色譜柱在使用前需用流動相置換出廠溶劑，使用后應及時更換為保存溶劑以避免性能下降。

本文將重點介紹色譜柱的清洗維護方法，包括流動相置換要點及如何保存溶劑選擇等。

如圖1所示，柱內的溶劑通常在使用前、使用中、使用后各不相同，每次都需要置換溶劑。

▼柱內溶劑

圖1

▼要點

① 首先確認溶劑種類

② 用流動相充分置換HPLC設備后，再連接色譜柱

③ 使用緩沖液作為流動相時，請注意鹽類的結晶析出

④ 液體量以柱體積的15～20倍量為參考標準

⑤ 選擇性能良好的洗脫樣品、且對色譜柱無影響的溶劑

⑥ 當使用緩沖液作為流動相時，請注意鹽類的結晶析出

⑦ 通常使用購買色譜柱時封裝在內的溶劑

⑧ 不要使用含鹵素的溶劑作為保存溶劑

⑨ 色譜柱需緊密密封，避免色譜柱干涸

⑩ 注意色譜柱壓力上升

1. 出貨時的封存溶劑/保存溶劑置換流動相

方法

柱內封存的溶劑置換為使用的流動相時，其達到平衡所需的液體量會因填料、色譜柱尺寸、檢測設備、流動相等而異，可大致以柱體積的15～20倍量作為參考。使用離子對色譜法時，平衡所需時間較長。

注意事項

（1）首先，確認柱內封存的溶劑種類。如果溶劑與流動相互不相溶，請先用能與兩者混溶的溶劑置換后，再置換流動相。

　　  請注意色譜柱壓力的上升。

（2）當使用緩沖液等作為流動相時，如果柱內是有機溶劑，可能會產生沉淀或結晶，或導致色譜柱性能下降，因此需要考慮

　　  預先置換為水。

（3）請將HPLC設備內部（管路）用流動相充分置換后，再連接色譜柱。若未充分置換，可能會混入先前使用的流動相導致色

　　  譜柱性能下降。

　　  尤其需要注意進樣器的樣品環、阻尼器和混合器。

2. 流動相置換為保存溶劑、色譜柱的清洗

方法

請使用能充分洗脫樣品且對色譜柱無影響的溶劑等進行清洗并保管。保存溶劑通常使用購買色譜柱時封裝在內的溶劑。

注意事項

（1）使用的流動相置換為清洗液時，請注意兩者的相互混溶性以及色譜柱壓力的上升。

（2）使用緩沖液后，請用蒸餾水沖洗色譜柱以將去除鹽分。若直接使用有機溶劑沖洗，可能產生沉淀或結晶，導致色譜柱性能

        下降。

3. 色譜柱的保存

方法

為防止色譜柱內部產生空隙或裂紋，務必緊密密封，防止干燥。另外，長期保存時，需要每隔1,2個月使液體流通柱內一次，還需要使用具有洗脫能力的溶劑充分清洗柱內，盡可能清除雜質。圖2展示了因長期使用等導致色譜柱被污染時的再生方法、色譜柱的清洗方法。另外，表1展示了長期保存時通用的溶劑。

                              圖2. 按填料分類的色譜柱清洗法

注意事項

（1）請不要使用會侵蝕填料和不銹鋼管、含鹵素等溶劑作為保存溶劑。

（2）頻繁清洗或使用過量清洗液沖洗或縮短色譜柱壽命。

以上，通過規范化的清洗、保存操作，可有效維持色譜柱性能并延長使用壽命。

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