產品概述

由艾美捷代理Agrisera推出的抗AtpB（ATP合酶β亞基）抗體（兔源）（貨號：AS05 085）是一款兔源多克隆抗體，免疫原為KLH偶聯的合成多肽，該多肽序列基于已公布的植物、藻類（葉綠體與線粒體來源）及細菌的F型ATP合酶β亞基保守區域設計，涵蓋擬南芥葉綠體AtpB（P19366/AtCg00480）、線粒體AtpB-1（P83483/At5g08670），以及萊茵衣藻（P06541、A8IQU3）等參考序列。抗體以血清形式提供，經凍干處理，每支規格為50 µl。推薦復溶體積為50 µl無菌水，復溶后即為原倍血清。建議分裝保存于-20°C，避免反復凍融；開蓋前需短暫離心。

分子量與識別特性

參數 | 數值/說明

預期表觀分子量（擬南芥） | 53.9 kDa

預期表觀分子量（菠菜） | 53.7 kDa

預期表觀分子量（集胞藻PCC6803） | 51.7 kDa

細胞定位 | 葉綠體基質CF1復合體、線粒體基質F1復合體、細菌質膜

表位位置 | 位于β折疊片層，部分暴露于AtpB蛋白表面近端

該抗體可同時識別葉綠體CF1-ATP合酶β亞基、線粒體F1-ATP合酶β亞基，以及絕大多數已知細菌F型ATP合酶。免疫原多肽位于β折疊區域，該區域在F型ATP合酶中高度保守，賦予抗體極廣的物種反應性。

推薦應用與稀釋比例

應用 | 推薦稀釋度

免疫熒光（IF） | 1 : 100

藍色天然PAGE（BN-PAGE） | 1 : 5000

超微結構膨脹顯微術（U-ExM） | 1 : 2500

蛋白質印跡（WB） | 1 : 2000 – 1 : 5000（起始推薦1:3000）

物種反應性：覆蓋三域生命的泛用性

該抗體具有極為寬廣的物種反應性，涵蓋植物、藻類、細菌、真菌及動物組織，具體分類如下：

已驗證植物/藻類：擬南芥、煙草、本氏煙草、水稻（根、葉、花粉）、玉米、大麥、高粱、大豆、番茄、菠菜、豌豆、棉花、油菜、刺槐、青萍、卷柏、金魚藻、小球藻、萊茵衣藻、佐芬衣藻、綠球藻、微擬球藻、厚皮藻、三角褐指藻、四團藻等。

已驗證細菌/真菌：蠟樣芽孢桿菌、大腸桿菌、幽門螺桿菌、枯草芽孢桿菌（預測）、惡臭假單胞菌（預測）、釀酒酵母、栗褐鏈霉菌（預測）、集胞藻PCC6803（可作為內參）。

已驗證動物組織：牛、雞、豬、大鼠、鮭魚、海豹、飛蝗。

預測反應性：多種藍藻、擬南芥近緣種、葡萄、木薯、小麥、畫眉草、多花黑麥草、大葉藻、煙草近緣種、鮑曼不動桿菌、艱難梭菌、鼠傷寒沙門氏菌等。

無反應性：古菌V型ATP合酶（系統進化上非F型，不識別）。

該抗體被明確推薦作為萊茵衣藻、集胞藻PCC6803及蠟樣芽孢桿菌的Western blot上樣內參（loading control）。

蛋白背景與功能定位

ATP合酶是生物能量代謝的核心酶復合物，催化ADP和無機磷酸合成ATP，利用跨膜離子梯度（質子或鈉離子）儲存的能量驅動反應。F型ATP合酶由膜內Fo亞復合體和膜外F1亞復合體組成：

β亞基（AtpB） 是F1頭部的主要催化亞基，含有核苷酸結合位點，負責ATP的合成與水解。

在植物細胞中，AtpB由核基因（線粒體β亞基）和細胞器基因（葉綠體β亞基）分別編碼，本抗體可同時識別這兩種來源的蛋白。

實驗應用要點與技術優勢

1. 多功能應用支持：

BN-PAGE：采用洋地黃皂苷（digitonin）增溶（去垢劑:蛋白=4:1），每孔上樣100 µg蛋白于4.5%–16%梯度凝膠（厚2 mm），一抗1:5000稀釋，可清晰檢測完整F1-ATP合酶復合體及其亞復合體。

IF與U-ExM：適用于細胞水平及超分辨顯微結構中的ATP合酶定位，為能量代謝器分布研究提供空間信息。

WB：推薦1:2000–1:5000起始稀釋，在總蛋白中信號強且條帶清晰。

2. 雙區室識別優勢：

該抗體在同一植物樣本中可同時檢測葉綠體和線粒體來源的AtpB，尤其適用于研究不同細胞器能量代謝的協同響應，或比較光合組織與非光合組織中ATP合酶的差異表達。

3. 跨物種內參適用性：

在光合模式生物（萊茵衣藻、集胞藻）及細菌（蠟樣芽孢桿菌）中已驗證可作為穩定內參，為缺乏傳統管家蛋白（如Actin、Tubulin）的體系提供了可靠的歸一化方案。

實驗流程優化建議

樣本制備：可根據下游應用選用總蛋白提取液、膜富集組分或細胞器分離組分。BN-PAGE需使用溫和去垢劑（如洋地黃皂苷或月桂基麥芽糖新戊二醇）以維持復合體完整性。

SDS-PAGE凝膠濃度：建議使用10%或12%分離膠，目標條帶清晰位于50–55 kDa區域。

陽性對照：推薦使用擬南芥幼苗總蛋白或菠菜葉總蛋白、大腸桿菌裂解液、分離的小鼠線粒體。

陰性對照：古菌提取物（已知無反應性）或預吸附抗體的上清。

儲存與定制說明

凍干及復溶后均建議于-20°C保存。如需在最終產品中添加ProClin防腐劑，可另行提出定制要求。

注意事項

1. 該抗體為未純化血清，背景可能高于親和純化產品，建議封閉步驟延長（室溫1–2小時）并使用高靈敏度化學發光底物時適當縮短曝光時間。

2. 檢測動物組織樣本時，抗體已確認對多種脊椎動物和無脊椎動物有效，拓展了植物抗體在比較生物學中的使用邊界。

總結

AS05 085 抗體是當前市面上覆蓋范圍廣的F型ATP合酶β亞基檢測工具之一，其特別價值在于：

三域覆蓋：植物（雙區室）、藻類、細菌、真菌、動物通檢；

四重應用：WB、BN-PAGE、IF、U-ExM，兼顧變性/天然檢測與可視化；

內參功能：在光合微生物及部分細菌中可作為穩定上樣對照；

進化保守表位：位于β折疊表面暴露區域，確保了跨物種識別的可靠性。

該抗體特別適用于能量代謝研究、細胞器標記、光合作用與呼吸作用比較分析，以及缺乏常規內參物種的蛋白定量工作。