產品概述

由艾美捷代理推出的抗VDAC1-5（電壓依賴性陰離子通道蛋白1-5）抗體（貨號：AS07 212）是一款兔源多克隆抗體，免疫原為KLH偶聯的合成多肽，該多肽序列在目前已發現的所有高等植物VDAC蛋白中高度保守，涵蓋擬南芥全部5個成員（VDAC1–5，詳見產品信息）。抗體經免疫原親和純化，以凍干形式提供于PBS pH 7.4緩沖體系中，每支規格為50 µg。推薦復溶體積為50 µl無菌水，復溶后濃度約為1 µg/µl。建議分裝保存于-20°C，避免反復凍融；開蓋前請短暫離心。

分子量與識別特性

參數 | 數值/說明

預期/表觀分子量（擬南芥） | 約29 kDa

細胞定位 | 線粒體外膜（專屬Western blot區室標記物）

識別表位 | 高等植物VDAC1–5共有保守序列

該抗體可同時識別擬南芥所有5個VDAC亞型，在常規SDS-PAGE中呈現單一條帶，適用于總線粒體含量評估。

推薦應用與稀釋比例

應用 | 推薦稀釋度/用量

免疫定位（IL） | 1 : 500

蛋白質印跡（WB） | 1 : 5000（每孔上樣2–30 µg蛋白）

二維BN/SDS-PAGE | 詳見Piechota等（2010）方法

物種反應性詳述

該抗體在高等植物中具有極為廣泛的適用性，具體反應范圍如下：

反應類型 | 代表性物種

已驗證反應性 | 擬南芥、水稻、玉米、菠菜、番茄、甜菜、花椰菜、蕪菁、柑橘、金桔、花粉管、小立碗蘚、長芒莧

預測反應性 | 油菜、大豆、棉花、煙草、馬鈴薯、小麥、高粱、葡萄、豌豆、菜豆、蓖麻、木薯、麻風樹、冰葉日中花、蒺藜苜蓿、大車前、白楊、碧桃、可可、擬南芥近緣種等

已確認無反應性 | 萊茵衣藻、大豆（部分品種）、硅藻、蘋果、釀酒酵母

*注：大豆同時出現在預測反應性和無反應性列表中，可能與品種或組織特異性相關，建議以實驗驗證為準。

蛋白背景與功能定位

VDAC（電壓依賴性陰離子通道），亦稱線粒體孔蛋白，是定位于線粒體外膜上的β-桶狀擴散孔道蛋白。其主要功能包括：

介導線粒體與胞質間ATP、ADP、無機磷酸及代謝中間產物的跨膜交換；

參與線粒體通透性轉換及細胞凋亡調控。

VDAC家族在擬南芥中有5個成員（VDAC1–5），不同成員可能在組織分布、脅迫響應及代謝調控中具有非冗余功能。本抗體識別5個成員共有的保守表位，檢測結果反映VDAC家族總體蛋白水平。

核心應用場景與實驗要點

1. 線粒體富集效率評估（WB定量）

作為線粒體外膜標記物，本抗體可用于：

評估線粒體分離/富集流程的效率——比較總蛋白與線粒體組分中VDAC信號強度；

定量線粒體蛋白上樣量——根據產品信息，線粒體組分檢測推薦上樣量僅為2–10 µg，提示該抗體靈敏度高，是微量線粒體樣本的理想檢測工具。

操作建議：

常規總蛋白WB推薦上樣量20–30 µg，線粒體富集組分可降至2–10 µg；

一抗1:5000稀釋，建議孵育4°C過夜以獲得最佳信噪比；

可搭配胞質標記物（如HSP70、Actin）進行平行檢測，驗證分餾純度。

2. 二維BN/SDS-PAGE（復合體分析）

該抗體可與藍色天然PAGE聯用，用于檢測VDAC在線粒體外膜中的寡聚狀態及與其他蛋白的相互作用。詳細的二維BN/SDS-PAGE方法學參照Piechota等（2010）文獻。此類應用適用于：

分析VDAC在不同生理條件下的聚集/解聚狀態；

研究VDAC與線粒體其他膜蛋白（如TOM復合體、ANT）的相互作用。

3. 免疫定位（IL）與花粉管研究

本抗體已成功應用于花粉管的免疫定位實驗，操作方法和圖像可在指定資源中查閱。建議稀釋度1:500，需配合適當固定和通透條件。在此類應用中，VDAC作為線粒體分布的空間標記，可用于追蹤花粉管生長過程中線粒體的動態重排。

實驗關鍵注意事項

1. 物種局限性：本抗體不適用于衣藻、硅藻、酵母及蘋果，請避免在這些物種中使用。

2. 上樣量優化：WB稀釋度固定為1:5000，但上樣蛋白量需在2–30 µg范圍內根據樣本類型（總蛋白vs線粒體組分）進行優化。

3. 陽性對照：推薦使用擬南芥幼苗線粒體富集組分作為陽性對照。

4. 儲存：復溶后分裝保存于-20°C，避免反復凍融。

總結

AS07 212 抗體是一款針對高等植物VDAC1–5家族的高親和力、廣譜檢測工具，其核心價值在于：

線粒體外膜專屬標記：適用于線粒體富集效率評估及亞細胞定位；

家族全覆蓋：識別擬南芥全部5個VDAC成員，反映總體線粒體含量；

多平臺兼容：支持WB、IL及二維BN/SDS-PAGE，適用于復合體分析；

跨物種廣泛性：覆蓋單/雙子葉、苔蘚及多種作物。

該抗體是植物線粒體生物學研究的基礎工具，尤其在能量代謝分析、脅迫響應中線粒體動態監測，以及花粉管生長等發育生物學研究中具有重要應用價值。如需詳細實驗方案或特殊物種驗證，請參考完整產品說明書或聯系技術支持團隊。

文獻參考：

Holzner et al. (2026). The chloroplast ionome shines light on the dynamics of organellar iron homeostasis. Plant Cell. 2026 Jan 29:koag017. doi: 10.1093/plcell/koag017.

Iglesias-Sanchez et al. (2025).Activation of Alternative Oxidase Ensures Carbon Supply for Ethylene and Carotenoid Biosynthesis During Tomato Fruit Ripening. Plant Physiol. 2025 Oct 31;199(3):kiaf516. doi: 10.1093/plphys/kiaf516.

Konishi and Noguchi (2025). The Mitochondrial Respiratory Chain is Important as an Electron Sink to Avoid Over-Reduction of Chloroplasts in Arabidopsis thaliana Leaves under High-Light Stress. Plant Cell Physiol. 2025 Jun 5:pcaf062. doi: 10.1093/pcp/pcaf062.