研究使用非損傷微測技術（MIFE）測定卵母細胞質膜的凈離子流速，結果表明，注射GmSALT3的卵母細胞與注射H₂O的卵母細胞相比，Na⁺、K⁺和Cl^-的外排減少（圖1）。

圖1. 爪蟾卵母細胞質膜的Na⁺、K⁺、Cl^-吸收速率。正值表示吸收，負值表示外排。

其他實驗結果

• 表達GmSALT3全長使大腸桿菌中K⁺含量增加，GmSALT3-YFP、GmSALT3_TM10、AtKAT1和AtCHX20的表達也增加。
• GmSALT3-YFP在卵母細胞中定位到PM。
• 雙電極電壓鉗電生理學顯示，在ND96培養基中培養時，注入GmSALT3的卵母細胞的靜息膜電位與注入H₂O的卵母細胞相比更正，但沒有發現一致的電流差異，這表明通過GmSALT3的運輸可能是電中性的。
• 與注射H₂O的卵母細胞相比，注射GmSALT3的卵母細胞含有更多的K⁺、Na⁺和Cl^-。
• GmSALT3會影響K⁺、Na⁺和Cl^-在卵母細胞中跨PM的運輸。
• 使用100 mM NaCl處理發現，NIL-S地上部分、莖和葉中的Cl^-、K⁺含量更高，K⁺/Na⁺比卻降低了，NIL-T葉片中的K⁺/Na⁺比在脅迫第3 d后才明顯升高。
• 鹽處理10 d后，NIL-T的根、莖、葉干重明顯增加。
• 100 mM NaCl處理4 d后發現，Na⁺、Cl^-在NIL-S的所有氣生組織中積累得更多。
• 在根部（主根和側根），NIL-T比NIL-S積累的Cl^-多。
• 100 mM NaCl處理4 d后，檢測大豆莖韌皮部和木質部汁液中的離子濃度。與NIL-T相比，NIL-S的木質部汁液中的Na⁺濃度明顯更高。與葉片的數據相反，NIL-S的木質部和韌皮部汁液中的Cl^-濃度比NIL-T低。
• 對交互嫁接和自嫁接（self-grafted，對照）的植株進行100 mM NaCl處理8 d，結果發現在NIL-S砧木上嫁接NIL-T接穗，葉片Cl^-含量比自嫁接NIL-S低。相反，當NIL-S接穗嫁接到NIL-T砧木上時，葉片中Cl^-含量與自嫁接NIL-S相比差異不顯著。與自接NIL-T植株相比，自接NIL-S植株的Cl^-含量要高得多。
• TEM（透射電子顯微鏡）成像觀察NIL-T和NIL-S韌皮部的超微結構，發現鹽處理后的NIL-T和NIL-S在根系韌皮部細胞中的形態沒有差異差異，表明缺乏全長GmSALT3不會破壞亞細胞形態，離子流速的變化更可能是GmSALT3誘導排鹽的直接原因。

結論
綜上所述，本工作對GmSALT3在植物體內和異源系統中的耐鹽機制提供了進一步的認識。研究認為，在NIL-T中，全長GmSALT3通過限制Na⁺在木質部的裝載介導Na⁺和Cl^-從地上部分排出，而Cl^-則通過韌皮部從地上部分重新轉移回根。這是第一次發現一種蛋白質能促進植物韌皮部的Cl^-再循環，并使植物具有更好的耐鹽性。本研究的數據還表明，GmSALT3是一個具有運輸能力的內膜定位蛋白，但還不能說明GmSALT3通過不同細胞類型來改變不同轉運過程的確切的細胞機制，這需要進一步研究。利用NIL-T和NIL-S植物進行RNA測序，可能有助于研究GmSALT3是否通過影響轉錄而賦予大豆耐鹽性，以及在鹽脅迫條件下， NIL-T和NIL-S的根部有哪些*的途徑和基因可能發生明顯變化。

測試液

5 mM NaCl, 0.2 mM KCl, 0.2 mM CaCl₂, 5 mM HEPES, pH 7.5

關鍵詞：鹽耐受；非生物脅迫；大豆；GmSALT3；CHX；離子轉運體；地上部分外排