產品概述

本品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊源多克隆抗體（貨號：A90-131A），特異性靶向小鼠IgG的Fc片段。經抗原親和純化及固相吸附處理，確保對小鼠IgG重鏈Fc區的特異性識別，與輕鏈（Fab）及IgA、IgM的交叉反應可忽略不計。以完整IgG形式提供，適用于酶聯免疫吸附測定（ELISA）、免疫細胞化學（ICC）、免疫組織化學（IHC）和蛋白質印跡（WB）等檢測平臺。本品濃度為1 mg/ml，是免疫檢測體系中理想的一抗或二抗替代工具。

靶點背景：小鼠IgG與Fc片段的功能意義

IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，在體液免疫應答中發揮核心作用。其分子結構由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，可酶解為Fab片段（抗原結合）和Fc片段（效應功能）。

Fc片段的生物學功能：

與Fc受體結合，介導調理吞噬、抗體依賴的細胞介導的細胞毒性（ADCC）

激活補體經典途徑（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3亞型）

決定抗體在體內的半衰期（通過與FcRn受體的結合）

抗Fc抗體的應用價值：

特異性識別IgG重鏈恒定區，不識別輕鏈或Fab區

適用于檢測變性條件下（WB）的IgG分子

可區分完整IgG與游離輕鏈或Fab片段

在多重染色實驗中，可配合Fab特異性二抗使用，避免交叉識別

抗體特性規格

參數 規格

靶點 小鼠IgG-Fc片段

宿主 山羊

克隆性 多克隆

形式 完整IgG

同種型 IgG

偶聯物 非偶聯

純度 抗原親和純化

濃度 1 mg/ml

抗原物種 小鼠

反應性 小鼠（經驗證）

特異性驗證：

經免疫電泳和ELISA驗證，該抗體特異性識別小鼠IgG

與小鼠IgA、IgM的交叉反應可忽略不計

可能與其他物種的IgG發生交叉反應（需預實驗驗證）

儲存與穩定性

儲存溫度：2-8°C（請勿冷凍）

有效期：自收貨之日起2年（較常規抗體更長）

緩沖液：磷酸鹽緩沖液（PBS），含0.09%疊氮鈉

> 注意：疊氮鈉作為防腐劑。本品有效期為2年，請勿冷凍。若需長期保存，可考慮分裝后-80°C冷凍，但反復凍融會影響活性。原廠建議2-8°C保存即可滿足2年穩定性。

應用方法與實驗條件

適用技術平臺與推薦稀釋度

應用 推薦稀釋度 說明

ELISA 1:1000 - 1:30,000 包被板用：1:100 - 1:500

免疫細胞化學（ICC） 1:200 - 1:2,000 適用于細胞爬片或培養細胞染色

免疫組織化學（IHC） 1:200 - 1:2,000 適用于冷凍切片或FFPE切片

蛋白質印跡（WB） 1:1000 - 1:30,000 檢測膜上小鼠IgG（變性/還原條件）

重要提示：

并非所有列出的應用均經過生產廠商實驗室的專門測試，建議使用者在實驗前進行預實驗優化。

上述稀釋度范圍為通用指南，具體最佳稀釋度需根據樣本豐度、檢測體系（化學發光、顯色或熒光）自行確定。

蛋白質印跡（WB）詳細指南

原理：本抗體識別變性/還原條件下的小鼠IgG重鏈（Fc部分），適用于檢測免疫沉淀中的小鼠一抗、小鼠血清樣本或小鼠單克隆抗體的表達。

推薦流程：

一抗稀釋：1:1000 - 1:30,000（建議從中值1:10,000開始）

封閉液：5%脫脂牛奶-TBST或3% BSA-TBST

一抗孵育：4°C過夜或室溫2小時

二抗：使用HRP標記的抗山羊IgG二抗（如免抗山羊-HRP）

檢測：化學發光或顯色底物

預期條帶：

還原條件下：小鼠IgG重鏈約55 kDa，輕鏈約25 kDa（本抗體僅識別重鏈）

非還原條件下：完整IgG約150 kDa

注意：若用于檢測IP產物中的小鼠IgG一抗（重鏈），本抗體可直接識別重鏈，無需使用輕鏈特異性二抗來避免干擾。但若需同時檢測目標蛋白（與一抗同物種），仍需注意信號疊加。

ELISA詳細指南

兩種使用模式：

1. 作為檢測抗體（夾心ELISA中檢測小鼠IgG）：

稀釋度：1:1000 - 1:30,000

配合HRP標記的抗山羊IgG二抗使用，或使用本抗體直接標記HRP（但本產品為非偶聯型）

2. 作為包被抗體（捕獲小鼠IgG）：

稀釋度：1:100 - 1:500

用碳酸鹽包被緩沖液（pH 9.6）稀釋，4°C過夜包被

質控建議：使用已知濃度的小鼠IgG標準品建立標準曲線，確定本抗體的最佳工作稀釋度。

免疫組織化學（IHC）與免疫細胞化學（ICC）

原理：用于檢測組織切片或細胞樣本中內源性小鼠IgG（如漿細胞、免疫復合物沉積）或外源性注射的小鼠抗體。

稀釋范圍：1:200 - 1:2,000

樣本處理：

IHC：福爾馬林固定、石蠟包埋（FFPE）組織切片需進行抗原修復（推薦檸檬酸緩沖液pH 6.0或EDTA緩沖液pH 8.0），冷凍切片無需修復。

ICC：細胞爬片經4%甲醛固定后，需用0.1-0.5% Triton X-100透化。

檢測系統：使用HRP/AP標記的抗山羊IgG二抗，配合DAB或AEC顯色；或使用熒光標記二抗進行免疫熒光。

陽性對照：小鼠脾臟或淋巴結組織切片（含有漿細胞）或已知注射了小鼠抗體的小鼠組織。

物種交叉反應性說明

本品針對小鼠IgG-Fc制備，經ELISA驗證與小鼠IgA、IgM無顯著交叉。但由于Fc區在不同物種免疫球蛋白之間存在同源性，本抗體可能與其他物種的IgG發生交叉反應，包括但不限于：

大鼠IgG

兔IgG（部分）

人IgG（部分，尤其是IgG亞類）

牛IgG

建議：若用于非小鼠樣本，務必設置適當的陰性對照（如不加入一抗、使用同型對照或使用預吸附抗體）。對于需要高物種特異性的實驗（如檢測人樣本中的小鼠抗體），建議選擇經過專門吸附的交叉反應更低的二抗。

本品為山羊源親和純化多克隆抗體，以Fc片段特異性和長達2年的穩定期為突出優勢，適用于WB、ELISA、IHC和ICC四大應用平臺。其廣譜的稀釋范圍和可忽略的IgA/IgM交叉反應，使其成為檢測小鼠IgG的理想工具。建議使用者根據具體實驗體系優化稀釋度，并注意物種交叉反應的可能性。若需要用于人源樣本，建議使用經過人血清蛋白吸附的版本，或通過預實驗確認無背景。