產品概述

本品為艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊源抗SA2（Stromal Antigen 2）多克隆抗體（貨號：A300-158A），經表位特異性親和純化，以未標記形式提供。SA2是黏連蛋白復合物的核心組分，在姐妹染色單體粘連、染色體正確分離及轉錄調控中發揮關鍵作用。本抗體識別人和小鼠SA2蛋白，適用于免疫細胞化學和免疫印跡檢測，是細胞分裂、表觀遺傳調控及癌癥相關研究的可靠工具。

基本規格參數

參數 具體信息

靶標 SA2（Stromal Antigen 2）

反應種屬 小鼠、人

應用 ICC, WB

宿主 山羊

克隆性 多克隆

形式 全IgG

免疫原 位于第1100-1150氨基酸殘基之間的區域

自身抗體亞型 IgG

標記物 未標記

純度 抗原親和純化

抗原種屬 人

濃度 1000 µg/ml （1 mg/ml）

保存溫度 2 - 8 °C

有效期 自收貨之日起1年

緩沖液 Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊氮鈉

生產與純化工藝

本抗體的生產采用表位特異性親和純化策略：

1. 免疫原設計：針對人SA2蛋白中第1100至1150位氨基酸之間的區域（參考序列NP_006594.3）。該區域位于蛋白質C端附近，特異性較高。

2. 免疫程序：使用上述合成肽段對山羊進行免疫，誘導產生特異性抗血清。

3. 親和純化：將SA2特異的表位肽固定于固相支持介質上，通過親和層析從抗血清中特異性分離目標抗體。該策略確保抗體僅識別目標表位，減少非特異性背景。

4. 濃度測定：依據比爾定律，1 mg/ml IgG在280 nm波長下的吸光度（A280）為1.4。本品最終濃度為1 mg/ml（1000 µg/ml）。

表位定位：抗體識別的表位位于人SA2蛋白的第1100-1150殘基之間（NP_006594.3編號）。該區域在小鼠SA2中高度保守，因此抗體可與小鼠源SA2發生交叉反應。

特異性驗證

反應種屬：人、小鼠

識別表位：SA2蛋白C端附近區域（1100-1150 aa）

經ELISA和免疫印跡驗證的特異性：與人及小鼠SA2特異性結合

潛在交叉反應：由于SA2屬于黏連蛋白復合物亞基家族，與SA1（STAG1）具有一定同源性。本抗體是否識別SA1未明確驗證，建議在實驗中設置SA1已知表達的對照樣本進行評估。

生物學背景

SA2（基因符號：STAG2，GeneID: 10735）是黏連蛋白復合物的關鍵亞基之一。黏連蛋白復合物在細胞分裂過程中發揮以下核心功能：

姐妹染色單體粘連：在有絲分裂和減數分裂過程中將復制后的姐妹染色單體保持在一起。

染色體正確分離：在前期和中期，黏連蛋白必須從姐妹染色單體上解離，使它們能夠在后期向細胞兩極正常分離。SA2在此過程中參與調控黏連蛋白的解離。

轉錄調控：有趣的是，SA2還通過與NF-κB相互作用表現出轉錄調節活性，參與基因表達調控。

臨床意義：STAG2基因突變在多種癌癥（如膠質母細胞瘤、尤文肉瘤、膀胱癌等）中高頻出現，提示SA2作為腫瘤抑制因子的潛在角色。本抗體可用于研究SA2在細胞周期、腫瘤發生及轉錄調控中的具體機制。

應用與推薦稀釋比例

以下推薦稀釋比例為起始參考值。需注意，并非所有列出的應用均已在本實驗室完成具體驗證，建議用戶根據樣本類型和實驗體系進行梯度優化。

應用 推薦稀釋比例 備注

免疫細胞化學 1:500 - 1:2,000

免疫印跡 1:2,000 - 1:10,000 詳見下方標準操作條件

免疫印跡標準操作條件（經實驗室驗證）：

封閉液和抗體稀釋液：5% 脫脂牛奶-TBST

一抗孵育：過夜（4°C或室溫）

二抗推薦：使用驢抗山羊IgG（H+L）抗體（貨號A50-101P）

免疫細胞化學（ICC）典型流程：

細胞經固定（如4%多聚甲醛）和透化（如0.1% Triton X-100）后，與一抗（1:500-1:2000）孵育，隨后與熒光標記的二抗反應。建議同時進行DAPI核染色以輔助定位。SA2主要定位于細胞核，在有絲分裂期與染色體共定位。

陽性對照建議：

人源細胞系（如HeLa、293T）或小鼠細胞系（如NIH/3T3）的全細胞裂解物

已知SA2高表達的細胞（可通過Western Blot預驗證）

陰性對照建議：

使用正常山羊IgG替代一抗

使用SA2敲低或敲除細胞裂解物（如CRISPR/Cas9介導的STAG2敲除細胞）

使用與保存注意事項

保存條件：請于2-8°C條件下保存，切勿冷凍。反復凍融會導致抗體變性失效。在指定條件下，自收貨之日起1年內穩定有效。

緩沖液成分：本抗體溶于Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液（pH 7-8），含0.09%疊氮鈉作為防腐劑。如后續實驗涉及對疊氮鈉敏感的酶學檢測或細胞培養，請通過透析或脫鹽柱去除。

稀釋緩沖液建議：WB使用5%牛奶-TBST；ICC推薦使用含1% BSA和0.1% Triton X-100的PBS，以降低非特異性吸附并促進滲透。

分子量信息：人SA2蛋白的理論分子量約為141 kDa（基于Uniprot Q8N3U4）。在還原性SDS-PAGE中，可觀察到約140-150 kDa的條帶。若在預測分子量以外位置觀察到額外條帶，可能為降解產物、翻譯后修飾或非特異性條帶。

實驗優化提示：

若WB信號過強出現非特異性背景，可嘗試降低一抗濃度（如1:5000或更高稀釋度）或縮短曝光時間。

若信號過弱，可增加上樣量（推薦30-50 μg總蛋白/泳道）或延長一抗孵育時間。

ICC實驗中，若核信號不明顯，可優化固定/透化條件（如使用甲醇固定或降低Triton X-100濃度）。