在多色流式細胞術和細胞功能研究中，死細胞的存在是導致非特異性染色和假陽性信號的“頭號干擾源"。死細胞由于膜通透性改變，會非特異性吸附抗體及其他熒光染料，造成背景升高、陽性群彌散，嚴重時甚至掩蓋真實生物學差異。因此，在樣本制備后有效剔除死細胞數據，是確保流式結果準確性的關鍵質控環節。

Elabscience® STYX™ 黃色固定化細胞活力檢測試劑盒（貨號：E-CK-A169） 提供了一款膜不通透、胺反應性的熒光染料，能夠精準區分活細胞與死細胞，且信號在固定、破膜乃至凍存后依舊保持穩定，特別適用于需要胞內染色的復雜流式方案。

技術原理：基于胺反應性的死活區分機制

Elabscience® STYX™ 黃色固定化細胞活力檢測試劑盒 是一種不能穿透完整細胞膜的小分子熒光染料。它能夠與細胞表面及胞內游離胺基發生不可逆的共價結合：

• 活細胞：染料僅能標記細胞膜表面的胺基，熒光信號相對較弱。

• 死細胞或凋亡晚期細胞：細胞膜完整性喪失，染料得以進入細胞內部，與大量胞內蛋白的胺基結合，熒光強度顯著高于活細胞（通常高出一個數量級）。

這一“信號增益型"設計使得活/死細胞群體在流式散點圖上形成極為清晰的分離，無需復雜的計算即可準確圈定分析門。

核心優勢：固定、破膜、凍存后信號依舊穩定

傳統死活染料（如PI、7-AAD）需在染色后立即上機檢測，一旦進行固定或破膜處理，其結合物會從死細胞上解離，導致假陰性結果。而STYX™ Yellow染料與胺基形成共價鍵，結合后極其牢固。根據產品驗證數據（見結果圖）：

• 將熱滅活（死）與活C57BL/6小鼠脾細胞按1:1混合，使用STYX™ Yellow染色后，一部分樣本立即上機檢測（藍色峰），另一部分樣本經固定/破膜處理后再檢測（紅色峰）。

• 結果顯示：固定/破膜前后，活細胞與死細胞的熒光強度差異幾乎一致，死細胞始終保持在強陽性區域（紅色峰與藍色峰高度重疊），而未被染色的細胞（黑色虛線峰）背景極低。

這意味著您可以在實驗流程的任意環節（表面染色前、固定破膜后、甚至是凍存復蘇后）添加活力染料，為實驗設計提供了極大的靈活性。

流式檢測參數與儀器兼容性

STYX™ Yellow的激發峰約為402 nm，發射峰約為548 nm，可使用流式細胞儀的AmCyan檢測通道（或對應488 nm激發、525/50 nm接收通道）進行采集。其光譜特性與FITC、PE等常用熒光素重疊極小，非常適合整合入多色（≥8色） 流式方案中，無需占用稀缺的檢測通道資源。

產品規格與儲存條件

為適配不同規模的實驗需求，提供50 Tests、100 Tests及200 Tests三種規格。儲存條件為 -20°C干燥避光保存，有效期為12個月。運輸全程采用冰袋，確保染料活性。請避免反復凍融，建議shou次解凍后分裝保存。

推薦應用場景

本試劑盒適用于小鼠、大鼠、人來源的多種樣本類型，包括但不限于：

• 外周血、脾臟、淋巴結及腫瘤組織的單細胞懸液

• 經體外刺激培養后的T細胞、NK細胞

• 需要進行胞內細胞因子染色（ICS） 或核內轉錄因子（如Foxp3）染色的樣本

• 長期凍存后復蘇的細胞活力回溯檢測

在進行流式上機前，于表面抗體染色孵育的同時加入STYX™ Yellow染料，即可在后續數據分析中輕松排除死細胞干擾，獲得更干凈、更可信的流式數據。

如果您的實驗中死細胞比例較高，或正在構建包含胞內染色的多色流式方案，Elabscience STYX™ 黃色固定化細胞活力檢測試劑盒將幫助您有效排除死細胞帶來的假陽性困擾，讓每一個陽性信號都來自真實的生物學差異。