一韋儀器HG24高通量組織研磨儀破碎96孔板大腸桿菌用于β-半乳糖苷酶活性檢測

馮偉-上海一韋儀器科技有限公司

實驗目的
建立96孔板高通量機械破碎法，快速裂解大腸桿菌細胞釋放β-半乳糖苷酶，避免超聲或凍融對活性的影響。一韋儀器高通量組織研磨儀HG24配備4×96深孔板適配器，可同時處理384個樣品，適用于酶活篩選與突變體庫分析。

實驗儀器和材料

·       儀器：一韋儀器HG24高通量組織研磨儀、4×96深孔板適配器、3mm氧化鋯珠

·       材料：含lacZ基因的大腸桿菌菌液、Z-Buffer、ONPG底物

實驗步驟

1.       每孔加入200μl菌液（OD600=1.0），離心去上清。

2.       每孔加入100μl Z-Buffer和1顆3mm氧化鋯珠。

3.       封板膜密封，設置研磨頻率68Hz，時間90秒。

4.       離心取上清，加ONPG測420nm吸光度。

實驗數據

結論
一韋儀器HG24高通量組織研磨儀搭配深孔板實現大腸桿菌高通量、均一化破碎，酶活檢測CV僅2.3%，比凍融法活性回收率提高35%，適用于酶學篩選及合成生物學應用。

• 組織研磨儀

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