在磷酸二酯酶研究及藥物發現領域，準確、高效地測定酶活性是化合物篩選和先導物優化的關鍵環節。傳統的磷酸二酯酶檢測方法往往依賴偶聯酶系統、放射性底物或標記核苷酸，這些方法不僅操作繁瑣，還容易引入假陽性干擾和背景噪音，增加了方法開發的時間和成本。由艾美捷代理BellBrook推出的Transcreener® AMP2/GMP2 磷酸二酯酶活性測定試劑盒（貨號：3015-1K）提供了一套基于直接檢測AMP或GMP產物的均相、即混即讀生化檢測方案，為磷酸二酯酶抑制劑篩選和先導化合物發現帶來全新解決方案。

一、核心原理：直接檢測AMP/GMP產物，實現通用性檢測

本試劑盒的檢測原理基于磷酸二酯酶反應的共性——所有磷酸二酯酶催化環狀核苷酸（如cAMP、cGMP）水解為相應的單磷酸核苷酸（AMP或GMP）。此外，該平臺同樣適用于任何產生AMP或GMP的酶促反應（如連接酶、合成酶等）。通過特異性識別并定量反應體系中生成的AMP或GMP，即可精確反映酶活性。

技術核心由兩大關鍵組分構成：

1. AMP或GMP選擇性抗體：能夠高度特異性結合反應生成的AMP或GMP。

2. 遠紅外熒光示蹤劑：與AMP或GMP競爭結合抗體。

當磷酸二酯酶催化底物水解產生AMP或GMP時，產物與示蹤劑競爭結合抗體，引起熒光偏振或時間分辨熒光共振能量轉移信號的可量化變化。通過檢測信號變化即可精確計算產物生成量，進而測定酶活性。

與傳統方法相比，該技術無需偶聯酶、無需放射性底物、無需對底物或產物進行化學標記，w全規避了偶聯酶體系可能帶來的底物競爭和化合物干擾問題。

二、關鍵優勢：從研發到HTS的全鏈條支撐

1. 真正的通用性檢測

該試劑盒可檢測任何產生AMP或GMP的酶促反應，不僅適用于各類磷酸二酯酶（PDE1-PDE11），還可用于連接酶、合成酶等其他酶類。無論底物是cAMP、cGMP、ATP還是NAD，一種檢測體系即可覆蓋，c底簡化了方法開發流程。

2. 唯1的即混即讀AMP檢測方案

市面唯1無需偶聯酶、直接檢測未標記AMP或GMP的即混即讀試劑盒，真正實現了AMP/GMP的通用型讀數。

3. 超高靈敏度，節省酶用量

在低轉化率下仍可準確檢測AMP/GMP積累，對低活性酶或難以表達純化的靶點尤為適用。高靈敏度意味著每孔所需酶量大幅降低，有效節約昂貴的重組蛋白成本。

4. 遠紅外讀數，降低化合物干擾

采用遠紅外熒光檢測窗口（FP及TR-FRET格式），有效避開了多數小分子化合物在紫外-可見光區的自發熒光和光吸收干擾，在高通量篩選中的假陽性率顯著降低。

5. 即混即讀工作流程，HTS-ready

均相檢測模式無需洗滌或分離步驟，操作流程僅為：進行酶反應 → 加入檢測試劑 → 讀取信號。兼容96孔、384孔及1536孔板，與自動化液體工作站無縫對接，非常適合高通量篩選應用。

6. 方法學靈活性

既可作為終點法使用，也可通過多時間點取樣實現連續監測。

三、應用場景與適用范圍

本試劑盒專為純化酶體系設計，適用于：

磷酸二酯酶活性定量：測定PDE家族成員的酶促反應動力學參數。

磷酸二酯酶抑制劑篩選：快速評估化合物對多種PDE靶點的抑制活性。

任何AMP/GMP產生酶的活性檢測：包括連接酶、合成酶等。

重要提示：

本品為體外生化活性檢測試劑盒，不適用于細胞裂解液、血液、血清或其他生物樣品的直接檢測。

試劑盒提供完整的檢測試劑組套，酶蛋白需單獨購買。

四、檢測格式選擇指南

試劑盒提供兩種熒光檢測格式，適配不同實驗室設備配置：

檢測格式 | 特點 | 推薦應用場景

熒光偏振 (FP) | 操作簡單，儀器普及度高 | 常規活性測定和中等通量篩選

TR-FRET | 背景低，信噪比優 | 高靈敏度HTS和低豐度樣品檢測

兩種格式均采用相同的核心檢測原理和操作流程，可根據實驗室現有讀板儀配置靈活選擇。