通用型組織解離液-單細胞樣本制備標準protocol

一、實驗前準備-全套試劑耗材

組織樣本處理全套試劑耗材實拍圖：

配套產品清單：

• PBS緩沖液 abs961、abs962

• 70μm篩網 abs7232

• RPMI1640培養基 abs9484

• 紅細胞裂解液 abs9101

• 細胞分離液 abs9102

• 組織解離液 abs9482（核心產品）

二、樣本取材及預處理

操作說明：小鼠斷頸處死后，根據實驗需求進行取材，可分離取材部位包含：結腸、脾臟、腸道組織、肺組織等各類小鼠臟器。

三、標準化組織解離步驟參考

1、組織消化解離

1. 酶消化：將組織塊（約100-200mg）轉移至離心管，加入 1 mL 組織解離液abs9482（難消化組織可延長孵育時間）。

2. 搖床孵育：將離心管置于 37℃恒溫水平搖床，以 80-100 rpm 的轉速孵育 30-40分鐘。【也可使用全自動組織處理器替代手動搖床】

3. 過濾過篩：70μm 細胞篩網（abs7232）過濾，預冷 1×PBS 3-5mL 沖洗篩網；
   注：過濾篩網時若殘留明顯組織塊，可用5 mL注射器活塞研磨組織，直至無肉眼可見組織碎片。

4. 細胞懸液 4℃，400 g 離心5 min，棄去上清；

5. 細胞沉淀使用預冷1x PBS（abs962）重懸，4℃，400 g 離心5 min，棄去上清；

6. 可選步驟：根據實驗需求，使用紅細胞裂解液（abs9101）去除樣本內紅細胞干擾；

7. 適量預冷1x PBS重懸細胞沉淀，得到純凈單細胞懸液，可直接用于后續流式、細胞分選等實驗。

2、細胞計數，活率測定

使用本解離液解離小鼠不同組織制備單細胞懸液后，可通過流式細胞儀檢測細胞活率，不同臟器樣本均能獲得高活率單細胞。

5、流式結果展示

小鼠脾臟組織單細胞懸液流式染色結果

小鼠肺臟組織單細胞懸液流式染色結果

小鼠肝臟組織單細胞懸液流式染色結果

小鼠小腸組織單細胞懸液流式染色結果

小鼠腎臟組織單細胞懸液流式染色結果

小鼠心臟組織單細胞懸液流式染色結果

四、通用型組織解離液-abs9482 已發表文獻匯總

配套完整試劑耗材產品清單