產品概述
本品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊源多克隆抗體(貨號:A80-129P),特異性靶向人血清白蛋白(Human Albumin)。經DEAE離子交換層析純化獲得IgG組分,以完整IgG形式提供,適用于雙擴散(DD)和免疫電泳(IEP)等沉淀性凝膠反應。本品經驗證可特異性識別人源白蛋白,與其他血清蛋白無交叉反應,為臨床檢驗和免疫學分析提供了可靠工具。
靶點背景:人血清白蛋白的生理功能
人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA)是血漿中含量豐富的蛋白質,由肝細胞合成,具有多重生理功能。
別名: HSA、PRO0883、PRO0903、PRO1341
主要功能:
pH維持:作為血漿中最重要的緩沖物質,參與酸堿平衡調節
物質轉運:結合并運輸多種內源性和外源性化合物,包括脂肪酸、氨基酸、激素、膽紅素、鈣離子及多種藥物
膠體滲透壓調節:通過結合水分子,維持血管內外滲透壓平衡,防止血漿外滲
抗氧化作用:含有游離巰基,可捕獲活性氧自由基
臨床意義: 血清白蛋白水平降低常見于肝功能不全、腎病綜合征、營養不良及炎癥狀態,是臨床重要的生化檢測指標。
抗體特性規格
參數 規格
靶點 人血清白蛋白
宿主 山羊
克隆性 多克隆
形式 完整IgG
同種型 IgG
偶聯物 非偶聯
純度 IgG組分(DEAE純化)
抗原物種 人
反應性 人(經驗證)
免疫原與生產流程:
免疫原:從血清或血漿來源純化的人白蛋白
免疫動物:山羊
純化方法:抗血清經分級沉淀后,通過DEAE離子交換層析獲得IgG組分
質控數據:
經免疫電泳驗證,該抗血清特異性識別人白蛋白
與其他血清蛋白無交叉反應(未檢測到抗體)
儲存與穩定性
儲存溫度:2-8°C(請勿冷凍)
有效期:自收貨之日起2年(較常規抗體有效期更長)
緩沖液:磷酸鹽緩沖液(PBS),含0.09%疊氮鈉
> 注意:疊氮鈉作為防腐劑。本品有效期為2年,建議在有效期內使用,避免反復開啟導致污染或活性下降。
應用方法與實驗條件
適用技術平臺
本產品專門設計用于沉淀性凝膠反應,主要包括以下三種技術:
應用 推薦稀釋度 說明
雙擴散(DD,Ouchterlony) 原液(Neat) 適用于抗原-抗體在瓊脂糖凝膠中的雙向往擴散形成沉淀線
免疫電泳(IEP) 原液(Neat) 結合電泳分離與免疫沉淀,鑒定抗原成分
免疫固定電泳(IFE) 需自行優化 雖未明確列出,但同類產品常用于IFE
重要提示:
上述應用并非全部經過生產廠商實驗室的專門測試
最佳工作稀釋度應由研究者根據具體實驗體系進行優化
推薦以原液(未稀釋)作為起始濃度,若沉淀線過強或出現非特異性,可嘗試適當稀釋(如1:2或1:4)
雙擴散(Ouchterlony)實驗要點
原理:抗原和抗體在瓊脂糖凝膠中各自從孔中向外擴散,在濃度比例合適處形成可見的白色沉淀線。
操作建議:
制備1%瓊脂糖凝膠(溶于PBS或巴b妥緩沖液)
打孔:中心孔加抗體(原液),周圍孔加倍比稀釋的抗原(人血清或純化白蛋白)
濕盒中室溫孵育24-48小時
觀察沉淀線形成,可用考馬斯亮藍染色增強可見度
陽性對照:正常人血清(稀釋1:2-1:8)或純化人白蛋白(0.1-1 mg/ml)
陰性對照:其他物種血清(如牛血清白蛋白),應無沉淀線
免疫電泳(IEP)實驗要點
原理:先將抗原樣本進行瓊脂糖凝膠電泳分離,然后在電泳槽側槽加入抗體,通過雙向擴散形成弧形沉淀線。
操作建議:
在瓊脂糖凝膠板上打孔,加入待測樣本(如人血清)
進行電泳(恒壓,約10 V/cm,時間40-60分鐘)
電泳后,在凝膠兩側的槽中加入抗體(原液)
濕盒中室溫擴散24-48小時
觀察沉淀弧,可染色保存
結果判讀:白蛋白因分子量較小、電荷較高,遷移速率最快,應在陽極近端形成單一、致密的沉淀弧。
其他潛在應用
雖然本產品主要設計用于沉淀反應,但高純度的抗人白蛋白IgG也可用于以下場景(需自行驗證):
免疫比濁法(檢測血清白蛋白濃度)
蛋白質印跡(WB)——但需注意沉淀反應抗體未必適合WB,建議先進行預實驗
免疫親和層析(制備去除白蛋白的血清樣本)
相關產品推薦
抗人白蛋白HRP偶聯抗體——用于WB或ELISA檢測
正常山羊血清——用于封閉非特異性結合
瓊脂糖(Agarose)——制備凝膠擴散板
b比妥緩沖液(Barbital buffer)——用于免疫電泳的電泳緩沖液
考馬斯亮藍染色液——用于沉淀線染色和保存
研究及臨床檢驗應用場景
本抗體適用于以下領域:
臨床免疫學檢驗:用于免疫電泳或免疫固定電泳鑒定M蛋白血癥患者血清中的白蛋白異常(如雙白蛋白血癥、無白蛋白血癥等)
抗原-抗體系統教學:雙擴散和免疫電泳是經典的免疫學實驗技術,本產品可作為演示抗原抗體反應的標準化試劑
免疫化學質量控制:作為已知特異性抗體,用于驗證實驗室的瓊脂糖凝膠擴散技術及結果判讀能力
去除血清白蛋白:利用本品偶聯至固相載體(如Sepharose),制備免疫親和層析柱,用于從血清樣本中去除高豐度白蛋白,富集低豐度蛋白
免疫比濁法開發:用于建立或驗證血清白蛋白定量檢測試劑盒的標準品和質控品
白蛋白結合研究:通過免疫沉淀研究白蛋白與藥物或其他小分子化合物的結合特性
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