Lipo3000 （脂質(zhì)體3000）轉(zhuǎn)染試劑，貨號：L3000015，性價比高！

Lipofectamine™3000 轉(zhuǎn)染試劑 貨號：L3000015 簡介：

品牌：Thermo Fisher（Invitrogen）

規(guī)格：1.5 mL試劑盒（包含Lipofectamine™3000脂質(zhì)體試劑 + P3000™增強試劑）

Lipofectamine 3000是基于新一代脂質(zhì)納米顆粒技術(shù)開發(fā)的陽離子脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑，專為哺乳動物細胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染優(yōu)化，搭配配套P3000增強劑，顯著提升核酸遞送效率；同時兼顧低細胞毒性，是實驗室主流通用型脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑。貨號L3000015為小包裝0.1mL規(guī)格，適合小規(guī)模條件摸索、課題組小量實驗使用。

適合細胞種類：

? 常規(guī)易轉(zhuǎn)染細胞系

HEK293、HeLa、Huh7、A549、MCF-7、NIH/3T3、HepG2、C4-2等腫瘤細胞、成纖維細胞

? 傳統(tǒng)難轉(zhuǎn)染細胞

原代上皮細胞、間充質(zhì)干細胞、部分神經(jīng)細胞、iPSC誘導多能干細胞

?? 局限性：懸浮免疫細胞（T細胞、巨噬細胞）轉(zhuǎn)染效果一般；原代神經(jīng)元如需mRNA轉(zhuǎn)染優(yōu)先MessengerMAX。

產(chǎn)品介紹：

1. 套裝組成：Lipofectamine 3000脂質(zhì)體 + P3000™增強劑，二者搭配使用；僅轉(zhuǎn)染siRNA時不需要添加P3000。

2. 儲存條件：2–8℃避光冷藏，禁止冷凍，凍融直接失效。

3. 操作基礎(chǔ)要求：推薦使用Opti-MEM減血清培養(yǎng)基稀釋試劑；轉(zhuǎn)染時培養(yǎng)基盡量不添加雙抗。

4. 適用核酸類型：質(zhì)粒DNA；可兼容siRNA、miRNA，不適合RNP復合物、長鏈mRNA（mRNA推薦MessengerMAX）。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

1. 廣譜高效，難轉(zhuǎn)染細胞表現(xiàn)突出

相比Lipo2000，大量細胞系轉(zhuǎn)染效率顯著提升，很多傳統(tǒng)難轉(zhuǎn)細胞可獲得穩(wěn)定陽性率。

2. 細胞毒性更低

轉(zhuǎn)染后細胞凋亡、漂浮更少，適合轉(zhuǎn)染后長期功能實驗、細胞活力敏感實驗。

3. 實驗重復性穩(wěn)定

脂質(zhì)顆粒均一，批次差異小，條件優(yōu)化后結(jié)果穩(wěn)定可控。

4. 支持共轉(zhuǎn)染

可實現(xiàn)多質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染，適配雙熒光報告、CRISPR質(zhì)粒系統(tǒng)。

5. 方案成熟

全球海量文獻引用，公開優(yōu)化方案多，新手更容易建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染體系。

產(chǎn)品應(yīng)用：

1. 瞬時轉(zhuǎn)染：質(zhì)粒過表達、熒光標記質(zhì)粒（GFP/RFP）、雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?/span>

2. CRISPR/Cas9質(zhì)粒介導基因敲除/敲入

3. 質(zhì)粒+siRNA共轉(zhuǎn)染，基因過表達+干擾聯(lián)合實驗

4. 腫瘤細胞、干細胞基因功能研究

5、蛋白體外表達初步篩選（小規(guī)模293表達）

常見問題：

購買&實驗疑問解答

Q1：L3000015和大包裝L3000150有什么區(qū)別？

A：配方一致；L3000015=0.1mL，適合條件摸索；L3000150=15mL大包裝，適合高通量長期實驗。

Q2：轉(zhuǎn)染必須用Opti-MEM嗎？

A：推薦Opti-MEM；緊急情況下無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基可嘗試，但轉(zhuǎn)染效率大概率下降，不建議長期替代。

Q3：復合物孵育多久？

A：DNA復合物室溫孵育10–15min，不要超過20min，避免脂質(zhì)體團聚。

Q4：轉(zhuǎn)染后什么時候換液？

A：細胞敏感株4–6h更換培養(yǎng)基；耐受強腫瘤細胞可維持過夜，根據(jù)細胞狀態(tài)調(diào)整。

Q5：可以在含血清培養(yǎng)基制備復合物嗎？

A：不可以！血清蛋白會破壞脂質(zhì)-DNA復合物，必須無血清培養(yǎng)基稀釋。

Q6：轉(zhuǎn)染效率很低常見原因？

①質(zhì)粒純度不足、內(nèi)毒素過高；②細胞匯合度不適宜（推薦70%-85%）；③試劑凍存結(jié)冰失效；④DNA與試劑比例未優(yōu)化。

Q7：能否用來轉(zhuǎn)染siRNA？

A：可以，但不加P3000試劑；大規(guī)模RNA干擾實驗優(yōu)先選擇Lipofectamine RNAiMAX。

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