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英文名稱: Cys(Npys)-TAT (47-57), FAM-labeled
中文名稱: Cys(Npys)-TAT (47-57)熒光標(biāo)記肽
Cys(Npys)-TAT (47-57), FAM-labeled 是一種結(jié)構(gòu)經(jīng)過精確修飾的細(xì)胞穿膜肽衍生物,由經(jīng)典的TAT肽(來源于HIV-1 TAT蛋白的47–57位氨基酸序列)為基礎(chǔ),并在N端引入Cys(Npys)修飾,同時(shí)標(biāo)記熒光團(tuán)FAM(6-羧基熒光素)。TAT片段序列通常為YGRKKRRQRRR,具有顯著的陽離子特征和高效的細(xì)胞穿透能力。Cys(Npys)片段引入了一種可控的巰基保護(hù)基團(tuán)(3-吡啶基二硫化物),能夠在溫和條件下進(jìn)行定向偶聯(lián),為其進(jìn)一步與靶分子、藥物或納米材料連接提供了靈活性。
FAM(5-或6-羧基熒光素)是一種廣泛應(yīng)用的綠色熒光染料,發(fā)射波長(zhǎng)約為520 nm,具有良好的光穩(wěn)定性和高信噪比。將FAM標(biāo)記在Cys(Npys)-TAT (47-57)上,可在不改變肽的生物學(xué)性質(zhì)的前提下,賦予其可視化功能。該設(shè)計(jì)使得研究者能夠通過熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)或?qū)崟r(shí)成像技術(shù),觀察其在細(xì)胞或組織中的分布和動(dòng)力學(xué)行為。特別是在研究跨膜運(yùn)輸、核定位或藥物遞送時(shí),F(xiàn)AM信號(hào)為定量與定位分析提供了直接依據(jù)。
Cys(Npys)的引入是一種重要的化學(xué)策略,用于實(shí)現(xiàn)可控的巰基活化。Npys(3-吡啶基二硫化物)可在特定還原條件下斷裂生成游離巰基,進(jìn)而與含巰基或馬來酰亞胺基團(tuán)的分子進(jìn)行偶聯(lián)。通過這種可逆的硫鍵化學(xué),Cys(Npys)-TAT (47-57)可以與多種生物活性分子或載體形成穩(wěn)定結(jié)合,如聚合物、納米顆粒、蛋白質(zhì)等。該設(shè)計(jì)增強(qiáng)了肽的功能化可塑性,使其在生物材料和分子探針構(gòu)建中具有較高的應(yīng)用潛力。
TAT (47-57)序列因其富含精氨酸和賴氨酸殘基,能夠與細(xì)胞膜表面的陰離子成分發(fā)生靜電相互作用,從而促進(jìn)跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)。Cys(Npys)-TAT (47-57), FAM-labeled 繼承了這一特性,能夠在無需載體的情況下穿透多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜,并在細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中累積。研究中常用于追蹤肽類分子、核酸復(fù)合物或藥物載體的細(xì)胞攝取路徑。與FAM標(biāo)記結(jié)合使用時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)效率的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),為細(xì)胞內(nèi)遞送系統(tǒng)的評(píng)估提供可量化的依據(jù)。
Cys(Npys)-TAT (47-57), FAM-labeled 在生物研究和材料科學(xué)中具有多層次用途:
生物標(biāo)記與示蹤研究——用于細(xì)胞攝取、胞內(nèi)定位及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分析。
生物偶聯(lián)平臺(tái)——Cys(Npys)結(jié)構(gòu)可與其他功能分子定向連接,構(gòu)建復(fù)合探針或智能載體。
藥物遞送研究——作為穿膜模塊與藥物或核酸片段連接,提高細(xì)胞攝取率。
分子影像學(xué)——FAM信號(hào)可用于活細(xì)胞或動(dòng)物模型的熒光成像實(shí)驗(yàn)。
其綜合設(shè)計(jì)兼顧了化學(xué)可操作性與生物相容性,為分子標(biāo)記和細(xì)胞研究提供了一種靈活且可追蹤的工具分子。
該肽通常以凍干粉末形式供應(yīng),外觀為淡黃色至淺綠色固體,溶于DMSO、PBS或水中。其純度常通過高效液相色譜(HPLC)檢測(cè),達(dá)到95%以上。建議將產(chǎn)品在?20°C條件下避光保存,溶液狀態(tài)應(yīng)于短期內(nèi)使用,以防止熒光信號(hào)衰減及巰基氧化。

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