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熒光定量PCR實驗是分子實驗室常用的一項技術。持續關注小翊的應該都掌握了高質量cDNA的獲取方法，引物設計指南以及反應體系的配制技巧（還未get的小伙伴戳文末鏈接），然而上機時，發現和別人的反應條件不一致卻又不敢動儀器？本期小翊將帶你玩轉qPCR儀器的設置！目前市面上的qPCR儀器種類五花八門，但基本上儀器的設置都相對一致。我們以ABI7500為例進行介紹。反應板設置實驗目的選擇：我們將實驗命名為“Yeasen”，進行“Quantitation：ΔΔCt”實驗。實驗方法選擇：如選用SYBRGre
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實驗室常用到的實驗：逆轉錄實驗實驗人員通過體外模擬病毒復制過程，以提取的RNA為模板，使用逆轉錄酶催化，合成出與RNA互補的cDNA鏈。終構建cDNA文庫，并從中篩選所需的靶標基因。BUT！小伙伴們做逆轉錄實驗時，1）有沒有深究過RNA逆轉錄出的cDNA能不能真實反映出基因表達信息？2）做實驗時，有沒有發生過內參做的很好，目的基因做不出的情況？如果有發生上述情況，那么需要重新評估逆轉錄實驗結果的有效性。逆轉錄結果有效性的評定逆轉錄實驗結果有效性的評定重要的是盡可能反映樣本中原始RNA模板的信息，
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HB190313測序數據不好？是不是建庫出了問題？！——從測序數據看文庫構建高通量測序中的文庫構建指的是在DNA兩端連接特定的接頭從而使其符合測序平臺要求的過程，在高通量測序過程中，文庫質量直接影響終測序數據的質量，打個比方，如果文庫上機測序的濃度很低，樣本在FlowCell上擴增所形成的DNA樣本簇就會很少，測序數據量也將減少，這就可能導致測序失敗，所以我們說文庫的質量控制和質量評估也是NGS中的關鍵步驟。文庫如何質控？評估文庫質量的方法有哪些？n文庫質控：文庫在上機之前都有會進行質量檢測，質
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這有一份FFPE樣本建庫的檔案，還不趕緊Pick?什么是FFPE？FFPE（Formalin-FixedａndParrffinEmbedded），即福爾馬林固定石蠟包埋樣本。由于這種處理方法能夠較長時間地保存組織或制備檢驗所需的組織標本，所以在臨床病理檢驗、腫瘤基因檢測中應用廣泛。在世界范圍內，大約有數十億份組織樣品保存在醫院或者組織樣品庫中，其中絕大多數是使用福爾馬林固定石蠟包埋的方法處理的樣品。FFPE樣本通常代表了珍貴且來源廣泛的生物醫學研究材料，為闡明疾病機制、回顧性研究等提供了寶貴的資
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翊圣生物提供高成功率糖尿病建模用STZ：純度≥98%（HPLC測定）。產品名稱貨號規格*（元）Streptozocin鏈脲佐菌素60256ES60100mg156.00Streptozocin鏈脲佐菌素60256ES76500mg386.00Streptozocin鏈脲佐菌素60256ES801g676.00文章包含以下知識點1.STZ誘導糖尿病模型的構建標準SOP2.STZ誘導糖尿病模型建模效果評估指標3.STZ誘導糖尿病模型的失敗原因解析4.STZ誘導小/大鼠死亡率高的原因解析5.糖尿病建模
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什么是DNA甲基化DNA甲基化（DNAmethylation）是DNA化學修飾的一種形式，能夠在不改變DNA序列的前提下改變遺傳表現。DNA甲基化是指在DNA甲基化轉移酶的作用下，在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5'碳位共價鍵結合一個甲基基團。DNA甲基化的結果，一般是使甲基化位點的下游基因表達量變少。圖1：DNA甲基化原理圖為什么研究DNA甲基化DNA甲基化是早發現的基因表觀修飾方式之一，可能存在于所有高等生物中。DNA甲基化在維持細胞正常功能、傳遞基因組印記、胚胎發育、腫瘤發生等方面發揮重要作
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小分子化合物專題一、信號通路信號通路是指當細胞里要發生某種反應時信號從細胞外到細胞內傳遞了一種信息，細胞要根據這種信息來做出反應的現象。信號通路（signalpathway）的提出早可追溯到1972年，不過當時被稱為信號轉換（signaltransmission）。1980年M.Rodbell在一篇綜述中提到信號轉導（signaltransduction），此后該概念就被廣泛使用了。信號通路是指能將細胞外的分子信號經細胞膜傳入細胞內發揮效應的一系列酶促反應通路。這些細胞外的分子信號（稱為配體，l
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新品速遞---“一步法”建庫試劑盒-----HieffNGS®OnePotDNALibraryPrepKitforIllumina®?產品背景：DNA文庫的構建是二代測序前期的核心環節。目前市面上推廣的建庫試劑盒主要有常規建庫試劑盒以及轉座酶法快速建庫試劑盒。常規試劑盒需要購買單獨的片段化模塊或者采用機械法進行片段化，機械法片段化對DNA分子有一定的損傷，影響文庫質量。轉座酶法試劑盒都是針對特定InputDNA量的樣本進行建庫，并且存在一定的偏好性，影響測序質量。HieffNGS®OnePotD
