用自動功能：NanoDrop Ultra C具備“自動空白檢測 (Auto-Blank)”功能。開啟后，放下檢測臂儀器便會自動執(zhí)行空白校正，能有效避免人為錯誤。

3、注意溶劑一致性：確保空白溶液與樣品溶解液一致。每次更換緩沖液后，都必須用對應(yīng)的新空白液重新進(jìn)行空白校正。

4、利用內(nèi)置診斷：NanoDrop Ultra C的高分辨率攝像頭會自動拍攝液柱狀態(tài)，Acclaro技術(shù)也能在樣品異常時發(fā)出預(yù)警，注意觀察這些提示。