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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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一、產(chǎn)品描述
英文名稱：Rat C3 (Complement C3) Sandwich ELISA Kit
中文名稱：大鼠補(bǔ)體C3夾心酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
品牌：St John's Laboratory
貨號(hào)：STJE0005616
產(chǎn)品規(guī)格： 96T
St John's Laboratory 品牌推出的 大鼠補(bǔ)體C3（Complement C3）夾心ELISA試劑盒，專為科研用途設(shè)計(jì)，用于定量檢測大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中補(bǔ)體C3（Complement C3）蛋白的濃度。本試劑盒采用高特異性單克隆抗體包被微孔板，結(jié)合生物素-親和素放大系統(tǒng)，確保檢測結(jié)果具有高度靈敏性、重復(fù)性和準(zhǔn)確性。該產(chǎn)品適用于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究、免疫學(xué)研究、炎癥機(jī)制探索、藥物篩選及毒理學(xué)評(píng)估等領(lǐng)域，是研究大鼠體內(nèi)補(bǔ)體系統(tǒng)激活狀態(tài)的重要工具。
二、產(chǎn)品特點(diǎn)
本試劑盒具備多項(xiàng)顯著優(yōu)勢，使其在同類產(chǎn)品中脫穎而出：
1. 高靈敏度：檢測下限可達(dá)15.6 pg/mL，能夠準(zhǔn)確捕捉低濃度樣本中的C3蛋白變化，適用于早期炎癥或輕微免疫激活狀態(tài)的研究。
2. 高特異性：采用針對(duì)大鼠C3蛋白N端或關(guān)鍵功能區(qū)域的單克隆捕獲抗體與檢測抗體組合，有效避免與其他補(bǔ)體成分或非特異性蛋白的交叉反應(yīng)。
3. 操作簡便：采用經(jīng)典的夾心ELISA流程，無需復(fù)雜設(shè)備，常規(guī)實(shí)驗(yàn)室即可完成，整個(gè)實(shí)驗(yàn)可在4–5小時(shí)內(nèi)完成。
4. 良好的重復(fù)性：批內(nèi)變異系數(shù)（CV）<10%，批間變異系數(shù)<15%，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的高度可重復(fù)性。所有組分經(jīng)優(yōu)化配方處理，在推薦儲(chǔ)存條件下可長期保持活性。
5. 樣本類型兼容性強(qiáng)：適用于大鼠血清、EDTA/肝素抗凝血漿及細(xì)胞培養(yǎng)上清等多種樣本類型，適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需求。
三、儲(chǔ)存條件
為確保試劑盒性能穩(wěn)定，請(qǐng)嚴(yán)格按照以下條件儲(chǔ)存：
· 未開封的試劑盒應(yīng)于 2–8°C 冰箱中避光保存，切勿冷凍。
· 開封后，微孔板條需立即放回原鋁箔袋中，加入干燥劑并密封，于2–8°C保存，并在 1周內(nèi)使用完畢。
· 標(biāo)準(zhǔn)品為凍干粉，使用前需按說明書要求用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液復(fù)溶，復(fù)溶后可分裝并于 -20°C 凍存，避免反復(fù)凍融，建議在 1個(gè)月內(nèi)使用完畢。
· 酶標(biāo)工作液、生物素化檢測抗體等液體組分開封后應(yīng)于 2–8°C 保存，并在 7天內(nèi)使用完畢。
· 顯色底物（TMB）對(duì)光敏感，使用后應(yīng)立即蓋緊瓶蓋，避光保存于2–8°C。
· 終止液（1M H?SO?）具有腐蝕性，應(yīng)遠(yuǎn)離兒童存放，并避免接觸皮膚或眼睛。
· 所有試劑在使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（約20–25°C），以避免冷凝水影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
若儲(chǔ)存條件不符合要求，可能導(dǎo)致抗體失活、酶活性下降或標(biāo)準(zhǔn)曲線偏移，從而影響檢測準(zhǔn)確性。
四、工作原理
本試劑盒基于 夾心酶聯(lián)免疫吸附測定法（Sandwich ELISA） 原理進(jìn)行定量檢測。具體步驟如下：
首先，微孔板已預(yù)先包被了針對(duì)大鼠補(bǔ)體C3蛋白的高親和力單克隆捕獲抗體。當(dāng)加入待測樣本（如血清、血漿或細(xì)胞上清）后，樣本中的C3蛋白會(huì)特異性地與包被抗體結(jié)合，形成“抗體–抗原"復(fù)合物。隨后，加入生物素標(biāo)記的檢測抗體，該抗體識(shí)別C3蛋白上的另一表位，從而形成“捕獲抗體–C3抗原–生物素化檢測抗體"的三明治結(jié)構(gòu)。接著，加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素（Streptavidin-HRP），其與生物素高親和力結(jié)合，形成完整的檢測復(fù)合物。最后，加入TMB（3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺）顯色底物，在HRP催化下產(chǎn)生藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物，顏色深淺與樣本中C3濃度成正比。加入終止液（1M硫酸）后，反應(yīng)終止，溶液由藍(lán)變黃，使用酶標(biāo)儀在450 nm波長（參考波長630 nm）下測定吸光度（OD值）。通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可計(jì)算出各樣本中C3的精確濃度。
該方法具有雙重抗體識(shí)別機(jī)制，極大提高了檢測的特異性和靈敏度，有效排除樣本中其他蛋白的干擾。
五、解決實(shí)驗(yàn)中的哪些問題
本試劑盒有效解決了以下實(shí)驗(yàn)痛點(diǎn)：
1. 無法實(shí)現(xiàn)高通量定量：相比WB等半定量方法，ELISA可同時(shí)處理多達(dá)96個(gè)樣本，適合大規(guī)模篩選實(shí)驗(yàn)。
2. 樣本處理復(fù)雜：本試劑盒兼容多種樣本類型，無需復(fù)雜前處理，簡化實(shí)驗(yàn)流程。
3. 數(shù)據(jù)重復(fù)性差：由于采用標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)與嚴(yán)格質(zhì)控，本產(chǎn)品批間差異小，保障實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性，提升論文數(shù)據(jù)可信度。試劑盒提供高純度重組大鼠C3標(biāo)準(zhǔn)品，確保標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確可靠。
4. 實(shí)驗(yàn)周期長：整個(gè)檢測流程可在一天內(nèi)完成，加速研究進(jìn)度。
5. 成本高昂：相比質(zhì)譜或流式細(xì)胞術(shù)，ELISA成本更低，適合經(jīng)費(fèi)有限的實(shí)驗(yàn)室。
因此，本產(chǎn)品特別適用于研究糖尿病腎病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、敗血癥、肝臟損傷、神經(jīng)退行性疾病等與補(bǔ)體激活密切相關(guān)的疾病模型中C3的動(dòng)態(tài)變化。
六、使用方法
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
將所有試劑從冰箱取出，平衡至室溫（20–25°C）至少30分鐘。
準(zhǔn)備好所需數(shù)量的微孔板條，其余密封保存。
按說明書配制洗滌緩沖液（1×）：將濃縮洗滌液（20×）用去離子水按1:19稀釋。
復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品：用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液溶解凍干標(biāo)準(zhǔn)品，配制成1000 pg/mL母液，再進(jìn)行系列稀釋（如1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625 pg/mL及零標(biāo)準(zhǔn)）。
操作步驟：
1. 加樣：向微孔中分別加入100 μL標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本（建議設(shè)置復(fù)孔），輕敲板架混勻。
2. 孵育：37°C孵育90分鐘。
3. 洗滌：棄去孔內(nèi)液體，每孔加入350 μL 1×洗滌液，靜置30秒后吸干，重復(fù)洗板4次，最后拍干。
4. 加檢測抗體：每孔加入100 μL生物素化檢測抗體工作液，37°C孵育60分鐘。
5. 再次洗滌：同上，洗板4次。
6. 加酶標(biāo)液：每孔加入100 μL Streptavidin-HRP工作液，37°C避光孵育30分鐘。
7. 第三次洗滌：洗板5次，去除未結(jié)合酶標(biāo)物。
8. 顯色：每孔加入100 μL TMB顯色底物，37°C避光孵育15–20分鐘（根據(jù)顏色深淺調(diào)整時(shí)間）。
9. 終止反應(yīng)：每孔加入50 μL終止液，輕輕震蕩混勻。
10. 讀數(shù)：在加入終止液后30分鐘內(nèi)，使用酶標(biāo)儀在450 nm主波長、630 nm參考波長下測定OD值。
數(shù)據(jù)分析：
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪制四參數(shù)邏輯（4-PL）或線性標(biāo)準(zhǔn)曲線。
根據(jù)樣本OD值代入曲線方程，計(jì)算C3濃度。
若樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，需對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后重測。
注意事項(xiàng)：
避免孔間交叉污染，使用多通道移液器時(shí)注意更換槍頭。
洗滌務(wù)必干凈，殘留液體會(huì)導(dǎo)致背景升高。
顯色時(shí)間不宜過長，防止信號(hào)飽和。
所有操作應(yīng)在潔凈環(huán)境中進(jìn)行，避免灰塵或氣溶膠污染。
七、常見問題與解決方案
在使用本試劑盒過程中，用戶可能遇到以下問題，現(xiàn)提供詳細(xì)解答：
1. 若標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳或R2值低于0.99，可能是標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶不充分、稀釋操作誤差或顯色時(shí)間不當(dāng)所致，建議重新配制標(biāo)準(zhǔn)品，使用校準(zhǔn)過的移液器，并嚴(yán)格控制顯色時(shí)間。
2. 若樣本OD值普遍偏低，可能因樣本中C3濃度過低或樣本保存不當(dāng)導(dǎo)致蛋白降解，建議檢查樣本采集與凍存條件，必要時(shí)濃縮樣本或使用更高靈敏度檢測方法。
3. 若背景值過高（零標(biāo)準(zhǔn)OD > 0.1），通常由洗滌不充分、酶標(biāo)液殘留或TMB污染引起，應(yīng)增加洗滌次數(shù)至5–6次，并確保每次吸干；同時(shí)檢查TMB是否被金屬離子污染。
4. 若復(fù)孔間差異大（CV > 15%），多因加樣不均或孵育溫度波動(dòng)，建議使用多通道移液器，并確保孵育箱溫度均勻穩(wěn)定。
5. 若出現(xiàn)“鉤狀效應(yīng)"（高濃度樣本OD反而降低），說明抗原過量導(dǎo)致抗體飽和，此時(shí)應(yīng)將樣本進(jìn)行更高倍數(shù)稀釋后重測。
6. 若試劑盒開封后短期內(nèi)性能下降，可能因儲(chǔ)存不當(dāng)（如反復(fù)凍融、高溫暴露），請(qǐng)嚴(yán)格按說明書條件保存未用組分。
7. 若顯色后顏色迅速褪去，可能是終止液加入不及時(shí)或TMB失效，應(yīng)確保顯色后立即加終止液，并檢查TMB有效期。
8. 若微孔板邊緣孔信號(hào)異常（邊緣效應(yīng)），建議使用帶蓋孵育盒或在孵育時(shí)加入空白緩沖液至外圈孔以減少蒸發(fā)影響。
9. 若客戶使用非推薦樣本類型，可能出現(xiàn)干擾物質(zhì)影響結(jié)果，建議進(jìn)行樣本預(yù)處理（如離心、過濾、稀釋）或做加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證準(zhǔn)確性。
10. 若實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期不符，建議同步檢測陽性對(duì)照以驗(yàn)證系統(tǒng)有效性，并排查抗體特異性或樣本處理問題。
八、免責(zé)聲明
1. 本文內(nèi)容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理，僅個(gè)人觀點(diǎn)，具體以品牌信息文檔為準(zhǔn)。
2. 本產(chǎn)品僅限科研使用，不得用于臨床診斷、治療或預(yù)防用途。
3. St John's Laboratory 及其代理商不對(duì)因誤用、不當(dāng)儲(chǔ)存、違反操作規(guī)程或超出適用范圍使用本產(chǎn)品所導(dǎo)致的任何直接或間接損失承擔(dān)責(zé)任。
4. 用戶應(yīng)自行驗(yàn)證試劑盒在其特定實(shí)驗(yàn)體系中的適用性，并對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的解釋負(fù)全責(zé)。
5. 產(chǎn)品性能基于出廠時(shí)的測試條件，實(shí)際結(jié)果可能因?qū)嶒?yàn)室環(huán)境、操作人員技能、樣本質(zhì)量等因素而有所差異。
關(guān)鍵詞：大鼠C3 ELISA試劑盒、補(bǔ)體C3檢測試劑盒、St John's Laboratory ELISA、STJE0005616、大鼠補(bǔ)體C3定量、夾心ELISA試劑盒、96T ELISA kit、大鼠血清C3檢測、免疫學(xué)研究試劑、炎癥標(biāo)志物ELISA、補(bǔ)體系統(tǒng)檢測、高靈敏度ELISA、科研用ELISA試劑盒、大鼠C3蛋白測定、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線、生物素-親和素ELISA、補(bǔ)體激活研究、動(dòng)物模型C3檢測、ELISA操作指南、St John's Laboratory 中國代理
更多產(chǎn)品信息，請(qǐng)聯(lián)系中國區(qū)域代理商：上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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??St John's Laboratory 熱賣產(chǎn)品
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
STJE0005616 | Rat C3 (Complement C3) Sandwich ELISA Kit (STJE0005616) | 96T | stjohnslabs |
STJ195701-200ug | Anti-MTLN antibody (STJ195701) | 200ug | stjohnslabs |
STJ194378-200ug | Anti-TSACC antibody (57-107 aa) (STJ194378) | 200ug | stjohnslabs |
STJ194662-20ug | Anti-TARM1 antibody (36-86 aa) (STJ194662) | 20ug | stjohnslabs |
STJ193511-100ug | Anti-ERFE antibody (102-152 aa) (STJ193511) | 100ug | stjohnslabs |
STJ11101522-20uL | Anti-pan-Kla antibody (STJ11101522) | 20uL | stjohnslabs |
STJ195920-100ug | Anti-MFSD12 antibody (78-128 aa) (STJ195920) | 100ug | stjohnslabs |
STJ194899-100ug | Anti-C8orf82 antibody | 100 ug | stjohnslabs |
STJ11101440-100uL | Anti-NDUFB1 antibody (STJ11101440) | 100uL | stjohnslabs |
STJ194766-50ug | Anti-RNF157 antibody (588-638 aa) (STJ194766) | 50ug | stjohnslabs |
STJ11100297-100uL | Anti-CCR1 antibody (255-354) (STJ11100297) | 100uL | stjohnslabs |
STJE0008150-96T | Human CRISPLD2 (Cysteine-Rich Secretory Protein LCCL Domain-Containing 2) Sandwich ELISA Kit Kit (STJE0008150) | 96T | stjohnslabs |
STJ193921-50ug | Anti-TMEM63B antibody (627-677 aa) (STJ193921) | 50ug | stjohnslabs |
STJ196333-20ug | Anti-Phospho-IRF7-Ser477 antibody (STJ196333) | 20ug | stjohnslabs |
STJ11103778-20uL | Anti-Phospho-IRF7-S471/472 antibody (STJ11103778) | 20uL | stjohnslabs |
STJ192833-100ug | Anti-OR52L1 antibody (190-270 aa) (STJ192833) | 100ug | stjohnslabs |
STJ193142-20ug | Anti-OGG1 antibody (STJ193142) | 20ug | stjohnslabs |
STJ194151-20ug | Anti-CFAP144 antibody (7-57 aa) (STJ194151) | 20ug | stjohnslabs |
STJ195178-20ug | Anti-TMEM198 antibody (273-323 aa) (STJ195178) | 20ug | stjohnslabs |
STJ29417-100uL | Anti-CD47 antibody (20-140) (STJ29417) | 100uL | stjohnslabs |
STJ118768-100ul | Anti-AEBP1 antibody (999-1158) (STJ118768) | 100ul | stjohnslabs |
STJ11106153-20uL | Anti-SEPW1 antibody (1-87 aa) (STJ11106153) | 20uL | stjohnslabs |
STJ195793-100ug | Anti-TMEM252 antibody (21-71 aa) (STJ195793) | 100ug | stjohnslabs |
STJ198363-50ug | Anti-NDUFAF6 antibody (STJ198363) | 50ug | stjohnslabs |
STJ191062-50ug | Anti-SCG5 antibody (90-170 aa) (STJ191062) | 50ug | stjohnslabs |
STJA0008863-50ug | Anti-CWF19L2 antibody (STJA0008863) | 50ug | stjohnslabs |
STJ72975-100ug | Anti-CCDC3 antibody (134-148) (STJ72975) | 100ug | stjohnslabs |
STJ195768-200ug | Anti-STON2 antibody (47-97 aa) (STJ195768) | 200ug | stjohnslabs |
STJ195721-100ug | Anti-DNAI4 antibody (281-331 aa) (STJ195721) | 100ug | stjohnslabs |
STJ195178-200ug | Anti-TMEM198 antibody (273-323 aa) (STJ195178) | 200ug | stjohnslabs |
STJ11105344-20uL | Anti-GSDMD antibody (1-100, N-Term) (STJ11105344) | 20uL | stjohnslabs |
STJ194444-100ug | Anti-DOP1A antibody (1543-1593 aa) (STJ194444) | 100ug | stjohnslabs |
STJ114714-20uL | Anti-SLC7A9 antibody (1-100) (STJ114714) | 20uL | stjohnslabs |
STJ192660-100ug | Anti-ADGRV1 antibody (STJ192660) | 100ug | stjohnslabs |
STJ97863-50ug | Anti-BHMT antibody [8C11H5] (STJ97863) | 50ug | stjohnslabs |
STJ11101522-100uL | Anti-pan-Kla antibody (STJ11101522) | 100uL | stjohnslabs |
STJ11101616-100uL | Anti-METTL3 antibody (2-250) [S6MR] (STJ11101616) | 100uL | stjohnslabs |
STJ195998-100ug | Anti-SELENOH antibody (58-108 aa) (STJ195998) | 100ug | stjohnslabs |
STJ70332-100ug | Anti-ALMS1 antibody (C-Term) (STJ70332) | 100ug | stjohnslabs |
STJ112074-200uL(2x100uL) | Anti-UPK3A antibody (19-207) (STJ112074) | 200uL(2x100uL) | stjohnslabs |
STJ90953-100ug | Anti-Phospho-OXSR1-Thr185 antibody (151-200 aa) (STJ90953) | 100ug | stjohnslabs |
STJ194640-20ug | Anti-SLC25A44 antibody (237-287 aa) (STJ194640) | 20ug | stjohnslabs |
STJA0010492-100uL | Anti-METTL3 antibody [SM0492] (STJA0010492) | 100uL | stjohnslabs |
STJA0010492-50uL | Anti-METTL3 antibody [SM0492] (STJA0010492) | 50uL | stjohnslabs |
STJ91682-20ug | Anti-ARHGAP18 antibody (517-566 aa) (STJ91682) | 20ug | stjohnslabs |
STJ193511-20ug | Anti-ERFE antibody (102-152 aa) (STJ193511) | 20ug | stjohnslabs |
STJ194894-100ug | Anti-SAMD5 antibody (66-116 aa) (STJ194894) | 100ug | stjohnslabs |
STJ91023-50ug | Anti-Phospho-TH-Ser19 antibody (10-59 aa) (STJ91023) | 50ug | stjohnslabs |
STJ116041-20uL | Anti-STIP1 antibody (1-300) (STJ116041) | 20uL | stjohnslabs |
STJ11101223-20uL | Anti-STIP1 antibody (2-98) [S3MR] (STJ11101223) | 20uL | stjohnslabs |
STJ22524-20uL | Anti-ADNP antibody (843-1102) (STJ22524) | 20uL | stjohnslabs |
STJ91502-20ug | Anti-ADNP antibody (111-160 aa) (STJ91502) | 20ug | stjohnslabs |
STJ96208-20ug | Anti-USP48 antibody (631-680 aa) (STJ96208) | 20ug | stjohnslabs |
STJ197447-20ug | Anti-STIP1 antibody (250-300 aa) (STJ197447) | 20ug | stjohnslabs |
STJ194616-20ug | Anti-SWI5 antibody (185-235 aa) (STJ194616) | 20ug | stjohnslabs |
STJ194162-20ug | Anti-SFR1 antibody (110-160 aa) (STJ194162) | 20ug | stjohnslabs |
STJ90953-20ug | Anti-Phospho-OXSR1-Thr185 antibody (151-200 aa) (STJ90953) | 20ug | stjohnslabs |
STJ11103260-100uL | Anti-Hivep3 antibody (617-714) (STJ11103260) | 100uL | stjohnslabs |
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