3磷酸甘油酸激酶(PGK)測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關(guān)鍵酶，廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi)，催化1，3-二磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸甘油酸，產(chǎn)生1分子ATP，具有影響DNA復(fù)制和修補(bǔ)及刺激病毒RNA合成等生物學(xué)功能，廣泛應(yīng)用于藥物靶標(biāo)設(shè)計(jì)。

測(cè)定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產(chǎn)生1,3-二磷酸甘油酸和ADP，1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸，340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、研缽、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。

樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

Matrigengel Matrix (Phenol Red Free) (Acro Certified)腫瘤細(xì)胞侵襲，血管生成10mL/5mL

低因子Matrigengel Matrix (GFR) (Acro Certified)血管生成10mL/5mL

Matrigengel Matrix (GFR Phenol Red Free) (Acro Certified)類器官培養(yǎng)，血管生成10mL/5mL

高濃度Matrigengel Matrix (HC) (Acro Certified)體內(nèi)成瘤10mL/5mL

Matrigengel Matrix (HC Phenol Red Free) (Acro Certified)體內(nèi)成瘤10mL/5mL

Matrigengel Matrix (HC GFR) (Acro Certified)體內(nèi)成瘤10mL/5mL

Matrigengel Matrix (HC GFR Phenol Red Free) (Acro Certified)體內(nèi)血管生成10mL/5mL

干細(xì)胞培養(yǎng)Matrigengel Matrix IPSC Level (Acro Certified)干細(xì)胞培養(yǎng)10mL/5mL

類器官培養(yǎng)Matrigengel Matrix Organoid Culture (Acro Certified)類器官培養(yǎng)10mL/5mL

Human IgG3 Kappa Isotype Control (mAb, carrier free)

Human IgG4 Kappa Isotype Control (mAb, carrier free, MALS verified)

FITC-Labeled Human IgG1 Kappa Isotype Control (FITC, mAb, carrier free)

MouseMouse IgG1 Kappa Isotype Control (mAb, Carrier free, MALS verified)

Biotinylated Mouse IgG1 Isotype Control (Biotin, mAb, carrier free, MALS verified)

NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法100管/96樣

NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測(cè)試盒微量法100管/96樣

NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

NO含量測(cè)試盒微量法100管/96樣

NO含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣

NO含量測(cè)試盒微量法100管/48樣

NO含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

N乙酰βD葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)試盒微量法100管/48樣

N乙酰βD葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

3磷酸甘油酸激酶(PGK)測(cè)試盒UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒微量法100管/96樣

UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

αL阿拉伯呋喃糖苷酶(αLAf)測(cè)試盒微量法100管/48樣

αL阿拉伯呋喃糖苷酶(αLAf)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。