在免疫學功能評價、疫苗效果評估及腫瘤微環境研究中,通過流式細胞術檢測T細胞分泌的細胞因子(如IFN-γ、IL-4、IL-17A等)是判斷Th1/Th2/Th17分化及細胞毒性T細胞活化的核心指標。然而,離體狀態下淋巴細胞處于靜息期,若不施加有效的刺激信號,胞內細胞因子表達極低,難以獲得可靠的流式結果。
Elabscience® Cell Stimulation MIX Kit(細胞因子激活劑,貨號:E-CK-A019) 是一款即用型、優化的細胞刺激混合物,專為流式胞內染色(ICS)實驗設計。它能夠快速、高效地激活人及小鼠T淋巴細胞,誘導其合成并蓄積目標細胞因子,配合蛋白轉運抑制劑使用,即可獲得清晰、高分辨率的流式檢測數據。
本品含有佛波酯(PMA)和離子霉素(Ionomycin) 的友好比例混合物,通過協同激活蛋白激酶C(PKC)和提升胞內鈣離子濃度,模擬TCR/CD3復合物信號,強力觸發T細胞增殖和細胞因子基因轉錄。相較于傳統自配試劑,本產品:
批次間差異極小:標準化生產,避免了實驗室自行配制時溶劑揮發、稱量誤差導致的活性波動。
即取即用:無需溶解、分裝和滴定,直接加入培養體系,大幅縮短實驗準備時間。
兼容性強:可與人外周血單個核細胞(PBMCs)、小鼠脾細胞、淋巴結細胞等多種樣本良好適配。
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根據產品質控數據,當人外周血淋巴細胞與Cell Stimulation MIX及Protein Transport Inhibitor MIX共孵育5小時,隨后固定、破膜并進行CD3 FITC、IFN-γ PE和IL-4 APC染色,流式散點圖清晰顯示CD3+ T細胞群體中IFN-γ+(Th1)和IL-4+(Th2)雙陽性亞群顯著分群,背景信號極低。
同樣,小鼠脾細胞經過相同處理后,CD3 APC與IFN-γ FITC染色亦呈現出明顯的IFN-γ+細胞群,表明該刺激劑在跨物種應用中均能保持高度有效性。僅需5小時短時孵育,即可獲得足夠強度的胞內染色信號,較傳統過夜刺激更省時、細胞存活率更高。
截至目前,該產品已發表于國際主流學術期刊,相關研究成果涵蓋了心血管疾病及感染免疫領域:
心肌缺血再灌注損傷研究(BBA - Molecular Basis of Disease, 2026, IF: 4.2):研究團隊利用本產品刺激小鼠心臟浸潤的CD4+ T細胞,結合蛋白轉運抑制劑,成功檢測到Th17細胞分泌的IL-17A,為達格列凈通過調控RORγt改善心衰提供了關鍵的細胞功能學證據。
瘧疾感染中Breg分化機制(International Immunopharmacology, 2025, IF: 4.7):在該研究中,Cell Stimulation MIX被用于刺激脾臟淋巴細胞,通過流式檢測IL-35+調節性B細胞(Breg)的分化情況,揭示了STING–IRF3信號軸在瘧疾免疫調節中的新作用。
為滿足不同通量需求,提供50 Assays和500 Assays兩種規格。請于 -20°C避光條件下保存,有效期為12個月。運輸采用冰袋冷鏈,確保各組分活性穩定。使用前請wan全解凍并充分混勻,避免反復凍融。
最佳搭檔:推薦與Protein Transport Inhibitor MIX(貨號:E-CK-A013) 聯合使用,在刺激同時阻斷細胞因子分泌,使胞內蓄積量達到峰值。
刺激時間:建議總刺激時間為4~6小時,過長可能導致細胞活力下降,過短則積累不足。對于特定弱應答樣本,可適當延長至8小時。
對照設置:務必設置未刺激對照組(僅加轉運抑制劑)以評估背景水平,以及陽性對照(如CD3/CD28磁珠)以驗證系統有效性。
如果您正在尋找一款經過文獻驗證、操作簡便且刺激高效的細胞活化工具,Elabscience Cell Stimulation MIX Kit將是您提升胞內細胞因子檢測數據質量和實驗重復性的理想選擇。
參考文獻:
1、Dapagliflozin targets RORγt to improve myocardial ischemia-reperfusion injury-induced heart failure by regulating the CD4+ T cell/Th17 cell axis within cardiac tissue
IF: 4.200
Journal: BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-MOLECULAR BASIS OF DISEASE (2026)
DOI:10.1016/j.bbadis.2026.168185
Reactivity:Mouse
2、Distinct STING–IRF3 activation determines IL-35+ Breg differentiation in rodent malaria
IF: 4.700
Journal: INTERNATIONAL IMMUNOPHARMACOLOGY (2025)
DOI:10.1016/j.intimp.2025.115310
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