“Qubit Flex 儀器標(biāo)準(zhǔn)品錯誤”這個提示，通常表明儀器在校準(zhǔn)過程中，檢測到的標(biāo)準(zhǔn)品熒光信號不在預(yù)期范圍內(nèi)。

不用太擔(dān)心，這不是儀器壞了，絕大多數(shù)情況都可以通過以下步驟來排查和解決。

一、檢查關(guān)鍵數(shù)值與硬件

1、查看原始熒光值 (RFU)：在儀器上找到“Check Standards”或“Check Calibration”功能。

（1）對于核酸定量：標(biāo)準(zhǔn)品2 (Standard 2) 的熒光值，應(yīng)至少是標(biāo)準(zhǔn)品1 (Standard 1) 的 10到50倍。

（2）對于蛋白定量：標(biāo)準(zhǔn)品3 (Standard 3) 的熒光值應(yīng)約為標(biāo)準(zhǔn)品2 (Standard 2) 的 2倍。

（3）如果熒光值不滿足上述關(guān)系，說明標(biāo)準(zhǔn)品本身或配制過程可能有問題。

2、檢查儀器光源：打開儀器蓋子，運(yùn)行一次校準(zhǔn)，觀察樣品槽內(nèi)是否有紅光或藍(lán)光閃爍5次。如果沒有，說明儀器光路可能存在問題，需要聯(lián)系售后。

二、檢查操作流程

1、確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)品與樣本的配制：檢查是否嚴(yán)格按照說明書操作。例如，標(biāo)準(zhǔn)品通常需要將 10 µL 的標(biāo)準(zhǔn)品加入到 190 µL 的工作溶液中。同時，請確保標(biāo)準(zhǔn)品與樣品使用的是同一批工作液。

2、核對試劑盒與程序：確認(rèn)儀器上選擇的程序與你所用的Qubit檢測試劑盒匹配。

3、檢查標(biāo)準(zhǔn)品與試劑盒有效期：Qubit試劑盒自收到之日起，通常穩(wěn)定至少6個月。如果試劑盒已過期（比如超過一年），或懷疑RNA標(biāo)準(zhǔn)品降解，建議更換新的試劑盒。

4、檢查檢測管：確保使用的是光學(xué)透明的專用檢測管。同時，保證管外壁清潔干燥，且管內(nèi)液體體積至少為200 µL。

三、排查環(huán)境與操作細(xì)節(jié)

1、溫度控制：Qubit檢測對溫度敏感。確保所有試劑（緩沖液、染料）和樣本都處于室溫（~25°C）。剛從4°C冰箱取出的緩沖液，即使在室溫放置2-3小時也可能仍未達(dá)到室溫。

2、避免樣本過熱：剛從離心機(jī)取出的樣本，或在儀器內(nèi)放置過久、反復(fù)讀取的樣本，都可能因溫度升高導(dǎo)致信號減弱。如需多次讀取，應(yīng)將檢測管取出，在室溫下平衡至少30秒再測。

3、檢查樣本濃度：查看原始熒光值，確認(rèn)樣本的熒光值是否落在標(biāo)準(zhǔn)品的熒光值之間（或略高于最高標(biāo)準(zhǔn)品）。如果不在范圍內(nèi)，儀器會提示“OUT OF RANGE”，此時需要對樣本進(jìn)行稀釋或調(diào)整上樣體積。

4、交叉污染：Qubit檢測非常靈敏，即使是上一個樣本的微小殘留都可能導(dǎo)致錯誤。建議每次使用新的檢測管，并確保管外壁清潔干燥。