引言

在脂質體納米顆粒（LNP）藥物研發中，包封率是質量控制的必測指標。然而，無論是熒光法還是超速離心-液相色譜聯用法，其本質均為群體平均測量，僅能輸出百分比數值，無法反映單顆粒真實載藥狀態，在制劑開發、機制研究、高分論文投稿及 IND 申報階段暴露出諸多無法規避的實驗痛點，大量科研人員面臨以下共性難題：

• 包封率顯示 90% 以上，但細胞轉染效率重復性差、波動幅度大；；

• 不同工藝批次包封率相近，體內藥效卻差異明顯；

• 穩定性研究期間包封率數值未變，但粒徑與 PDI 已在漂移；

• 論文審稿、藥審機構核查時，僅百分比數據缺少藥物定位于囊泡內部的直觀證據。

上述問題的根源在于：群體平均值掩蓋了單顆粒水平的裝載異質性。藥物申報（IND）階段，審評對“有效載荷確在囊泡內部”的證據要求日趨嚴格；高水平期刊審稿人同樣希望看到超越數值的直接可視化數據。在此背景下，單顆粒原位可視化、精準判別真實包封狀態，已從加分表征手段轉變為硬性剛需。

針對這一需求，Quantum Design 中國 正式開放Abbelight 3D 單分子超分辨成像系統樣機免費體驗活動，該設備依托單分子定位顯微技術（SMLM）可實現單顆粒水平的包封狀態原位解析，本次體驗名額僅限 30 個，誠邀各課題組攜帶樣品預約上機測試。

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一、傳統包封率測定為何不足以回答“真包封”問題

常規包封率測定依賴于將游離核酸與包封核酸分離后分別定量。這一策略存在三個方法學盲區：

• 無法識別表面吸附：靜電吸附于脂質膜外表面的核酸，在分離過程中可能仍與顆粒共同沉降，被計入“已包封”部分；

• 無法區分裝載異質性：同一批次中，部分顆粒滿載、部分空殼、部分半載，包封率僅給出整體均值；

• 無法判斷貨物空間定位：即使核酸確實與脂質體結合，其位于囊泡內部還是嵌于脂質雙分子層中，直接影響釋放動力學。

這些盲區在制劑開發早期或許可被接受，但當研究推進至機制闡釋、構效關系解析或 IND 申報階段時，僅憑一個百分比數值已難以滿足數據完整性的要求。

二、Abbelight 超分辨系統如何實現“原位可視化”判定

Abbelight 3D 單分子超分辨成像系統基于單分子定位技術（SMLM），可在單顆粒水平直接回答三個核心問題：裝沒裝、裝在哪、裝多少。

1. 空間分辨：20 nm 級精度判斷“裝在哪”

系統 XY 軸分辨率達 20 nm，Z 軸分辨率達 50 nm。對于 30-150 nm 的脂質體，這一精度足以通過逐顆粒人工判讀區分以下情形：

• 貨物信號位于膜輪廓內側、呈均勻或團塊狀填充——真包封；

• 貨物信號與膜信號空間重疊但偏于顆粒外緣——表面吸附；

• 僅檢測到膜信號而無內部貨物——空殼顆粒。

2. 多通道共定位：同步標記膜與貨物，一目了然

系統支持四通道同步成像。典型實驗方案中，脂質膜以 DiO/DiI 等親脂性染料標記，核酸以 Cy5 標記，同一顆粒的兩通道信號經疊加分析，包封狀態可直觀判定。該方法可嚴格區分“真包封”與“假吸附”，為申報材料提供“貨物確實在囊泡內部”的直接視覺證據。

3. 三維重建：直觀展示貨物空間分布

3D-STORM 模式支持對單個顆粒進行三維重建與剖面旋轉，直觀展示核酸藥物在囊泡內部的填充狀態——是均勻分布、偏心聚集還是多層填充——這些信息對理解突釋效應與緩釋行為具有直接參考價值。

4. 大視野輔助定位，手動判讀確保準確

系統單次成像視場為 150 μm × 150 μm，可在單視野內捕獲大量脂質體顆粒，為手動判讀提供充足的樣本基數。實際操作中，研究者可在大視野中定位目標區域，隨后對感興趣的顆粒逐一進行高倍放大與雙通道比對，確保每個判定結論均有據可查。

三、應用案例

Abbelight 3D單分子超分辨成像系統已在脂質體及細胞外囊泡研究中獲得高水平應用驗證。

脂質體成像：已有研究利用該系統對單個LNP進行siRNA（紅色信號）與脂質體膜（綠色信號）的雙通道共定位成像，直接驗證了核酸藥物的內部包封狀態。

上圖左引自 Dual-ligand engineered exosome regulates WNT signaling activation to promote liver repair and regeneration., Nature Communications, 2025

上圖右引自 Oral Delivery of R‐spondin1‐Loaded Small Extracellular Vesicles Activates WNT Signalling Pathway to Accelerate Intestinal Injury Repair and Reverse Ageing., Journal of Extracellular Vesicles, 2026

外泌體成像：在細胞外囊泡研究中，該系統被用于外泌體表面標志物（如CD63）的超分辨共定位分析，成功鑒定功能性外泌體亞群。相關工作已發表于 Nature Communications（2025）及 Journal of Extracellular Vesicles（2026）等高水平期刊。

此外，系統支持對外泌體及脂質體進行基于超分辨成像的粒徑統計分析。通過團簇分析算法，可在單顆粒水平獲取粒徑分布數據，并按不同表面標志物進行亞群分類統計，實現從定性觀察到定量分析的方法學升級。

四、樣機免費體驗活動詳情

單顆粒功能解析正成為脂質體藥物遞送研究中的關鍵表征環節，精準的可視化數據是高水平學術發表與藥物申報的重要支撐。

Quantum Design 中國 現開放 Abbelight 3D 單分子超分辨成像系統樣機免費試用，面向核酸 LNP 遞送、納米藥物制劑、外泌體工程改造、RNA 藥物研發、藥物 IND 申報、高分論文發表的高校課題組、藥企研發實驗室，提供包封率驗證、載藥空間分布分析等技術服務。試用名額限 30 個，報滿即止。誠邀各研究團隊攜樣品參與體驗。

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