尿蛋白定量測試盒 （CBB法）

【產品簡介】

尿蛋白檢測，所使用的考馬斯亮藍（CBB）方法,是日常實驗常用的蛋白定量檢測手段。健康人體尿液中蛋白濃度極低，普通檢測手段難以檢出；當機體出現病變或生理異常時，尿液蛋白含量會異常升高，即為蛋白尿。游離態的考馬斯亮藍 G250 呈現紅色，在465nm 處為其吸收峰值；該染料與蛋白質相結合后會轉為青藍色，結合復合物的最大吸收波長偏移至 595nm。顯色深淺和蛋白含量成正比，據此可完成定量分析。本試劑盒同樣適用于血清、血漿、組織及細胞樣本的蛋白含量測定。

【檢測原理】

酸性環境下，考馬斯亮藍 G-250 染料存在棕紅色游離形態，與尿液中蛋白質堿性氨基酸殘基特異性結合后，空間結構發生改變，轉變為藍色絡合物。該結合產物在 595nm 波長處具備最大光吸收峰值，吸光度數值與蛋白濃度呈良好線性正比關系。通過分光光度計測定吸光度，對照標準曲線即可精準換算出尿液樣本中的蛋白含量，實現定量檢測。

【樣本準備】新鮮尿液 2000 r/min 離心 5 min，吸取上清待測。樣本含量過低時可適當加大取樣量（如上樣 20ul ，同時標準品應稀釋 2 倍后和樣本量體積一致，計算時標準品濃度除以相應的稀釋倍數后再代入計算），而 CBB 應用液量不變。

【測定步驟】

(1) 按照下圖所示，取96孔板，用 10 μL 不同濃度的雙蒸水，標準液，尿液樣本，加入到對應的孔中。

(2) 再加入250ul CBB應用液到對應的孔中。 

(3) 酶標儀上振蕩 10 s，室溫靜置 10 min，595 nm，測各孔的 OD 值。

【注意事項】

1. 測定管 OD 值過高時（測定 OD 減去空白 OD 后的差值比標準 OD 減空白 OD 的差值的 2 倍還大的）要將樣 本用生理鹽水作一定稀釋后（稀釋后選擇測定 OD 值接近標準 OD 值對應的稀釋倍數）再測。

2. 實驗前請仔細閱讀說明書并調整好儀器，嚴格按照說明書進行實驗。

3. 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。

【運輸儲存】
冰袋運輸，按照標簽分別于2-8度和-20度儲存，有效期 3 個月。

尿蛋白定量測試盒 （CBB法）