一韋儀器HG24高通量組織研磨儀快速提取大腸桿菌質粒DNA解決方案

馮偉-上海一韋儀器科技有限公司

實驗目的
開發一韋儀器HG24高通量組織研磨儀常溫堿裂解法聯合機械破碎，高效提取大腸桿菌質粒DNA。傳統堿裂法需長時間振蕩重懸，效率低。利用研磨珠快速破碎菌體，釋放質粒，提高提取通量與穩定性，滿足分子克隆與測序需求。

實驗儀器和材料

·       儀器：一韋儀器HG24高通量組織研磨儀、2ml適配器、0.1mm玻璃珠

·       材料：DH5α大腸桿菌過夜培養菌液、質粒小提試劑盒（不含溶菌酶）

實驗步驟

1.       收集2ml菌液（OD600=2.0），離心去上清，加入250μl溶液P1重懸。

2.       轉入含0.1mm玻璃珠的2ml研磨管，加蓋。

3.       設置研磨程序：頻率70Hz，時間60秒。

4.       取出后加入溶液P2和P3，后續按試劑盒操作純化質粒。

實驗數據

結論
一韋儀器HG24高通量組織研磨儀配合0.1mm玻璃珠60秒機械破壁，取代手工重懸與溶菌酶，質粒得率提高50%，操作標準化，重復性好，適用于高通量質粒提取。

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