熒光法定量膠原降解活性｜Chondrex 膠原酶檢測試劑盒，適配纖維化、骨關節(jié)炎、腫瘤侵襲研究

簡介：

膠原是機體胞外基質(zhì)核心骨架，完整三螺旋結(jié)構(gòu)具備強抗蛋白酶降解能力，僅間質(zhì)膠原酶（MMP-1/MMP-8/MMP-13）可特異性切割天然完整膠原，介導組織重塑全過程PMC。

生理層面：產(chǎn)后子宮重塑、皮膚創(chuàng)面修復均依賴可控膠原酶降解；病理層面，膠原酶異常高表達是大量疾病核心標志：

骨關節(jié)疾病：MMP-13 對 II 型膠原降解效率遠高于 I 型，軟骨基質(zhì)大量流失誘發(fā)骨關節(jié)炎、類風濕關節(jié)炎；

器官纖維化：肝、肺、腎纖維化進程中膠原合成 / 降解失衡，膠原酶活性紊亂直接決定纖維化進展程度；

腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移：腫瘤細胞分泌膠原酶破壞基底膜與間質(zhì)膠原，是腫瘤浸潤、遠端轉(zhuǎn)移關鍵步驟；慢性炎癥、心血管重構(gòu)、創(chuàng)面愈合障礙均伴隨膠原酶活性異常波動。

當前科研常用檢測手段存在明顯短板：

酶譜法（膠原凝膠底物）：實驗周期長、操作繁瑣、定量精度差，僅能半定性；

同位素標記膠原法：存在放射性污染、防護要求高、靈敏度有限；

普通蛋白 ELISA：僅檢測 MMP 蛋白表達量，無法反映真實酶催化活性，大量無活性酶原會造成數(shù)據(jù)失真；

多肽底物試劑盒：僅模擬短肽序列，不能模擬天然完整三螺旋膠原，無法真實還原體內(nèi)膠原切割行為。

針對以上痛點，Chondrex 推出3001（I 型膠原底物）、3002（II 型膠原底物）熒光快速膠原酶檢測試劑盒，采用 FITC 標記天然完整膠原作為底物，直接定量樣本中功能性膠原酶催化活性，大幅縮短實驗時長、提升數(shù)據(jù)靈敏度與生理相關性，廣泛用于膠原代謝相關機制與藥物篩選研究。

產(chǎn)品應用：

1. 骨關節(jié)軟骨損傷、關節(jié)炎機制研究

1)Cat#3002（II 型膠原底物）優(yōu)選：軟骨基質(zhì)以 II 型膠原為主，定量 MMP-13、MMP-8 降解活性，評價軟骨基質(zhì)破壞程度；

2)軟骨細胞、滑膜細胞上清、關節(jié)勻漿樣本檢測；

3)軟骨保護藥物、MMP 抑制劑體外藥效篩選。

2. 纖維化疾病（肝 / 肺 / 腎 / 皮膚纖維化）研究

1)3001（I 型膠原底物）適配：臟器間質(zhì)以 I 型膠原為主；

2)檢測成纖維細胞上清、組織勻漿內(nèi)膠原酶活性；

3)探究促纖維化 / 抗纖維化通路、抗纖維化小分子藥效評價。

3. 腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移相關機制

1)檢測腫瘤細胞、腫瘤微環(huán)境上清膠原酶活性；

2)評估腫瘤細胞突破膠原屏障能力，篩選抗腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑。

4. 組織修復、創(chuàng)面愈合、再生醫(yī)學

1)皮膚成纖維細胞膠原酶活性動態(tài)監(jiān)測；

2)3D膠原水凝膠支架降解速率定量，評估生物材料體內(nèi)外降解特性。

5. 基礎基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）功能研究

1)區(qū)分酶蛋白表達量與真實催化活性；

2)探究 TIMP、α2 巨球蛋白等內(nèi)源抑制劑對膠原酶的調(diào)控作用；

3)對比不同亞型 MMP 對 I/II 型膠原的底物偏好性。

適用樣本類型

細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿

產(chǎn)品優(yōu)勢：

1.天然完整膠原底物，實驗更貼合體內(nèi)生理環(huán)境

采用無去端肽、完整三螺旋 FITC 標記牛 I/II 型膠原，只有功能性膠原酶可切割底物，排除其他蛋白酶干擾；多肽底物無法模擬天然膠原高級結(jié)構(gòu)，檢測結(jié)果與體內(nèi)真實降解行為偏差大，本試劑盒底物可信度更高，適配高分期刊數(shù)據(jù)產(chǎn)出。

2. 熒光檢測靈敏度高，遠優(yōu)于傳統(tǒng)同位素方法

熒光定量檢測（激發(fā) 490 nm / 發(fā)射 520 nm），靈敏度高于放射性標記膠原檢測體系，微量樣本即可穩(wěn)定檢出低水平膠原酶活性，適合低表達模型樣本。

3. 實驗周期大幅壓縮，全程僅需 2.5 h

傳統(tǒng)膠原凝膠酶譜法需過夜孵育，本試劑盒整套流程僅 2.5 小時，批量樣本檢測效率顯著提升，適配高通量藥物篩選。

4.自帶重組人 MMP-8 標準品，定量結(jié)果精準

試劑盒預裝標準化活性 MMP-8 參照品，可繪制活性標準曲線，直接換算膠原酶活力單位（Unit：1 μg 膠原 /min），實現(xiàn)絕對定量，而非僅相對熒光值對比。

5. 配套黑色 96 孔檢測板，避光穩(wěn)定檢測

試劑盒附贈不透光黑色熒光專用微孔板，避免 FITC 熒光淬滅，降低背景干擾，數(shù)據(jù)重復性優(yōu)異；單盒可同時檢測最多 44 份復孔樣本。

產(chǎn)品信息：

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