研盒優薦|流式試劑盒?一鍵解析細胞亞群
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流式試劑盒•
一鍵解析細胞亞群
SFCMZ-007 Mouse T-Subset Flow Kit
(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE)
基礎介紹
流式細胞術(FCM),以流式細胞儀為檢測工具,對懸液中的單細胞或其他生物粒子,結合免疫標記(偶聯熒光素抗體)、光電轉換等技術,實現高速、逐一的細胞定量分析和分選的技術。在生命科學研究領域,細胞群體的精準分型與功能解析是探究疾病發生機制、評估免疫狀態的核心環節。流式細胞術憑借其高靈敏度、多參數同步檢測及單細胞分析能力,已成為細胞表型分析的關鍵技術。
T淋巴細胞(T lymphocyte)簡稱T細胞,來源于骨髓的多能干細胞,在胸腺中分化、發育成熟后,通過淋巴和血液循環而分布到全身的免疫器官和組織中發揮免疫功能。T細胞是一類關鍵的免疫細胞,主要根據其表面分子和功能分類。最常見的是CD4+ T細胞(輔助T細胞,調節免疫應答)和CD8+ T細胞(細胞毒性T細胞,直接殺傷感染細胞)。此外,還包括調節性T細胞(抑制免疫反應)、記憶T細胞(長期免疫記憶)、γδ T細胞(固有免疫樣功能)等亞群,共同協調適應性免疫防御。
標志物:CD3e
表達細胞范圍:所有成熟T細胞(胸腺細胞除外)
核心作用:構成TCR-CD3復合物,傳遞T細胞活化信號
免疫檢測作用:判定總T細胞
標志物:CD4
表達細胞范圍:輔助性T細胞、調節性T細胞等
核心作用:結合MHC Ⅱ類分子,輔助T細胞活化,調控免疫應答
免疫檢測作用:判定輔助性T細胞亞群
標志物:CD8α
表達細胞范圍:細胞毒性T細胞、部分記憶T細胞
核心作用:結合MHC Ⅰ類分子,介導CTL殺傷靶細胞
免疫檢測作用:判定細胞毒性T細胞亞群
試劑盒三維數據卡
名稱
Mouse T-Subset Flow Kit
(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE))
貨號 | SFCMZ-007 |
規格 | 25T/50T/100T |
交叉反應 | Mouse |
應用 | FCM |
|試劑盒組分|
產品編號 | 產品名稱 | 100T/ 50T/25T | 推薦 使用量 |
SFCMZ-007A | Anti-CD3e(FITC) Monoclonal Antibody | 1mL/ 0.5mL/0.25mL | 10μL/T |
SFCMZ-007B | Anti-CD4(APC) Monoclonal Antibody | 1mL/ 0.5mL/0.25mL | 10μL/T |
SFCMZ-007C | Anti-CD8a(PE) Monoclonal Antibody | 1mL/ 0.5mL/0.25mL | 10μL/T |
SFCMZ-007D | Anti-Armenian Hamster IgG Isotype Control(FITC) Monoclonal Antibody | 0.1mL/ 0.1mL/0.1mL | 10μL/T |
SFCMZ-007E | Anti-Rat IgG2b Isotype Control(APC) Monoclonal Antibody | 0.1mL/ 0.1mL/0.1mL | 10μL/T |
SFCMZ-007F | Anti-Rat IgG2a Isotype Control(PE) Monoclonal Antibody | 0.1mL/ 0.1mL/0.1mL | 10μL/T |
實驗相關
01
實驗流程(僅供參考)
1 | 取100 μL EDTA抗凝外周血,加到5 mL流式檢測管底部; |
2 | 加入2 mL 1×紅細胞裂解液(推薦貨號:R1010,紅細胞裂解液),混勻后冰上孵育10 min,以裂解紅細胞(觀察溶液由鮮紅色變為透亮,說明紅細胞裂解完-全); |
3 | 加入3 mL染色緩沖液(推薦貨號:CA2490,流式染色緩沖液)混勻,終止裂解;將樣本管以1000 rpm離心5 min,棄去上清液; |
4 | 加入2 mL染色緩沖液重懸細胞,以1000 rpm離心5 min,棄去上清液; |
5 | 加入60 μL染色緩沖液,依次加入CD3-FITC, CD8α-PE, CD45-PerCP, CD4-APC 各10 μL檢測抗體(每1×106個細胞),混勻,室溫避光孵育20 min; (注:根據待加入抗體量調整染色緩沖液的體積,使總體積為100 μL。例如,待加入10 μL檢測抗體,則需加入90 μL染色緩沖液。) |
6 | 加入2 mL染色緩沖液,以1000 rpm離心5 min,棄去上清液; |
7 | 加入0.5 mL染色緩沖液重懸細胞,進行流式細胞術檢測(若不能立即上機,可加入固定液后于4℃避光保存,建議24小時內上機)。 |
02
結果判定圖

03
實驗圖片

Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), FSC-A.

Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), Comp-FITC CD3.

Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), Comp-FITC CD3.

Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), Comp-FITC CD3.
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