英文名稱:5-TAMRA-Amyloid β-Protein (1-40)
中文名稱:5-TAMRA-標記β-淀粉樣蛋白 (1-40)
5-TAMRA-Amyloid β-Protein (1-40) 是在β-淀粉樣蛋白(Aβ 1-40)N端引入5-羧基四甲基羅丹明(5-TAMRA)熒光基團的衍生肽。該標記形式使得肽分子在維持其天然序列生化特性的同時,具備顯著的熒光特征。Aβ(1-40)是β-淀粉樣蛋白中較常研究的一種片段,其序列長度為40個氨基酸,來源于APP(Amyloid Precursor Protein)裂解。通過與5-TAMRA偶聯,可用于追蹤其在細胞或體外體系中的分布、聚集過程及與其他生物分子的相互作用。
5-TAMRA是一種廣泛應用的紅色熒光染料,其發射波長約在580–590 nm,熒光穩定、亮度高。與Aβ(1-40)偶聯后,不會顯著影響其折疊特性,使得研究者能夠在熒光成像、聚集動力學及分子識別實驗中精確地觀察蛋白行為。由于5-TAMRA的疏水性,標記后的肽分子可能在溶液中表現出略微不同的自組裝特征,這一性質在結構生物學研究中具有可控意義,可用于探討標記對肽體聚集狀態的影響。
5-TAMRA-Aβ(1-40)常被用于生物化學和生物物理實驗,尤其在以下研究方向中具有重要用途:
聚集行為監測:通過熒光信號強度或共振能量轉移(FRET)手段,可實時觀察Aβ(1-40)的聚集和纖維化過程。
細胞成像分析:借助共聚焦顯微鏡或流式細胞儀,可追蹤其在細胞內的定位、轉運及與膜結構的相互作用。
受體結合與抑制機制研究:熒光標記使其成為研究Aβ與受體或抑制分子相互作用的理想探針。
體外檢測平臺構建:可用于開發基于熒光變化的檢測體系,探討肽聚集或降解的影響因素。
這些應用為理解β-淀粉樣蛋白相關的分子過程提供了有價值的實驗模型。
通常該標記肽采用固相肽合成(SPPS)法制備,經HPLC純化后達到≥95%的純度。高純度保證了實驗結果的可重復性,減少因雜質引起的熒光干擾。純化后產物經凍干處理,以粉末形式提供,便于保存與復溶。
建議使用無菌去離子水、DMSO或PBS緩沖液進行溶解。由于Aβ肽具有一定的疏水性,溶解時可采用超聲輔助或先行使用六氟異丙醇(HFIP)預處理,以確保分子均一分散。使用過程中應避免長時間暴露于強光下,以防熒光基團光漂白。
5-TAMRA-Aβ(1-40)為紅色或淡橙色凍干粉末,具有良好的穩定性。建議在?20°C下避光密封保存,可長期維持結構完整。復溶后溶液應在短期內使用,避免反復凍融導致肽鏈降解或熒光信號減弱。

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