Agilent Seahorse XF技術簡介
一.細胞能量代謝簡述
哺乳動物細胞有兩條關鍵的能量代謝通路,即有氧呼吸和糖酵解。有氧呼吸主要在線粒體中進行,該過程消耗氧氣驅動細胞將營養底物(糖、脂、蛋白質)氧化分解并釋放出能量合成大量ATP,因此線粒體又被稱為細胞的“能量工廠"。糖酵解發生在細胞胞漿中,是一種無氧分解過程,主要將葡萄糖分解成乳酸并產生少量ATP。糖酵解和氧化磷酸化是細胞中兩條關鍵的能量產生途徑。大多數細胞具有在這兩條途徑之間切換的能力,從而適應環境的變化。
二.測量細胞能量代謝的重要性
“人是鐵,飯是鋼,細胞活動需能量",能量代謝驅動細胞功能,在各種關鍵的細胞 過程中發揮重要作用,多個領域的科學家正在應用XF技術檢測細胞代謝研究相關功能,包括癌癥、免疫學、肥胖、免疫腫瘤學、藥物研發或篩選、糖尿病、干細胞、心血管功 能、神經退行性疾病、病毒學和衰老等。
癌癥研究人員將氧化磷酸化到糖酵解的代謝轉換視為癌癥的標志;免疫學研究人員將代謝重編程確定為固有免疫的關鍵標志;肥胖、糖尿病和代謝紊亂則與不同細胞代謝表型相關聯;干細胞研究可利用XF技術來改善干細胞科學各方面的效率和結果;神經生物學研究人員發現代謝轉換與神經退行性疾病之間存在很強的相關性……
三.Agilent Seahorse XF能量代謝檢測技術簡介
XF技術是依托SeahorseXF能量代謝檢測系統,利用設計的非侵入、無標記式傳感器,同時、實時測量活細胞的兩條能量代謝通路,量化細胞代謝表型,從而分析細胞功能的變化。XF技術通過測定氧氣消耗速率(OxygenConsumptionRate,OCR)來反映細胞線粒體的功能,通過測定細胞外酸化速率(ExtraCellularAcidificationRate,ECAR)來反映糖酵解功能。
目前,安捷倫提供3種XF分析系統,分別是XFe96分析儀(96孔形式)、XFe24分析儀(24孔形式)、XFp分析儀(8孔形式),三款儀器均可檢測貼壁細胞、懸浮細胞和分離線粒體的能量代謝。其中,XFe96分析儀可使用SeahorseXF細胞球體板檢測3D細胞球的能量代謝;XFe24分析儀可使用Seahorse XF胰島捕獲微孔板檢測組織類樣本(如胰島、腦組織、骨骼肌、脂肪組織、斑馬魚胚胎、線蟲、果蠅等等)的能量代謝;
因此,可選擇合適的平臺滿足特定的科研需求。
此外,安捷倫還提供了經過校驗及質量驗證的各類試劑盒與試劑,滿足細胞代謝的 測量,下面內容列出了兩種常用試劑盒的原理(其他試劑盒請參考試劑盒用戶指南)
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