小鼠原代淚道上皮細胞，499/株

特點：貼壁生長 上皮細胞樣、不規則細胞樣 基礎培養基500ml；生長添加劑5ml；胎牛血清50ml；雙抗5ml

特性：僅限于科學研究，不可作為動物或人類疾病的治療產品使用。

優勢：提供免疫熒光鑒定報告

貼壁細胞接收后的處理：

1. 收到細胞后 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-4h ，若發現培養瓶破損 、有液溢出及細胞有污染 ，請拍照后及時聯系我們

2. 靜置完成后 ，請在顯微鏡下確認細胞狀態 ， 同時給剛收到的細胞拍照(10x ， 20x)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存 ，作為售后時收到時細胞狀態的依據 。

3. 貼壁細胞:細胞在379C培養箱中放置2-3h ，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況 ，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況 。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下 ，可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收 ，重懸打入到原培養瓶中)加入新配制的培養基6-8mL ，放到細胞培養箱中繼續培養 。若細胞生長密度達70%-80%以上 ，可以對細胞進行傳代處理 。傳代過程中 ，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收 。

備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的培養基來培養細胞 。收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。

細胞復蘇

貼壁細胞的復蘇 、傳代 、凍存步驟

1. 貼壁細胞復蘇:從液氮灌中或-80℃C冰箱中查找到需要復蘇的細胞 ，水浴鍋提前打開預熱 37℃℃1)將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍;

2.加入到含4-6mL培養基的離心管中混合均勻 。

3.棄去上清液 ，培養基重懸細胞 。然后將細胞懸液加入含6-8m!培養基接種于T25 培養瓶中(或6cm 皿中) ，培養過夜 ，第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度 

4. 貼壁細胞傳代:如果細胞密度達80%-90% ，即可進行傳代培養

5.棄去培養上清 ，用不含鈣 、鎂離子的PBS 潤洗細胞 1-2 次;

6.加 1-2mL 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中 ，置于 37°℃培養箱中消化2-3min ，然后在顯微鏡    下觀察細胞消化情況 ，若細胞大部分變圓并脫落 ，迅速拿回操作臺 ，輕敲幾下培養瓶后 ，加5ml以上含10%血清的

培養基終止消化;3)輕輕吹打細胞 ，脫落后吸出至離心管中 ， 1000rpm離心3-5min ，棄去上清液 ，補加1-2mL培養基后吹勻;4)按 5-6mL/瓶補加培養基 ，將細胞懸液按 1:2到 1:3的比例分到新的含 6-8mL培養基的培

養皿中或者培養瓶中 。

7. (傳代兩個T25或者兩個6cm的皿)

貼壁細胞凍存:

1.細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中 ，可使用血球計數板計數 ，來決定細胞的 凍存密度 。一般細胞的推薦凍存密度為1x10 6~1x107個活細胞/ml;

2.1000rpm離心3-5min ，去掉上清 。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1m(凍存液含1x10^6~1x107個活細 胞/ml分配到-個凍存管中將細胞分配到凍存管中 ，標注好名稱 、代數 、 日期等信息;

1. 按凍存數量加入無血清凍存波后直接放-80℃冰箱過夜 ，后續可轉入液氨罐中長期保存 。

細胞接收注意事項：

1：觀察有無破損漏液情況 ，如有請拍照及時聯系客服。

2 ：酒精消毒培養瓶表面后顯微鏡下觀察細胞狀態 ，觀察拍照后不用打開培養瓶蓋 ，放入培養箱靜止2- 3小時穩定細胞狀態。

3 ：請按照細胞操作指南進行第一次傳代凍存處理。

4 ：產品隨貨會附帶細胞說明書、細胞培養操作指南、STR 鑒定、支原體檢測報告。

5 ：若產品有異常或其他疑問 ，可隨時聯系客服

6.收到后 ，培養條件(完培配置)需跟保持一致 ，如有變動銷售另行告知

僅限于科學研究 ，不可作為動物或人類疾病的治療產品使用。

小鼠原代淚道上皮細胞，499/株

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