當下生命科學研究早已告別批量測序的 “平均表達" 時代，空間轉錄組、單細胞原位分析成為頂刊持續(xù)追捧的核心熱點。《Nature》《Cell》《Cancer Cell》等高分期刊中，解析 RNA 分子在組織原位的空間分布與表達豐度，已成為研究腫瘤異質性、免疫微環(huán)境、神經發(fā)育的核心手段。而熒光原位雜交（FISH）作為 RNA 原位檢測的經典技術，長期面臨靈敏度不足、特異性差、多靶標檢測難等痛點。

愛必信 GeneScope 多色單分子 RNA 原位檢測體系，以創(chuàng)新的探針設計與滾環(huán)擴增（RCA）技術為核心，突破傳統(tǒng) FISH 的性能瓶頸，實現(xiàn)單拷貝級 RNA 的精準原位檢測，覆蓋腫瘤、神經、免疫、發(fā)育等全研究場景。

一、GeneScope 核心技術原理 —— 單分子級的 RNA 原位解碼

GeneScope 是基于滾環(huán)擴增技術打造的多色熒光核酸原位檢測平臺，通過特異性探針靶向結合、原位滾環(huán)擴增信號放大、多色熒光探針標記，在完整保留組織空間結構的前提下，實現(xiàn)對目標 RNA 的定性、定位、定量一體化檢測。

【圖 1 GeneScope 技術原理示意圖】

1. 雙鏈接探針特異性雜交
針對目標 RNA 序列設計多對雙鏈接探針（DLPs），每對探針精準結合靶標的不同區(qū)段。只有當多對探針同時結合于同一個 RNA 分子時，才能環(huán)化形成完整的滾環(huán)擴增模板，從設計源頭大幅降低非特異性結合，保障檢測的高特異性。

2. 滾環(huán)擴增（RCA）原位信號放大
依托恒溫滾環(huán)擴增反應，在單個 RNA 位點原位生成數百個串聯(lián)重復的互補序列單元，實現(xiàn)核酸層面的信號百倍級擴增。擴增產物錨定在靶標 RNA 原位，無擴散偏移，保證空間定位的精準性。

3. 多色熒光探針同步標記
針對不同靶基因的擴增產物，搭配標記有不同熒光基團的特異性檢測探針，通過一次雜交反應即可同步結合對應靶標的擴增序列，實現(xiàn)單張切片上多靶標的同步檢測。

4. 單分子精準定量
每個獨立熒光斑點對應單個 RNA 分子，結合高分辨率熒光顯微鏡與專業(yè)分析軟件，可對細胞 / 組織內的 RNA 進行精準計數與空間定位，實現(xiàn)真正的單分子絕對定量。

二、GeneScope 核心技術優(yōu)勢 —— 突破傳統(tǒng)原位雜交的性能邊界

相較于傳統(tǒng) FISH 技術，GeneScope 在靈敏度、特異性、檢測通量與實驗效率上實現(xiàn)全面升級，解決科研中的各類痛點：

核心優(yōu)勢總結：

• 超高靈敏度：穩(wěn)定檢測單拷貝靶標，解決低豐度基因、稀有轉錄本檢測難題

• 特異性：多探針協(xié)同驗證機制，有效降低背景噪音，信號真實可靠

• 高效多色檢測：單張切片實現(xiàn) 4 靶標同步共定位，一次雜交完成，節(jié)省珍貴臨床樣本

• 精準空間定位：RCA 擴增產物原位錨定，無信號擴散，空間定位精度更高

• 多技術兼容：兼容 mIHC、免疫熒光等技術，支持 RNA - 蛋白多組學聯(lián)檢

三、全維度探針體系 —— 覆蓋多元研究需求

探針是原位雜交技術的核心，愛必信為 GeneScope 平臺試劑盒配套1-4個靶基因的特異性探針，及對應種屬（人，大小鼠）的陰陽性探針，全面適配各類研究場景，助力快速啟動實驗，得到高質量結果。

1. 探針設計與標記規(guī)范
所有探針均基于 RefSeq 等數據庫序列進行專業(yè)化設計，嚴格規(guī)避同源序列、重復序列與高可變區(qū)，針對每個靶標篩選探針組合。每款探針均經過實驗驗證，確保雜交效率高、背景噪音低、特異性強。

熒光標記默認從 Alexa Fluor 488、Cy3、Texas Red、Cy5 中選擇，推薦搭配規(guī)則：

• 單個 RNA 靶標默認使用 Cy3 標記

• 2 個 RNA 靶標默認使用 Alexa Fluor 488、Cy3 標記

• 3 個 RNA 靶標默認使用 Alexa Fluor 488、Cy3 和 Cy5 標記

• 4 個 RNA 靶標默認使用 Alexa Fluor 488、Cy3、Texas Red 和 Cy5 標記

針對人、大小鼠樣本，試劑盒默認配套陰陽對照探針（陰性探針 dapB 默認 Alexa Fluor 488 標記，陽性探針 UBC 默認 Cy3 標記）；其他物種可按需定制陽性對照探針。

2. 探針覆蓋類型

• 編碼 RNA：各類 mRNA、pre-mRNA，覆蓋腫瘤、免疫、神經等領域熱門靶標

• 非編碼 RNA：lncRNA、miRNA、circRNA 等，支持非編碼 RNA 的空間功能研究

• 特殊轉錄本：融合基因、可變剪接體、單堿基突變位點等，適配精準分子檢測

• 病原體核酸：病毒、細菌等微生物核酸檢測，支持感染免疫相關研究

3. 靈活的服務模式

• 現(xiàn)貨探針：覆蓋人、小鼠、大鼠等主流物種的數百種熱門靶標，即買即用，快速啟動實驗

• 定制探針：支持任意物種、任意靶標的個性化探針定制，可靈活選擇熒光標記，快速交付，滿足個性化研究需求

【圖 2 GeneScope 試劑盒贈送陽性（UBC）及陰性（dapB）探針檢測結果】

四、核心應用場景 —— 從體外細胞到臨床樣本的全場景覆蓋

1. 腫瘤異質性與生物標志物研究
腫瘤組織的空間異質性是精準診療的核心挑戰(zhàn)，不同區(qū)域的腫瘤細胞基因表達差異直接影響藥物響應與預后。GeneScope 可在石蠟 / 冰凍腫瘤切片中原位檢測致癌基因、耐藥基因、融合基因的表達分布，精準區(qū)分腫瘤細胞與微環(huán)境細胞的表達特征，為腫瘤分型、靶點驗證與預后評估提供核心依據。

核心應用：

• 腫瘤驅動基因與耐藥基因的原位表達分析

• 融合基因、可變剪接體的組織水平鑒定

• 腫瘤生物標志物的空間分布與定量分析

【圖 3 GeneScope 檢測HER2在乳腺癌FFPE樣本中的表達比較】

2. 神經科學空間表達圖譜研究
神經系統(tǒng)的功能高度依賴細胞的空間排布與基因的時序表達。GeneScope 可對腦組織切片中神經遞質受體、發(fā)育調控基因、神經退行性疾病相關基因進行精準原位定位，解析神經環(huán)路的分子基礎與疾病發(fā)生機制，是繪制腦空間轉錄圖譜的核心工具。

核心應用：

• 不同腦區(qū)基因表達的空間分布分析

• 神經元亞型的分子鑒定與分類

• 神經發(fā)育過程中基因的時空動態(tài)追蹤

【圖 4 GeneScope 檢測小鼠小腦中的Gad1與Calb1表達】

3. 發(fā)育生物學時空表達分析
胚胎發(fā)育過程中，關鍵調控基因的時空表達模式決定了細胞分化與器官發(fā)生。GeneScope 可對不同發(fā)育階段的胚胎組織切片進行檢測，精準追蹤發(fā)育關鍵基因的表達動態(tài)，解析器官發(fā)生的分子調控機制。

核心應用：

• 胚胎發(fā)育基因的時空表達模式分析

• 器官發(fā)生過程中的細胞分化軌跡研究

• 發(fā)育相關疾病的分子機制探究

【圖 5 GeneScope 檢測斑馬魚胚胎中的發(fā)育相關mRNA表達】

4. 稀有轉錄本檢測
對于融合基因、環(huán)狀 RNA、低豐度 lncRNA 等傳統(tǒng)方法難以穩(wěn)定檢測的稀有轉錄本，GeneScope 憑借單分子級的超高靈敏度，可實現(xiàn)精準檢出與原位定位，為疾病分子標志物挖掘、非編碼 RNA 功能研究提供有力技術支撐。

【圖 6 GeneScope 檢測miRNA—miR-21-5p高表達，miR-25-3p不表達】