產品概述
由艾美捷代理Agrisera推出的Anti-ATG8 | 自噬相關蛋白8抗體(兔多抗)(貨號:ARS-AS14 2769)為兔多克隆抗體,針對萊茵衣藻(*Chlamydomonas reinhardtii*)ATG8重組蛋白片段制備。ATG8是自噬途徑的核心標志蛋白,本抗體可廣泛識別多種植物及藻類來源的ATG8同源蛋白,適用于自噬過程監測及相關調控機制研究。
產品基本信息
項目 | 規格
產品編號 | AS14 2769 |
免疫原 | 萊茵衣藻ATG8重組蛋白片段(UniProt: A8JB85) |
宿主 | 兔 |
克隆性 | 多克隆 |
純度 | 血清 |
形式 | 凍干粉 |
含量 | 50 µL |
復溶 | 添加50 µL無菌水 |
儲存與穩定性
狀態 | 儲存條件
凍干粉/復溶后 | -20°C
復溶后長期保存 | 分裝凍存,避免反復凍融
操作提示:開蓋前請短暫離心,避免管蓋或管壁附著的凍干粉損失。
推薦工作濃度
應用 | 推薦稀釋比
免疫定位(IL) | 1:1000
免疫印跡(WB) | 1:1000~1:2000
預期分子量
項目 | 分子量
理論值 | 15.2 kDa
表觀值 | 約15 kDa
靈敏度
該抗體可檢測低至1 ng的重組萊茵衣藻ATG8蛋白,具有較高的檢測靈敏度。
物種反應性
已驗證反應性:擬南芥、馬達加斯加水蕹、萊茵衣藻、Chlorococcum dorsiventrale、陸地棉、雨生紅球藻、蘋果、本氏煙草、毛果楊、番茄、玉米。
預測反應性:菠蘿、甘藍型油菜、大麥、微單胞藻、蓮、水稻、黍屬、Parachlorella kessleri、三角褐指藻、海棗、白梨、小立碗蘚、北美云杉、馬鈴薯、普通小麥、團藻。
已知不反應:菟絲子屬、Symbiodinium sp.
技術特征
擬南芥ATG8同源蛋白識別譜
該抗體對擬南芥9種ATG8亞型的識別程度存在差異:
識別程度 | 亞型
高(70~80%保守性) | ATG8a(Q8LEM4)、ATG8b(Q9XEB5)、ATG8c(Q8S927)、ATG8d(Q9SL04)、ATG8e(Q8S926)、ATG8f(Q8VYK7)
較低(<70%保守性) | ATG8g(Q9LZZ9)、ATG8h(Q8S92)
該抗體對各亞型的識別強度不w全相同,結果判讀時需注意。
樣品提取與檢測建議
擬南芥樣本注意要點:
ATG8抗體在根組織中的背景信號通常比葉片組織更干凈,推薦優先使用根組織或優化提取流程
推薦參照álvarez等(2012)的提取方案以獲得最佳結果
ATG8信號對應約17 kDa的兩條條帶(擬南芥)
擬南芥總蛋白提取流程(參考):
1. 首先對植物施加自噬激活條件(如氮或碳饑餓、氧化脅迫)以誘導自噬過程
2. 在液氮中研磨葉片,加入提取緩沖液(100 mM Tris-HCl pH 8.0、400 mM蔗糖、1 mM EDTA、0.1 mM PMSF、10 mg/mL脫氧膽酸鈉、10 µg/mL亮抑肽酶、10 µg/mL胃酶抑素A、4%蛋白酶抑制劑混合液,v/v)
3. 4°C、500 × g離心10 min,去除細胞碎片
凝膠選擇建議:
推薦使用Midi-PROTEAN凝膠(中型)替代Mini-gel(小型),以獲得更好的ATG8條帶分辨率和更清晰的9種亞型分離效果
自噬誘導驗證
該抗體為自噬標志物檢測工具。建議在實驗設置中包含自噬誘導條件(如氮饑餓、碳饑餓或氧化脅迫處理),以驗證自噬通路的活化狀態。對于免疫定位實驗方案,請進一步咨詢技術支持。
基因背景
ATG8(自噬相關蛋白8)是自噬途徑的核心分子標志物,參與細胞內組分的降解與回收利用。在萊茵衣藻中,ATG8已被確立為自噬過程的分子標志物(Pérez-Pérez等,2010)。該蛋白在真核生物中高度保守,其脂化形式(ATG8-PE)與自噬體膜的結合是自噬體形成的關鍵步驟,ATG8的積累水平及電泳遷移率變化常被用于監測自噬活性。
應用領域
自噬途徑研究及自噬活性監測
植物及藻類營養脅迫響應的評估
細胞器降解及蛋白周轉研究
植物發育、衰老及逆境應答機制探索
*本產品僅供研究使用。如需含ProClin防腐劑版本,可特別定制。如需免疫定位方案詳情,請聯系技術支持。
部分引用文獻:
Castillo-Olamendi et al. (2026). Cytosolic Ca2+ mediates ATG8i-autophagy activation under osmotic stress in Arabidopsis thaliana. Planta . 2026 Jun 6;264(1):16. doi: 10.1007/s00425-026-05045-4.
Cheng et al. (2026). The MdPIF3-MdBPC2-mediated expression of MdATG4a regulates light utilization efficiency in apple plants under low light.Plant Physiol . 2026 Mar 30:kiag173. doi: 10.1093/plphys/kiag173.
Ma et al. (2026). Hydrogen sulfide promotes wheat immunity against stripe rust through TaATG6c persulfidation. Stress Biol . 2026 Feb 13;6(1):16. doi: 10.1007/s44154-026-00292-7.
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