某一客戶采購SI5006小柱，第一次使用，用于極性脂肪和中性脂肪的分離，用的溶劑是二氯甲烷和甲醇，投訴小柱填料分層，

（1）活化：正己烷，然后400uL二氯甲烷溶劑溶解樣品，上樣會分層，比較小；

（2）活化：二氯甲烷， 一共15mL，5mL、5mL分批加入， 6-10mL分層特別明顯，但是再加入甲醇后，又會復(fù)原。

可以看到，活化加入二氯甲烷溶劑時，填料有類似“分層"現(xiàn)象，但是將溶劑擠干吹干，小柱又恢復(fù)了白色。 驗證看下來，與客戶端表現(xiàn)一致。

那么，我們來分析一下，為什么將二氯甲烷加入硅膠小柱時，會有填料“消失"或者“分層"現(xiàn)象呢？

二氯甲烷的折光率為nD(20)=1.424，硅膠的折光率一般在1.41~1.53之間，因孔隙含空氣，孔隙越高整體表觀折光率輕微下降（1.41~1.46 區(qū)間浮動）。

折光率是指光線在空氣中進行的速度與在樣品中進行速度的比值，是有機化合物重要的物理常數(shù)。二氯甲烷填充并潤濕了硅膠孔道，使其折光率與硅膠接近而暫時變透明；溶劑壓出后孔道重新進空氣，光散射增強，所以又恢復(fù)白色，這是正常的物理現(xiàn)象。

因此，與硅膠折光率近似的溶劑，基本都會有這種現(xiàn)象，下面列出了常用溶劑的折光率數(shù)據(jù)。

加了二氯甲烷、二氯甲烷、苯、甲苯的硅膠小柱有透明現(xiàn)象產(chǎn)生，而加了正己烷、乙酸乙酯、甲醇、丙酮的硅膠小柱就不明顯。原來折光率與硅膠接近的溶劑確實可以出現(xiàn)透明現(xiàn)象。

（1）硅膠小柱遇到二氯甲烷溶劑變“透明"或“分層"現(xiàn)象是因為兩者的折光率接近，選擇其他折光率相似的溶劑硅膠小柱也會有類似現(xiàn)象；

（2）如果你在使用硅膠小柱過程中也遇到了類似的現(xiàn)象，不用擔(dān)心，硅膠小柱是可以正常使用的，對實驗結(jié)果沒有影響~