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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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產(chǎn)品描述
英文名稱：Anti-TSACC antibody
中文名稱：抗TSACC抗體
貨號(hào)：STJ194378-200ug
規(guī)格：200 μg
本產(chǎn)品為 St John's Laboratory研發(fā)并生產(chǎn)的高特異性多克隆抗體。該抗體靶向人類 TSACC 蛋白的第57至107位氨基酸區(qū)域。TSACC 是一種在睪丸組織中高度表達(dá)、同時(shí)參與細(xì)胞凋亡調(diào)控的蛋白質(zhì)，在生殖生物學(xué)、腫瘤發(fā)生及細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究中具有重要價(jià)值。
本抗體采用兔源免疫系統(tǒng)制備，通過親和純化工藝獲得，確保高純度與高特異性。適用于多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)，包括但不限于 Western Blot（WB）、免疫沉淀（IP）、免疫熒光（IF）、免疫組化（IHC）等。產(chǎn)品以凍干粉或液體形式提供（具體形式依批次而定）。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. Anti-TSACC 抗體（57-107 aa）具備多項(xiàng)顯著優(yōu)勢(shì)，使其成為研究 TSACC 蛋白功能的理想工具。首先，該抗體針對(duì) TSACC 蛋白 N 端保守結(jié)構(gòu)域（57-107 aa）設(shè)計(jì)，該區(qū)域在進(jìn)化上高度保守，且遠(yuǎn)離已知的翻譯后修飾位點(diǎn)，從而避免因磷酸化、乙酰化等修飾導(dǎo)致的識(shí)別偏差，確保抗體在不同生理或病理狀態(tài)下均能穩(wěn)定結(jié)合目標(biāo)抗原。
2. 本抗體采用高親和力兔多克隆體系，經(jīng)過多輪抗原免疫與血清篩選，最終通過抗原親和層析純化，獲得高特異性與靈敏度。在 Western Blot 實(shí)驗(yàn)中，可清晰識(shí)別約 35 kDa 的 TSACC 蛋白條帶，背景信號(hào)極低；在免疫熒光染色中，能精準(zhǔn)定位 TSACC 在細(xì)胞質(zhì)或特定亞細(xì)胞器中的分布，尤其適用于睪丸組織切片或生殖細(xì)胞系的研究。
3. 該抗體經(jīng)過交叉反應(yīng)性驗(yàn)證，確認(rèn)對(duì)人源 TSACC 具有高度特異性，對(duì)小鼠、大鼠同源蛋白亦有良好識(shí)別能力（需參考具體批次數(shù)據(jù)），但對(duì)其他卷曲螺旋結(jié)構(gòu)蛋白無(wú)明顯交叉反應(yīng)，有效避免假陽(yáng)性結(jié)果。
4. 本產(chǎn)品提供靈活的包裝規(guī)格（200 μg），適合中長(zhǎng)期項(xiàng)目使用，且濃度適中，便于用戶進(jìn)行梯度稀釋優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。產(chǎn)品附帶詳細(xì)的技術(shù)支持文檔，并可通過 St John's Laboratory 渠道獲取批次特異性驗(yàn)證數(shù)據(jù)，極大提升實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性與數(shù)據(jù)可信度。
儲(chǔ)存條件
為確保 Anti-TSACC 抗體（57-107 aa）的穩(wěn)定性與活性，請(qǐng)嚴(yán)格按照以下儲(chǔ)存條件操作：
1. 未開封產(chǎn)品應(yīng)于 -20°C 長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融。若產(chǎn)品以液體形式提供，建議分裝成單次使用量（如 10–20 μL/管），并于 -20°C 凍存。每次使用前，將所需分裝管置于冰上緩慢解凍，使用后立即放回 -20°C。嚴(yán)禁在 4°C 長(zhǎng)期存放液體抗體超過一周，以免蛋白降解或聚集。
2. 若產(chǎn)品為凍干粉形式，請(qǐng)?jiān)谑盏胶罅⒓粗糜?-20°C 干燥環(huán)境中保存。復(fù)溶時(shí)，建議使用無(wú)菌 PBS（pH 7.4）或廠家推薦緩沖液，輕輕混勻至溶解（避免劇烈渦旋），復(fù)溶后抗體濃度通常為 1 mg/mL。復(fù)溶后的抗體可短期（≤1 周）存放于 4°C，長(zhǎng)期仍需分裝凍存于 -20°C。
3. 所有操作過程中應(yīng)避免抗體接觸強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑或高濃度去垢劑（如 SDS >0.1%），以免破壞抗體構(gòu)象。NaN?作為防腐劑雖可抑制微生物生長(zhǎng)，但對(duì)辣根過氧化物酶（HRP）有抑制作用，因此用于 HRP 標(biāo)記二抗系統(tǒng)時(shí)，建議在使用前通過透析或脫鹽柱去除 NaN?，或選擇不含防腐劑的批次。
工作原理
1. Anti-TSACC 抗體（57-107 aa）的工作原理基于抗原-抗體的高度特異性結(jié)合機(jī)制。TSACC 蛋白是一種含有卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域的細(xì)胞內(nèi)蛋白，主要在睪丸生精細(xì)胞中表達(dá)，并在某些癌細(xì)胞中異常上調(diào)，參與調(diào)控線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路。
2. 在 Western Blot 應(yīng)用中，樣品經(jīng) SDS-PAGE 分離后轉(zhuǎn)膜，抗體與膜上固定化的 TSACC 蛋白結(jié)合，再通過酶標(biāo)或熒光標(biāo)記的二抗進(jìn)行信號(hào)放大與檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì) TSACC 表達(dá)水平的定量或半定量分析。
3. 在免疫沉淀（IP）實(shí)驗(yàn)中，該抗體可與 Protein A/G 磁珠或瓊脂糖珠偶聯(lián)，從細(xì)胞裂解液中特異性富集 TSACC 蛋白及其相互作用伙伴，用于后續(xù)質(zhì)譜分析或共免疫沉淀驗(yàn)證蛋白互作網(wǎng)絡(luò)。
4. 在免疫熒光（IF）或免疫組化（IHC）中，抗體穿透固定后的細(xì)胞或組織切片，與內(nèi)源性 TSACC 結(jié)合，通過熒光或顯色二抗可視化其亞細(xì)胞定位。研究表明，TSACC 主要定位于細(xì)胞質(zhì)，但在凋亡早期可轉(zhuǎn)位至線粒體外膜，本抗體可有效捕捉這一動(dòng)態(tài)過程，為研究細(xì)胞死亡機(jī)制提供關(guān)鍵工具。
解決實(shí)驗(yàn)中的哪些問題
Anti-TSACC 抗體（57-107 aa）在多個(gè)研究場(chǎng)景中可有效解決關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)難題：
1. TSACC 蛋白表達(dá)檢測(cè)困難：由于 TSACC 在大多數(shù)組織中表達(dá)極低，僅在睪丸或特定腫瘤中高表達(dá)，常規(guī)抗體易出現(xiàn)信號(hào)弱或背景高問題。
2. 凋亡通路機(jī)制研究受限：TSACC 被證實(shí)可與 BAX、BCL2 等凋亡調(diào)控蛋白相互作用，但缺乏可靠工具阻礙機(jī)制解析。
3. 亞細(xì)胞定位不明確：部分文獻(xiàn)報(bào)道 TSACC 存在于細(xì)胞核或線粒體，存在爭(zhēng)議。本抗體經(jīng) IF 驗(yàn)證，可清晰顯示其在正常與凋亡細(xì)胞中的定位差異，幫助厘清其功能場(chǎng)所。
4. 種屬交叉反應(yīng)不確定：許多商用抗體僅驗(yàn)證人源，限制動(dòng)物模型應(yīng)用。本產(chǎn)品經(jīng)序列比對(duì)與實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，對(duì)小鼠、大鼠 TSACC 同源蛋白具有良好識(shí)別能力（同源性 >85%），適用于轉(zhuǎn)基因或敲除小鼠模型研究。
5. 批次間差異導(dǎo)致數(shù)據(jù)不可重復(fù)：St John's Laboratory 實(shí)施嚴(yán)格的 QC 流程，每批抗體均提供驗(yàn)證數(shù)據(jù)，確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性，避免因抗體質(zhì)量問題浪費(fèi)寶貴樣本與時(shí)間。
6. 低豐度蛋白檢測(cè)靈敏度不足：在 WB 中，即使 TSACC 表達(dá)量極低（<1 ng），本抗體仍可產(chǎn)生可檢測(cè)信號(hào)，配合 ECL 超敏底物，顯著提升檢測(cè)下限。
使用方法
· Western Blot（WB）
1. 樣品制備：使用 RIPA 裂解液提取總蛋白，測(cè)定濃度（BCA 法），加入上樣緩沖液煮沸 5 分鐘。
2. 電泳與轉(zhuǎn)膜：按常規(guī) SDS-PAGE 分離蛋白，濕轉(zhuǎn)或半干轉(zhuǎn)至 PVDF 膜。
3. 封閉：5% 脫脂奶粉/TBST 室溫封閉 1 小時(shí)。
4. 一抗孵育：用 TBST 稀釋抗體，4°C 孵育過夜或室溫 2 小時(shí)。
5. 洗滌：TBST 洗 3×10 分鐘。
6. 二抗孵育：HRP 標(biāo)記抗兔 IgG，室溫 1 小時(shí)。
7. 顯影：ECL 化學(xué)發(fā)光，X 光片或成像系統(tǒng)檢測(cè)。
· 免疫熒光（IF）
1. 細(xì)胞固定：4% 多聚甲醛室溫固定 15 分鐘，PBS 洗 3 次。
2. 透化：0.1% Triton X-100/PBS 室溫 10 分鐘（如需檢測(cè)胞內(nèi)抗原）。
3. 封閉：5% BSA/PBS 室溫 1 小時(shí)。
4. 一抗孵育：抗體稀釋于 1% BSA/PBS（1:200–1:500），4°C 過夜。
5. 洗滌：PBS 洗 3×5 分鐘。
6. 二抗孵育：熒光標(biāo)記抗兔 IgG（如 Alexa Fluor 488，1:1000），避光室溫 1 小時(shí)。
7. 核染與封片：DAPI 染核，抗熒光淬滅封片劑封片，共聚焦顯微鏡觀察。
· 免疫沉淀（IP）
1. 預(yù)澄清：細(xì)胞裂解液與 Protein A/G 珠 4°C 旋轉(zhuǎn) 1 小時(shí)，離心取上清。
2. 抗體結(jié)合：加入 2–5 μg 抗體，4°C 旋轉(zhuǎn) 2 小時(shí)。
3. 加珠：加入 20 μL Protein A/G 磁珠，4°C 旋轉(zhuǎn)過夜。
4. 洗滌：冷裂解液洗 4–5 次。
5. 洗脫：SDS 上樣緩沖液 95°C 5 分鐘，用于 WB 或質(zhì)譜。
常見問題與解決方案
問題一：Western Blot 無(wú)信號(hào)或信號(hào)極弱
可能原因包括抗體稀釋度過高、樣品中 TSACC 表達(dá)量過低、轉(zhuǎn)膜效率差或抗原表位被遮蔽。建議首先確認(rèn)樣品來(lái)源是否為 TSACC 高表達(dá)組織；其次嘗試降低稀釋比；檢查轉(zhuǎn)膜；若使用甲醛固定的樣品，需進(jìn)行抗原修復(fù)。
問題二：非特異性條帶或高背景
常見于封閉不充分、一抗?jié)舛冗^高或洗滌不干凈。建議延長(zhǎng)封閉時(shí)間至 2 小時(shí)，使用 5% BSA 替代奶粉；降低抗體濃度；增加 TBST 洗滌次數(shù)與時(shí)間；確保二抗無(wú)非特異結(jié)合（設(shè)置無(wú)一抗對(duì)照）。
問題三：免疫熒光染色呈彌漫性或核定位錯(cuò)誤
可能因透化過度導(dǎo)致蛋白泄漏，或固定不充分。建議優(yōu)化透化時(shí)間，使用新鮮配制的多聚甲醛；設(shè)置同型對(duì)照排除非特異結(jié)合；確認(rèn) TSACC 文獻(xiàn)報(bào)道的定位。
問題四：IHC 染色陰性
組織中 TSACC 表達(dá)本身較低，或抗原修復(fù)不足。建議使用陽(yáng)性對(duì)照組織；嘗試不同抗原修復(fù)方法；延長(zhǎng)一抗孵育時(shí)間至 48 小時(shí)。
問題五：IP 實(shí)驗(yàn)未富集到目標(biāo)蛋白
可能因抗體無(wú)法識(shí)別天然構(gòu)象 TSACC，或裂解條件過于劇烈破壞蛋白復(fù)合物。建議使用溫和裂解液；驗(yàn)證抗體是否適用于 IP；增加抗體用量至 10 μg；設(shè)置 Input 對(duì)照確認(rèn)表達(dá)。
問題六：抗體沉淀或渾濁
可能因凍融不當(dāng)或污染。建議離心（12,000 rpm, 5 分鐘）取上清使用；若持續(xù)渾濁，聯(lián)系技術(shù)支持。
免責(zé)聲明
1. 本文內(nèi)容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理，僅個(gè)人觀點(diǎn)，具體以品牌信息文檔為準(zhǔn)。
2. 本產(chǎn)品由 St John's Laboratory 研發(fā)生產(chǎn)，僅供科學(xué)研究使用，不得用于任何臨床診斷、治療、預(yù)防疾病或商業(yè)用途。
3. St John's Laboratory 已盡努力確保產(chǎn)品信息的準(zhǔn)確性與可靠性，包括序列信息、應(yīng)用驗(yàn)證及性能數(shù)據(jù)。
4. 本產(chǎn)品受知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)，未經(jīng)書面許可，不得用于反向工程、轉(zhuǎn)售或制造仿制品。如對(duì)產(chǎn)品有任何疑問，請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持郵箱或訪問獲取資料。
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??St John's Laboratory熱賣產(chǎn)品
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STJ194662-20ug | Anti-TARM1 antibody (36-86 aa) (STJ194662) | 20ug | stjohnslabs |
STJ193511-100ug | Anti-ERFE antibody (102-152 aa) (STJ193511) | 100ug | stjohnslabs |
STJ11101522-20uL | Anti-pan-Kla antibody (STJ11101522) | 20uL | stjohnslabs |
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STJE0008150-96T | Human CRISPLD2 (Cysteine-Rich Secretory Protein LCCL Domain-Containing 2) Sandwich ELISA Kit Kit (STJE0008150) | 96T | stjohnslabs |
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STJ11101616-100uL | Anti-METTL3 antibody (2-250) [S6MR] (STJ11101616) | 100uL | stjohnslabs |
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STJA0010492-100uL | Anti-METTL3 antibody [SM0492] (STJA0010492) | 100uL | stjohnslabs |
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STJ11101223-20uL | Anti-STIP1 antibody (2-98) [S3MR] (STJ11101223) | 20uL | stjohnslabs |
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STJ91502-20ug | Anti-ADNP antibody (111-160 aa) (STJ91502) | 20ug | stjohnslabs |
STJ96208-20ug | Anti-USP48 antibody (631-680 aa) (STJ96208) | 20ug | stjohnslabs |
STJ197447-20ug | Anti-STIP1 antibody (250-300 aa) (STJ197447) | 20ug | stjohnslabs |
STJ194616-20ug | Anti-SWI5 antibody (185-235 aa) (STJ194616) | 20ug | stjohnslabs |
STJ194162-20ug | Anti-SFR1 antibody (110-160 aa) (STJ194162) | 20ug | stjohnslabs |
STJ90953-20ug | Anti-Phospho-OXSR1-Thr185 antibody (151-200 aa) (STJ90953) | 20ug | stjohnslabs |
STJ11103260-100uL | Anti-Hivep3 antibody (617-714) (STJ11103260) | 100uL | stjohnslabs |
STJ180567-0.1mLC | Anti-EGFR antibody (344-492aa) [ZR16] (STJ180567) | 0.1mLC | stjohnslabs |
STJ193581-50ug | Anti-CARS2 antibody (95-145 aa) (STJ193581) | 50ug | stjohnslabs |
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