一、產品概述
Texas Red-X NHS 酯(Texas Red®-X, succinimidyl ester)是一種胺反應性紅色熒光染料,為 Invitrogen 旗下 Texas Red® 商標染料的升級替代產品。該產品由艾美捷代理AAT Bioquest推出,貨號:AAT-474,通過琥珀酰亞胺酯(NHS 酯)官能團與蛋白質、抗體等生物分子上的伯胺基團共價偶聯,用于制備明亮紅色熒光生物偶聯物,廣泛應用于免疫熒光和流式細胞術等檢測場景。
二、光譜特性與熒光性能
參數 | 數值
激發峰 | 586 nm
發射峰 | 603 nm
外觀 | 紫色固體
分子量 | 816.94 Da
溶解性 | 溶于 DMSO
儲存條件 | 冷凍(<-15°C),嚴格避光
有效期 | 收貨后 12 個月
Texas Red-X NHS 酯的激發/發射峰位于約 586/603 nm,處于橙色至紅色光譜區域,適用于配備標準 TRITC 或 Texas Red 濾光片組的熒光顯微鏡和流式細胞儀。其熒光亮度優異,光穩定性良好,是多色成像實驗中紅色通道的可靠選擇。
三、核心結構優勢:X 間隔臂
相較于普通 Texas Red 染料,該產品的關鍵結構差異在于熒光團與 NHS 酯基團之間存在一個**七原子氨基己酰間隔臂**(“X" spacer)。這一設計具有以下功能意義:
特性 | 優勢
減少空間位阻 | 間隔臂將熒光團推離生物分子表面,降低染料與抗體/蛋白質之間的立體干擾
保持生物活性 | 染料遠離抗原結合位點或酶活性中心,標記后的抗體/蛋白質更可能保留天然功能
提高標記效率 | 間隔臂使 NHS 酯基團更易接近伯胺靶點,偶聯產率顯著高于無間隔臂的 Texas Red
四、單一異構體 vs. 混合異構體
產品類型 | 特點
混合異構體(#474) | 5- 和 6- 位異構體混合物,標記產物不均一
單一異構體(本產品) | 純化 5- 異構體,標記產物具有更高的一致性和可重復性
對于需要精確控制標記度和產物均一性的實驗(如定量流式分析、標準化免疫熒光染色),單一異構體形式可顯著減少批間差異,提升數據可靠性。
五、操作要點
1. 用 DMSO 復溶后分裝儲存于 -15°C 以下,避免反復凍融
2. 標記反應推薦在 pH 8.0–8.5 的碳酸氫鹽緩沖液中進行
3. 反應體系應避免含伯胺基團的緩沖劑(如 Tris、甘氨酸)
4. 標記完成后需通過脫鹽柱或透析去除游離染料
綜上,Texas Red-X NHS 酯(單一異構體)憑借 X 間隔臂帶來的標記效率提升和單異構體賦予的產物均一性,是傳統 Texas Red 染料的理想升級替代方案,適用于對偶聯質量和實驗重復性要求較高的紅色熒光標記應用。
文獻參考:
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Journal: Biochemistry (2005): 3494
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